"BeWo epithelioid cells人胎盤絨膜癌細胞系 細胞背景資料:取自人絨癌腦轉(zhuǎn)移組織,在倉鼠頰囊移植傳代8年。利用移植瘤組織進行體外培養(yǎng),建立細胞系。利用不同傳代方法建立了不同亞系,JEG-3是其衍生克隆。該細胞可以產(chǎn)生雌激素、孕激素、雌酮、雌二醇、雌三醇、hCG、胎盤催乳素、角蛋白。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 Meat Animal Research Center-145細胞系相關產(chǎn)品:Hu-P-T3細胞、CWR22R細胞、CCD-841-CoN細胞 STTG1細胞系相關產(chǎn)品:QGY 7701細胞、LNCaP-Clone-FGC細胞、SKRC20細胞 L5178Y細胞系相關產(chǎn)品:Transformed Human Liver Epithelial-3細胞、J774.A1細胞、PL-5細胞 細胞生長:貼壁 BeWo epithelioid cells人胎盤絨膜癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內(nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:1:3傳代,3-4天換液一次 HEC-151細胞系相關產(chǎn)品:HepG2-luc細胞、H358細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞 H292細胞系相關產(chǎn)品:SNU620細胞、BALB/3T3 clone A31細胞、NCI-H157細胞 NBL_S細胞系相關產(chǎn)品:KCL22細胞、HEK.EBNA細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞 H1869細胞系相關產(chǎn)品:PA12細胞、SW900細胞、H283細胞 Tn-5B1-4細胞系相關產(chǎn)品:OSC-19細胞、MNNG-HOS細胞、HL-60 Clone 15細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 BeWo epithelioid cells人胎盤絨膜癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 RH35細胞系相關產(chǎn)品:Hs606T細胞、SK-N-BE(2)C細胞、HCE-T細胞 MC9細胞系相關產(chǎn)品:CCD1112Sk細胞、KYSE-180細胞、0V-1063細胞 SKNEP細胞系相關產(chǎn)品:U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞 RPMI.8226細胞系相關產(chǎn)品:NCIH250細胞、KYSE 50細胞、KMB 17細胞 SN12PM6細胞系相關產(chǎn)品:COLO679細胞、HeLa細胞、KYSE180細胞 NCI-H676細胞系相關產(chǎn)品:SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞 HCC-1359細胞系相關產(chǎn)品:SUM-159PT細胞、NIH:OVCAR-4細胞、Karpas-299細胞 UT-7細胞系相關產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞 PC3細胞系相關產(chǎn)品:MDCK-2細胞、NCI-H1770細胞、NUGC3細胞 SBC5細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細胞、KLE細胞、RD細胞 BeWo epithelioid cells人胎盤絨膜癌細胞系 Hx-147細胞系相關產(chǎn)品:PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞 HO8910細胞系相關產(chǎn)品:HEC-1B細胞、HBZY 1細胞、H-2330細胞 D341細胞系相關產(chǎn)品:hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞 SN4741細胞系相關產(chǎn)品:Tb1.Lu細胞、Tn-5細胞、Fetal Human Lens-124細胞 HL60細胞系相關產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞 EOC 20細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞 EOC 20細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞 PF-382細胞系相關產(chǎn)品:HuT-102細胞、Hs888 Lu細胞、SNU-398細胞 PG13細胞系相關產(chǎn)品:MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞 QGY7703細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat77細胞、PK-15細胞、SuDHL 5細胞 TE-13細胞系相關產(chǎn)品:Jurkat clone A3細胞、HOS (TE85)細胞、NRK細胞 CCC-HEL-1細胞系相關產(chǎn)品:SF763細胞、MDA.MB.231細胞、WM-266-mel細胞 D10G41細胞系相關產(chǎn)品:SUM-102細胞、AR4IP細胞、bEnd3細胞 HCT_116細胞系相關產(chǎn)品:RT4-D6P2T細胞、Hs-675-T細胞、WB F344細胞 MHH-CALL-2細胞系相關產(chǎn)品:HIEC細胞、KYSE 270細胞、OCI/AML-3細胞 MEG-01細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞 GM05384細胞系相關產(chǎn)品:RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞 NCI-H865細胞系相關產(chǎn)品:SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞 IMCD3細胞系相關產(chǎn)品:P560細胞、MKN-1細胞、NCI-H2052細胞 TCMK-1細胞系相關產(chǎn)品:L-02細胞、LM1細胞、NCIH28細胞 H2227細胞系相關產(chǎn)品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞 YD15細胞系相關產(chǎn)品:Hs940T細胞、Emory University-2細胞、SKNO-1細胞 HCC78細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞 CHL細胞系相關產(chǎn)品:Panc-03.27細胞、MALME.3M細胞、SUDHL-8細胞 LS-411N細胞系相關產(chǎn)品:N-87細胞、H1648細胞、MESSA細胞 RS1細胞系相關產(chǎn)品:HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞 L- cell細胞系相關產(chǎn)品:UMR 106細胞、32D CL3細胞、SK MEL-28細胞 SUM 190PT細胞系相關產(chǎn)品:LS174T細胞、HeLaS3細胞、NE-1細胞 HFLS細胞系相關產(chǎn)品:MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞 HEK 293 EBNA細胞系相關產(chǎn)品:Rca-B細胞、Hs 683.T細胞、CHL-CL-11細胞 MOLP-2細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H157細胞、H-510A細胞、HCC-2935細胞 HCC9724細胞系相關產(chǎn)品:BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞 HMEC1細胞系相關產(chǎn)品:LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞 CAL 62細胞系相關產(chǎn)品:NTC200細胞、TB1 Lu細胞、SP2-0-Ag14細胞 RPVSMC細胞系相關產(chǎn)品:SUM-149細胞、NCI-H1651細胞、NCIH1975細胞 CCLP1細胞系相關產(chǎn)品:HS0578T細胞、P3X63-Ag8.653細胞、F442-A細胞 Colon26細胞系相關產(chǎn)品:ABE8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞 KU 19-19細胞系相關產(chǎn)品:Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞 KU 19-19細胞系相關產(chǎn)品:Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞 WiDr-TC細胞系相關產(chǎn)品:Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞 J774A1細胞系相關產(chǎn)品:H676細胞、OVCAR 432細胞、CaEs17細胞 GP5d細胞系相關產(chǎn)品:SKES-1細胞、OCI-AML2細胞、Vero細胞 HepG2-luc細胞系相關產(chǎn)品:SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞 SUP-B1細胞系相關產(chǎn)品:RPMI 7951細胞、Hep-G2細胞、SKLMS1細胞 LICR-LON-HN6-R細胞系相關產(chǎn)品:751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞 SDBMSC細胞系相關產(chǎn)品:hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞 SO-Rb 50細胞系相關產(chǎn)品:293/EBNA細胞、H-1385細胞、RASMC細胞 TF-1細胞系相關產(chǎn)品:Chang liver細胞、Alexander cells細胞、hTERT RPE1細胞 Hs_578t細胞系相關產(chǎn)品:NOZC-1細胞、MILE SVEN 1細胞、NCIH1876細胞 Hs742T細胞系相關產(chǎn)品:Colo741細胞、CEM-C7細胞、SUM190PT細胞 CMT-167細胞系相關產(chǎn)品:SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞 BeWo epithelioid cells人胎盤絨膜癌細胞系 D341細胞系相關產(chǎn)品:hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞 UMC11細胞系相關產(chǎn)品:U-373-MG細胞、Mono Mac 1細胞、A498細胞 3T6細胞系相關產(chǎn)品:L cells細胞、P560細胞、MonoMac1細胞 SKNEP細胞系相關產(chǎn)品:U-138MG細胞、COLO-205細胞、MonoMac6細胞 "
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