"KALS-1 epithelioid cells人神經(jīng)膠質瘤細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長２４小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
HuP-T4細胞系相關產品：LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
H2052_MM細胞系相關產品：SNU-368細胞、GBCSD細胞、WM 451-Lu細胞
Anip973細胞系相關產品：WI-38細胞、COLO-320-DM細胞、MDCKII細胞
細胞生長：貼壁
KALS-1 epithelioid cells人神經(jīng)膠質瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細胞解凍程序：依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因實驗需要，必須有所不同時，務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細胞適應后，方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細胞而言差異極大，請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內。依據(jù)細胞種類和濃度，于無菌操作臺內?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言，１%以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細胞中去除，待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因對DMSO敏感或會造成細胞分化之細胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細胞均勻混合后，轉移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細胞傳代方法：１：２傳代
GM01232E細胞系相關產品：P3.times.63 Ag8.653細胞、CATH.a細胞、RS 4;11細胞
SN12-PM6細胞系相關產品：Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞
NCIH2029細胞系相關產品：16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞
MC57細胞系相關產品：NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
AdHek細胞系相關產品：BHT101細胞、WPE-int細胞、Hs 766細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KALS-1 epithelioid cells人神經(jīng)膠質瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：多邊形
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
MBT2細胞系相關產品：PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞
SLK細胞系相關產品：SUM-52-PE細胞、SK_N_BE2C細胞、CAMA細胞
SF 295細胞系相關產品：MDA-MB 453細胞、SW-1116細胞、HuP-T3細胞
E0771細胞系相關產品：Human Corneal Epithelial cells-Transformed細胞、BC-3-H-I細胞、kms 11細胞
Pan02細胞系相關產品：OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
NB1-RGB細胞系相關產品：D10.G4.1細胞、SW 1116細胞、C-4 I細胞
COLO.205細胞系相關產品：PC3細胞、RCM1細胞、NCI-1155細胞
H1436細胞系相關產品：Hep 2細胞、NRK clone 49F細胞、D6P2T細胞
YTMLC-90細胞系相關產品：ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
FOXNY細胞系相關產品：B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
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ssMCF7細胞系相關產品：Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞
UM-UC-14細胞系相關產品：CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
hTERT-RPE-1細胞系相關產品：SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞
NCI-H441細胞系相關產品：HCC-366細胞、MN 60細胞、DITNC1細胞
KM12 SM細胞系相關產品：Madin Darby Bovine Kidney細胞、SCH細胞、GAK細胞
PGLH7細胞系相關產品：CHL-11細胞、293 EBNA細胞、OACP4C細胞
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CCC-HPF-1細胞系相關產品：rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞
WRL-68細胞系相關產品：LS411細胞、MeT-5A細胞、SUDHL-5細胞
Madin-Darby Bovine Kidney細胞系相關產品：C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞
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MADB-106細胞系相關產品：MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
MDA MB 134VI細胞系相關產品：KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞
LM-TK-細胞系相關產品：RPTC細胞、ID8細胞、GC-2spd(ts)細胞
SUNE 1細胞系相關產品：Buffalo Rat Liver-3A細胞、SUDHL6細胞、GLAG-66細胞
RMC細胞系相關產品：NBL-2細胞、NCI-H1355細胞、Hs343T細胞
Line 870 Emory University-4細胞系相關產品：CCD841CoTr細胞、U343細胞、Wien-133細胞
KU1919細胞系相關產品：MC9細胞、NMC-G1細胞、Panc 04.03細胞
MCA38細胞系相關產品：U-hth74細胞、DMS 273細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞
KYSE 410細胞系相關產品：ZR7530細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、786.O細胞
IAR 20細胞系相關產品：NG-108-15細胞、N9細胞、293 F細胞
OV1/P細胞系相關產品：CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
H-1385細胞系相關產品：WIL2 Secreting細胞、H125細胞、Bat lung細胞
LAPC4細胞系相關產品：EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
McCoy細胞系相關產品：NCIH1373細胞、HAVSMC細胞、CA-46細胞
SU-DHL-4細胞系相關產品：NCI-522細胞、SW 579細胞、NIHOVCAR3細胞
MES 23.5細胞系相關產品：C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
MAVER細胞系相關產品：HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
WML2細胞系相關產品：UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
KALS-1 epithelioid cells人神經(jīng)膠質瘤細胞系
H-498細胞系相關產品：NHRF細胞、SNU368細胞、COLO 320 DM細胞
S.B.細胞系相關產品：BEL7402細胞、LIM1215細胞、SNU-5細胞
H-2073細胞系相關產品：Sf21細胞、MLMA細胞、NCI-H889細胞
SF 295細胞系相關產品：MDA-MB 453細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、TGW-I-nu細胞
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