"SF126 epithelioid cells人腦瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞來(lái)源于星形膠質(zhì)細(xì)胞瘤;膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)陰性;可以特異地結(jié)合β-內(nèi)啡肽。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 SU-DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SL-1細(xì)胞、H2227細(xì)胞、B-CPAP細(xì)胞 HOPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC-893細(xì)胞、Normal Rat Kidney細(xì)胞、H209細(xì)胞 Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:18G3.cl 1細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞、Pa16C細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 SF126 epithelioid cells人腦瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細(xì)胞解凍程序:依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無(wú)法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒?yàn)需要,必須有所不同時(shí),務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細(xì)胞適應(yīng)后,方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對(duì)細(xì)胞而言差異極大,請(qǐng)務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度,于無(wú)菌操作臺(tái)內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對(duì)絕大多數(shù)細(xì)胞而言,1%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO,不會(huì)對(duì)細(xì)胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細(xì)胞中去除,待第二天確定細(xì)胞生長(zhǎng)或貼附良好后再去除即可。惟對(duì)極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會(huì)造成細(xì)胞分化之細(xì)胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細(xì)胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:3傳代;3-4天1次。 Alexander cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 c18細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞 NCIH1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2.35細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞 OKT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TNC-1B12B4細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞、343 MG細(xì)胞 UWB1.289+BRCA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan 1細(xì)胞、MDA-MB-435細(xì)胞、SUM149細(xì)胞 BLO-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-Swiss細(xì)胞、MCF 7B細(xì)胞、16HBE細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 SF126 epithelioid cells人腦瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞 購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來(lái)表示單位。 MARC-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-26細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞 RT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRFCEM細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞 Jeko1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞 SNT-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E-6細(xì)胞、HPAEC細(xì)胞、HET-1A細(xì)胞 Hs 766細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52PE細(xì)胞、A172細(xì)胞、HF-91細(xì)胞 Strain KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-T CEM細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞、H-1792細(xì)胞 NK62a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細(xì)胞、ZYM-SVEC01細(xì)胞、PG-LH7細(xì)胞 ETCC007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VP303細(xì)胞、Panc 08.13細(xì)胞、RCS細(xì)胞 MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA1細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞 KY70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、SNU398細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞 SF126 epithelioid cells人腦瘤細(xì)胞系 DiFi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL10細(xì)胞、MLM細(xì)胞、8305C細(xì)胞 SJ-RH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞、HFB細(xì)胞 MFE 296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK UT 1細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞 SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞 NCIH146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H64細(xì)胞、A375SM細(xì)胞、293-F細(xì)胞 H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 3960細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞 H146細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 3960細(xì)胞、CWR22-Rv1細(xì)胞、HFLS-OA細(xì)胞 HREC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1672細(xì)胞、J.E6-1細(xì)胞、PLC-PRF-5細(xì)胞 SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞 P30/0HK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC3細(xì)胞、H2107細(xì)胞、293 Ad5細(xì)胞 P3JHR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC7細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞 HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞 NE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159 PT細(xì)胞、MGC803細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞 XuanWei Lung Cancer-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM 2132細(xì)胞、MFE 280細(xì)胞、R D細(xì)胞 GM03569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA-87-1細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞、BV2細(xì)胞 293GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞 MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞 16HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC38細(xì)胞、RASMC細(xì)胞、SNB.19細(xì)胞 Rca-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT39細(xì)胞、MDA-MB 231細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞 HEK293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細(xì)胞、251MG細(xì)胞、B16F10細(xì)胞 McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞 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