"SK-N-SH epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：SK-N-SH細胞系由J.L.Bieder建系，它與SK-N-MC所不同的是倍增時間較長且多巴胺-β-羥基酶水平較高。 SK-N-SH在細胞介導(dǎo)的細胞毒性試驗中用作靶細胞系。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
OVCAR.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞
U138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT3細胞、Y3.AG.1.2.3細胞、MSTO-211 H細胞
LMH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAOS 2細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞、NCI-H920細胞
細胞生長：貼壁
SK-N-SH epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２傳代
University of Arizona Cell Culture-893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2132細胞、SKBr3細胞、Sp2/O細胞
CFPAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
A2780S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞
HCT 116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1694細胞、MOLT-16細胞、Metastatic Variant-522細胞
OSC19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL-6細胞、SEG-1細胞、SU86_86細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-N-SH epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：懸浮生長
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
RPMI 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JIMT細胞、HuLEC-5a細胞、H-735細胞
RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞
HSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
FAK+/+細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1869細胞、Melanoma 14細胞、RD-ES細胞
CCRF SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞
HDQ-P1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT.116細胞、A-673細胞、HIEC細胞
TE-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 28細胞、MFC細胞、REC-1細胞
SK-SH-SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY-7701細胞、SKO007細胞、RS4;11細胞
SNU-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH2細胞、NPC-TW01細胞、NCIH1435細胞
SK-N-SH epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
KTC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
ZR-75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
JROECL21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OsA-CL細胞、HCMEC(BL12-H)細胞、EBC-1/original細胞
P3 88 D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
MGC803細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞
SN12C-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBL-5細胞、SK-N-FI細胞、Strain KB細胞
HG2855細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞
EB-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rainbow Trout Embryo細胞、U251n細胞、CHO-S細胞
LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞
H-209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：253J-BV細胞、UCLA RO-81A-1細胞、KS-1 [Human glioblastoma]細胞
CEM-CCRF (CAMR)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-358細胞、SKM-1細胞、Epstein-Barr-3細胞
NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
Granta-519細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS13細胞、RPMI 8226/S細胞、SUM 102PT細胞
GM02219細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞
BJA-B-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GES1細胞、OVCAR-10細胞、SLMT-1細胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-12細胞、HCC2108細胞、CHP 100細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
HMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
CCD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞
MV522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC-28細胞、MCF-10A細胞、JROECL 33細胞
639-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-TU-8988S細胞、CAL27細胞、NCI-H1435細胞
HT-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞
PG-4 (S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SB細胞、MCF7細胞、COC1/CDDP細胞
Roswell Park Memorial Institute 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC PRF 5細胞、HuT-102細胞、GM02219細胞
H-1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞
HP615細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
VP 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-680N細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞、UM-UC3細胞
PG-4(S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞
ROS 17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞
HBL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞
NCI-H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
NCI-H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
EHEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞
I90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES 13細胞、SW1463細胞、INS-1細胞
NCI.H226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-B細胞、5-8F細胞、NCI H508細胞
GM04680細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞
H9c2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DU_145細胞、HOS(TE85)細胞、FOX-NY細胞
KMM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF12F細胞、RPMI 2650細胞、CCRFCEM細胞
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
BMF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK10細胞、SW 1990細胞、N9細胞
GA-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞
HKBML細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 766細胞、H-676細胞、RPVSMC細胞
INS-1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AA-Mel細胞、Ramos (RA)細胞、PL-45細胞
Hs-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE2細胞、NTERA2-D1細胞、SNU5細胞
OCIAML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DF1細胞、Hk-2細胞、GM00637I細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
NG 108-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03569B細胞、MDA-MB-436細胞、A431細胞
KYSE-450細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHHCALL2細胞、LA-N-1細胞、SW480細胞
SK-N-SH epithelioid cells人神經(jīng)母細胞瘤細胞系
SUDHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
BE2M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK-1細胞、NOMO1細胞、U-266 AR1細胞
GM01232細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu212細胞、HCC-1187細胞、C-8161細胞
HSF2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF-7細胞、769P細胞、RMG1細胞
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