"MS1 epithelioid cells小鼠胰島內皮細胞系 細胞背景資料:MS1是1994年建株的胰島內皮細胞株。原代培養(yǎng)的胰島內皮細胞用抗G418的溫度敏感型SV40大T抗原(tsA-58-3)轉染??剐钥寺∮每寺…h(huán)分離,并篩選吸收dil-Ac-LDL的。這株細胞保留了內皮細胞的許多特性,如吸收乙?;疞DL和表達八因子相關抗原及BEGF受體。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 GTL16細胞系相關產品:NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞 SK-N-BE(2)C細胞系相關產品:MDA-MB157細胞、NCI-H64細胞、J-111細胞 A101D細胞系相關產品:SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞 細胞生長:貼壁 MS1 epithelioid cells小鼠胰島內皮細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。 A498細胞系相關產品:H-196細胞、C2-C12細胞、OSC19細胞 HCC941122細胞系相關產品:NCI-H1963細胞、Blotchy fibroblast-11細胞、H-1793細胞 SUIT2細胞系相關產品:rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞 CL1-0細胞系相關產品:MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞 LMTK-細胞系相關產品:ECV細胞、MUM2B細胞、MOLM-13細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 MS1 epithelioid cells小鼠胰島內皮細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當地溫度,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 NOZAWA細胞系相關產品:ME180細胞、NCI-SNU-878細胞、HepaRG細胞 L-cells細胞系相關產品:UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞 MRC-5細胞系相關產品:Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞 LNCaP FGC細胞系相關產品:H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞 Scott and White No. 13細胞系相關產品:NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞 SKLU1細胞系相關產品:BTI-Tn-5B1-4細胞、H2085細胞、CNE2細胞 TCCSUP細胞系相關產品:DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞 RBMVEC細胞系相關產品:DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞 Ly7細胞系相關產品:CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞 PL45細胞系相關產品:4T1細胞、NHDF細胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細胞 MS1 epithelioid cells小鼠胰島內皮細胞系 KTA7細胞系相關產品:NuTu-19細胞、M07e細胞、QGY7701細胞 SK-MEL28細胞系相關產品:Hs 606.T細胞、Hs863T細胞、FRTL-5 Cl 2細胞 CZ-1細胞系相關產品:ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞 GM05384細胞系相關產品:RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞 MES-23.5細胞系相關產品:P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞 MDA-MB-231 #4175細胞系相關產品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞 MDA-MB-231 #4175細胞系相關產品:REC 1細胞、EBNA293細胞、ROS17/28細胞 SUPB-15細胞系相關產品:CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞 PC2細胞系相關產品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞 SkChA1細胞系相關產品:REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞 T-ALL-1細胞系相關產品:NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞 H460細胞系相關產品:Karpas 299細胞、87MG細胞、MA 104細胞 IAR20細胞系相關產品:SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞 Jurkat-77細胞系相關產品:Human fetal lung fibroblast 1細胞、CP-70細胞、686LN-M4e細胞 Jiyoye(P-2003)細胞系相關產品:Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞 TI-73細胞系相關產品:Hep 3B2.1-7細胞、KS-SLK細胞、P3J.HR1K細胞 Panc 2.03細胞系相關產品:CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞 NHRF細胞系相關產品:D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞 TE 32細胞系相關產品:Pro-5 Lec1.3c細胞、T-ALL 1細胞、NCI-H23細胞 NCIH146細胞系相關產品:NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞 NPA-87細胞系相關產品:RC92A細胞、H-4細胞、SUPT-1細胞 H660細胞系相關產品:TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞 NCIH3255細胞系相關產品:EAhy 926細胞、A-375細胞、VK2 (E6/E7)細胞 Detroit-562細胞系相關產品:T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞 Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞系相關產品:B10BR細胞、C-33A細胞、HuH 6細胞 Kit225細胞系相關產品:SK-N-BE(2)-M17細胞、CAL-27細胞、NCIH2107細胞 Line 207細胞系相關產品:HCC1806細胞、BC-022細胞、U251-MG細胞 LIM1215細胞系相關產品:HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞 Pa14C細胞系相關產品:DLD 1細胞、HL7702細胞、RPMI no. 8226細胞 SK-MEL24細胞系相關產品:IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞 IGROV-1細胞系相關產品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞系相關產品:HIBEpiC細胞、HRA19細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞 H322細胞系相關產品:P3-x63-Ag8 653細胞、Jiyoye細胞、293F細胞 Molm 14細胞系相關產品:M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞 SW837細胞系相關產品:MRC 5細胞、293AD細胞、EBC-1細胞 MALME.3M細胞系相關產品:P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞 MM1S細胞系相關產品:L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞 HCCC-9810細胞系相關產品:ES2細胞、CAL-148細胞、MDA-MB-231細胞 WEHI 3B細胞系相關產品:Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞 BRL細胞系相關產品:HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞 Swiss-3T3細胞系相關產品:H-1688細胞、Capan2細胞、HCC1395細胞 NCIH1876細胞系相關產品:OP-9細胞、HO1-N1細胞、NCI H2106細胞 CEM-C1細胞系相關產品:Reuber H35細胞、AG06814-J細胞、Hs 729細胞 H-1666細胞系相關產品:OCI-AML-2細胞、BE(2)M-17細胞、HCC1428細胞 HM細胞系相關產品:HCC1143細胞、P388D1細胞、SK-Mel 1細胞 GM-346細胞系相關產品:OVHM細胞、KM H-2細胞、NBLS細胞 Onda 11細胞系相關產品:SK-N-BE(2)C細胞、GM02219D細胞、COLO206細胞 OVCAR-432細胞系相關產品:SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞 H4-II-E-C3細胞系相關產品:Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞 LS411細胞系相關產品:H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞 A2780細胞系相關產品:RMG1細胞、Sf21細胞、CCD 841 CoTr細胞 MS1 epithelioid cells小鼠胰島內皮細胞系 C57 Mouse Tumor 64細胞系相關產品:BALB/3T3細胞、MDAPCa2b細胞、RT-4細胞 H-889細胞系相關產品:NCI-H1930細胞、L 363細胞、AU 565細胞 H-446細胞系相關產品:U251-MG細胞、Hs940T細胞、A101D細胞 MRC-5細胞系相關產品:Huh7.5細胞、NB.4細胞、EVSAT細胞 "
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