"HGC-27 epithelioid cells人胃癌細胞系 細胞背景資料:未分化胃癌,能分泌粘液素。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 BC-020細胞系相關產(chǎn)品:C-8161細胞、Vero E6細胞、B-16細胞 HSC/mHSC細胞系相關產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞 PA-TU S細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞 細胞生長:貼壁 HGC-27 epithelioid cells人胃癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:消化3-5分鐘,1:2,3天內(nèi)可長滿 H187細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H748細胞、TE-7細胞、H2342細胞 OVTOKO細胞系相關產(chǎn)品:RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞 NBL-5細胞系相關產(chǎn)品:RPMI no. 8226細胞、PL-12細胞、32D clone 3細胞 NSC-34細胞系相關產(chǎn)品:CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞 NCI-BL6細胞系相關產(chǎn)品:HEC251細胞、TE15細胞、BJ1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HGC-27 epithelioid cells人胃癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! Y3Ag1.2.3細胞系相關產(chǎn)品:SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞 NCI-522細胞系相關產(chǎn)品:SR細胞、He La細胞、TE14細胞 H-841細胞系相關產(chǎn)品:SUM 102PT細胞、MES-SA細胞、CEM/0細胞 K1細胞系相關產(chǎn)品:McCoy B細胞、PLA-802細胞、PNEC30細胞 H-2030細胞系相關產(chǎn)品:OCIAML4細胞、HCC827細胞、H-128細胞 DLD1細胞系相關產(chǎn)品:AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞 TOV112細胞系相關產(chǎn)品:SKHEP-1細胞、DU145細胞、Hs683細胞 HGSMC細胞系相關產(chǎn)品:TE12細胞、RC92A細胞、NCI H82細胞 JTC-28細胞系相關產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細胞、HSC2細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞 RL細胞系相關產(chǎn)品:SCC90細胞、NCIH596細胞、C22細胞 HGC-27 epithelioid cells人胃癌細胞系 BERH-2細胞系相關產(chǎn)品:MM1-S細胞、HL-7702細胞、Roswell Park Memorial Institute 2650細胞 NCIH1355細胞系相關產(chǎn)品:HMSC細胞、D341細胞、T. T細胞 HNE-2細胞系相關產(chǎn)品:KOPN-8細胞、CL1.0細胞、Hepa 1-6細胞 HepG2細胞系相關產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-148細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、JKT1細胞 NCIH740細胞系相關產(chǎn)品:95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞 MALME.3M細胞系相關產(chǎn)品:P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞 MALME.3M細胞系相關產(chǎn)品:P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞 H-1435細胞系相關產(chǎn)品:YD15細胞、H-2135細胞、OCI/AML2細胞 MIA Paca2細胞系相關產(chǎn)品:HUT-28細胞、rRTEC細胞、BL2141細胞 ATC241細胞系相關產(chǎn)品:HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞 Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關產(chǎn)品:NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞 B16/F1細胞系相關產(chǎn)品:H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞 CHL細胞系相關產(chǎn)品:Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞 P3 88 D1細胞系相關產(chǎn)品:UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞 OCI Ly3細胞系相關產(chǎn)品:Tokyo Medical and Dental university 8細胞、MDAMB436細胞、CESS細胞 Colo-201細胞系相關產(chǎn)品:NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞 HUASMC細胞系相關產(chǎn)品:HC11細胞、SKLU01細胞、hTERT-HME1細胞 CII細胞系相關產(chǎn)品:MLFC細胞、bEnd3細胞、HEL92.1.7細胞 HEK-293-EBNA細胞系相關產(chǎn)品:32Dcl3細胞、Bac 1.2F5細胞、BALB/3T3 clone A31細胞 MDA468細胞系相關產(chǎn)品:QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞 RBL-2H3細胞系相關產(chǎn)品:EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞 OVCAR.3細胞系相關產(chǎn)品:Vero C1008細胞、SKNEP1細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞 NCI-H929細胞系相關產(chǎn)品:S3-HeLa細胞、Glioma 261細胞、NCI-H865細胞 HCT.116細胞系相關產(chǎn)品:SO-Rb 50細胞、P3-X63-Ag8-653細胞、SHSY-5Y細胞 HUT-28細胞系相關產(chǎn)品:P-815細胞、Hut292細胞、NMCG1細胞 SV40 MES 13細胞系相關產(chǎn)品:DITNC1細胞、OCI-Ly 10細胞、HCC-95細胞 PL-45細胞系相關產(chǎn)品:KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞 MMQ細胞系相關產(chǎn)品:Potorous tridactylus Kidney 2細胞、PANC0504細胞、EBTr (NBL-4)細胞 Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞 LICR-HN-6細胞系相關產(chǎn)品:MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞 FL62891細胞系相關產(chǎn)品:PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞 GM03320D細胞系相關產(chǎn)品:TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞 Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關產(chǎn)品:Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞 HSC-T6細胞系相關產(chǎn)品:Hs742T細胞、MM6細胞、HOC-1細胞 Alexander細胞系相關產(chǎn)品:IPLB-SF-21-AE細胞、95D細胞、Sp2/0-Ag-14細胞 RBE4細胞系相關產(chǎn)品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞 ECC-12細胞系相關產(chǎn)品:RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞 RPMI 8226/S細胞系相關產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞 RPMI 8226/S細胞系相關產(chǎn)品:AC16 [Human hybrid]細胞、NCIH1650細胞、PANC-1細胞 SKMEL28細胞系相關產(chǎn)品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞 H2052細胞系相關產(chǎn)品:K-562細胞、P560細胞、L cells (TK-)細胞 SCL2細胞系相關產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞、4175細胞、TFK-1細胞 TK-10細胞系相關產(chǎn)品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞 NCI-H1385細胞系相關產(chǎn)品:TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞 SKM1細胞系相關產(chǎn)品:QBC-939細胞、KBM-5細胞、NCIH647細胞 Pt-K1細胞系相關產(chǎn)品:HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞 Neuro-2a細胞系相關產(chǎn)品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞 3T3-Swiss albino細胞系相關產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞 UM-UC-14細胞系相關產(chǎn)品:CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞 SK-N-BE(2)-C細胞系相關產(chǎn)品:HOS (TE85)細胞、HCC 2185細胞、PL9細胞 TF1細胞系相關產(chǎn)品:NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞 HGC-27 epithelioid cells人胃癌細胞系 Japanese Tissue Culture-39細胞系相關產(chǎn)品:HCT-8細胞、Human Embryo Lung-1細胞、LLC-PK(1)細胞 ACT-1細胞系相關產(chǎn)品:LC-2-Ad細胞、H-2107細胞、WC00079細胞 Walker-Ca.256細胞系相關產(chǎn)品:Tu 177細胞、CP70細胞、Evsa-T細胞 H841細胞系相關產(chǎn)品:B16 F1細胞、H-2030細胞、Hs839T細胞 "
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