"Neuro-2a Cell:小鼠腦神經(jīng)瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
NCI-SNU-C2A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU 86.86細胞、TE4細胞、TE4細胞
K-1735細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細胞、Calu 6細胞、HSAS3細胞
FTC133細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1395細胞、HSAS1細胞、HCA 7細胞
CAMA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Microglia Clone 3細胞、PC3M-IE8細胞、WERI細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Neuro-2a Cell:小鼠腦神經(jīng)瘤細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非常肯定地說，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；２-３天換液１次
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
hTERT RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞
NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
HFL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
EA. hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞
Hs 683.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC1細胞、RPTC細胞、HS5細胞
細胞生長特性：貼壁生長
Neuro-2a Cell:小鼠腦神經(jīng)瘤細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
LS 174 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞
H-378細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞
FCCH1018細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VP 229細胞、210RCY3-Ag1.2.3細胞、EFM-192C細胞
Hs695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Basophilic Leukemia-1細胞、COLO320/DM細胞、SUPM2細胞
HRA19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
Fox/NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR751細胞、HCS-2/8細胞、SNB-19細胞
U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
Neuro-2a Cell:小鼠腦神經(jīng)瘤細胞系
NCI-H1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-407細胞、Case 3細胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細胞
Alexander cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 c18細胞、M2-10B4細胞、CAL 85-1細胞
NCI-H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 212細胞、SUD4細胞、CAL 12T細胞
NCI-UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞
L5178Y-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mIMCD3細胞、RT-BM細胞、HK2細胞
EC9706細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EA hy 926細胞、COR-L 105細胞、McA-RH 8994細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
HCC0095細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ha Fe細胞、L-1210細胞、VMRCLCD細胞
HSC-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
HSC-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H69細胞、Co 205細胞、HKC細胞
Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞
293 F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞
Hs870T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
SK LU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞
HDSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPsm細胞、MHH-CALL-2細胞、Kit 225-K6細胞
HT144-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞
NCI-H-69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-8細胞、HCT116細胞、Fao細胞
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞
SKO-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞
OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞
HCC2157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-32細胞、Panc10.05細胞、OV433細胞
Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H211細胞、CLL-CII細胞、bEnd.3[BEND3]細胞
SUDHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LP-1細胞、SK-N-BE-2細胞、8226細胞
RCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549細胞、KPL1細胞、COLO 320 HSR細胞
SW1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
PCI-4.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22-R1細胞、D-283細胞、DMS114細胞
CCFSTTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL105細胞、HSAEC1-KT細胞、HCC2279細胞
KPNRTBM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D clone3細胞、H 9細胞、CP-70細胞
TMD8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH/DF-1細胞、H-1915細胞、SNU387細胞
A-673細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2085細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、KG-1a細胞
P3HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞
H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
GM00637B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neukoplast細胞、L-M(TK-)細胞、alphaTC1 Clone 6細胞
NCI H716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly10細胞、NW-38細胞、SW 1990細胞
HEL-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞
MDA-MB-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞
MCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
GM07404A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU407細胞、HTori-3細胞、CTLL(2)細胞
CALU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞
NCIH1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L5178-R細胞、WRL68細胞、HCC-827細胞
TE32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH-3T3細胞、LC1-Sq細胞、MDA-MB-415細胞
MGSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 115細胞、Hs675細胞、16HBE14o-細胞
Neuro-2a Cell:小鼠腦神經(jīng)瘤細胞系
G 401細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9細胞、HO8910細胞、HEB細胞
ATDC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST-6細胞、OVCAR-3細胞、MBMEC細胞
THEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE2細胞、NTC200細胞、L-5178-Y-R細胞
Pro-5 Lec1.3c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH28細胞、VM Cub 1細胞、HS-294T細胞
HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞
DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞
NOZAWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞
PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞
SNU886細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh 7.5細胞、SNU-719細胞、Hu-P-T3細胞
Human Embryonic Skin細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞
U14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞
QBI-HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EU-2細胞、P3J.HR1K細胞、RMC細胞
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