"Neuro-2a epithelioid cells小鼠腦神經(jīng)瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 OV-90細胞系相關產(chǎn)品:P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞 CCC-HPF-1細胞系相關產(chǎn)品:rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞 SHEE細胞系相關產(chǎn)品:COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞 細胞生長:貼壁 Neuro-2a epithelioid cells小鼠腦神經(jīng)瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結凍時體積會增加約10%,必須預留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;2-3天換液1次 Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關產(chǎn)品:NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞 Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關產(chǎn)品:NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞 C918細胞系相關產(chǎn)品:BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞 TF1細胞系相關產(chǎn)品:NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞 NCI.H522細胞系相關產(chǎn)品:PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Neuro-2a epithelioid cells小鼠腦神經(jīng)瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 LoMeT-ccRcc細胞系相關產(chǎn)品:RASMCs細胞、EoL-1細胞、OVCAR.5細胞 MHCC97-H細胞系相關產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、RIN m5F細胞、MC3T3-E1(C4)細胞 Ramos-2G6-4C10細胞系相關產(chǎn)品:BT 549細胞、PANC0327細胞、COS7細胞 Vero E-6細胞系相關產(chǎn)品:OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞 A1847細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H345細胞、NCI-H647細胞、P-2003細胞 CEMx721.174.T2細胞系相關產(chǎn)品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞 OKAC1細胞系相關產(chǎn)品:P3JHR1細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞、MC57細胞 JM細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞 HUASMC細胞系相關產(chǎn)品:HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞 HITT15細胞系相關產(chǎn)品:CNE-1細胞、Lu-65細胞、HR-1細胞 Neuro-2a epithelioid cells小鼠腦神經(jīng)瘤細胞系 MMAc-SF細胞系相關產(chǎn)品:HEB細胞、Kit-225-K6細胞、MB157細胞 EFM192A細胞系相關產(chǎn)品:X63-Ag8-653細胞、HSC(Human Schwann)細胞、SU-DHL-8細胞 SK-RC-39細胞系相關產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞 PAI細胞系相關產(chǎn)品:UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞 6T-CEM細胞系相關產(chǎn)品:SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞 Vero from pool #76細胞系相關產(chǎn)品:TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞 Vero from pool #76細胞系相關產(chǎn)品:TM-3細胞、DoTc2 4510細胞、HCE-2 [50.B1]細胞 C-8161細胞系相關產(chǎn)品:PLB-985細胞、BS-C-1細胞、SNU-423細胞 Murine Thymic Epithelial Cell line 1細胞系相關產(chǎn)品:T-84細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞、PA I細胞 NCI-H774細胞系相關產(chǎn)品:UMUC14細胞、BE2_C細胞、CCC-HEL-1細胞 FU-MMT-1細胞系相關產(chǎn)品:KG-1a細胞、H-522細胞、SK-Mel 2細胞 McA-RH 7777細胞系相關產(chǎn)品:H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞 C127細胞系相關產(chǎn)品:M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞 KYSE-410細胞系相關產(chǎn)品:TE1細胞、SKMEL-1細胞、BTT739細胞 SUD-4細胞系相關產(chǎn)品:CHOK1細胞、H4-II-E-C3細胞、CHL-IU細胞 P3X63 AG8-653細胞系相關產(chǎn)品:T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞 HCC-827細胞系相關產(chǎn)品:MCF-7B細胞、NCI-H1341細胞、SW 527細胞 NCTC929細胞系相關產(chǎn)品:OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞 WiDr細胞系相關產(chǎn)品:HPAF細胞、TOV-112細胞、L cell細胞 PCI-4.2細胞系相關產(chǎn)品:CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞 HARAB細胞系相關產(chǎn)品:EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞 OV 2008細胞系相關產(chǎn)品:FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞 343MG細胞系相關產(chǎn)品:Fox/NY細胞、ECC-12細胞、BCP-1細胞 SCC-9細胞系相關產(chǎn)品:Ls-174-T細胞、TU 686細胞、A2780/CP70細胞 Astrocyte type I clone細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞 Human Kidney-2細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞 PLA-801C細胞系相關產(chǎn)品:FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞 NUGC-3細胞系相關產(chǎn)品:H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞 R-1059-D細胞系相關產(chǎn)品:DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞 H-2342細胞系相關產(chǎn)品:HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞 CCC-HEL-1細胞系相關產(chǎn)品:SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞 SUM-159PT細胞系相關產(chǎn)品:Hs683細胞、OCI-LY-3細胞、LC2/Ad細胞 JB6 [Mouse]細胞系相關產(chǎn)品:NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞 SW1463細胞系相關產(chǎn)品:H69細胞、SF539細胞、TE1細胞 GM06141細胞系相關產(chǎn)品:RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞 hEM15A細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2591細胞、U-251_MG細胞、M-14細胞 GM00637B細胞系相關產(chǎn)品:Neukoplast細胞、L-M(TK-)細胞、alphaTC1 Clone 6細胞 UMNSAH-DF1細胞系相關產(chǎn)品:PC10細胞、BE(2)-M17細胞、CAL-12T細胞 TCam 2細胞系相關產(chǎn)品:COLO-320-HSR細胞、OCI-Ly 7細胞、LNT-229細胞 LAN-1細胞系相關產(chǎn)品:NCIH460細胞、KMM1細胞、BTI-Tn5B14細胞 L78細胞系相關產(chǎn)品:L929(NCTC)細胞、HEC-151細胞、MCF-12F細胞 MLM細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞 OCI/AML2細胞系相關產(chǎn)品:BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞 MLA-144細胞系相關產(chǎn)品:H-1963細胞、WEHI 231細胞、P3X63Ag8653細胞 MDCK2細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-134細胞、Jurkat77細胞、SPC-A-1細胞 HT-55細胞系相關產(chǎn)品:BT-474細胞、NS1/1-Ag4.1細胞、HLEB-3細胞 H716細胞系相關產(chǎn)品:Colo16細胞、BRL 3A細胞、NCI-H1666細胞 NCI-H1781細胞系相關產(chǎn)品:253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞 HS940細胞系相關產(chǎn)品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞 CCD 841 CoN細胞系相關產(chǎn)品:SUD4細胞、DF-1細胞、GM05887A細胞 H-1869細胞系相關產(chǎn)品:Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞 Neuro-2a epithelioid cells小鼠腦神經(jīng)瘤細胞系 CEM/0細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞 Japanese Tissue Culture-39細胞系相關產(chǎn)品:HCT-8細胞、H3255細胞、CATH.a細胞 H7721細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 18細胞、McArdle RH-7777細胞、526細胞 Ramos-2G6-4C10細胞系相關產(chǎn)品:BT 549細胞、CD 18細胞、PC-3M 2B4細胞 "
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