"GP2-293 epithelioid cells人胚腎上皮包裝細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng)：細(xì)胞凍存好了，接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢？沒(méi)錯(cuò)，就是記得到時(shí)間了，拿出來(lái)復(fù)蘇。那么，細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢？細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞：補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開(kāi)始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至７０%單層時(shí)收獲細(xì)胞，計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞，有不同類(lèi)型的凍存液，根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)，應(yīng)在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)２４小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類(lèi)型，日期，凍存人等信息，并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個(gè)最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞，以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題！細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點(diǎn)：當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí)，有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要；其實(shí)，細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)，不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié)，不然，也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō)，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護(hù)目鏡；盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
NB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHC-ST1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
K-1735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：786.O細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
GP2-293 epithelioid cells人胚腎上皮包裝細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞的凍存：為避免污染造成的損失，最小化連續(xù)細(xì)胞系的遺傳改變和避免有限細(xì)胞系的老化和轉(zhuǎn)化，需要凍存哺乳細(xì)胞。凍存細(xì)胞前，細(xì)胞應(yīng)該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來(lái)凍存細(xì)胞。對(duì)于包含有血清的培養(yǎng)基，成分可能如下：包含１０%甘油的完全培養(yǎng)基；包含１０%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基；５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%甘油的新鮮培養(yǎng)基或５０%細(xì)胞條件培養(yǎng)基和５０%含有１０%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對(duì)于無(wú)血清培養(yǎng)基，一些普通的培養(yǎng)基成分可能是：５０%細(xì)胞條件無(wú)血清培養(yǎng)基和５０%包含有７.５%二甲基亞砜的新鮮的無(wú)血清培養(yǎng)基或包含有７.５%二甲基亞砜和１０%細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)BSA的新鮮無(wú)血清培養(yǎng)基。懸浮細(xì)胞凍存：計(jì)數(shù)將要凍存的活細(xì)胞。細(xì)胞應(yīng)該處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。以大約２００～４００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞，使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以１×１０(７)到５×１０(７)細(xì)胞/ml密度，在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細(xì)胞，或者以０.５×１０(７)到１×１０(７)在無(wú)血清培養(yǎng)基中，再次懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細(xì)胞凍存：使用分離試劑從基層分離細(xì)胞，分離時(shí)盡可能溫和，使對(duì)細(xì)胞的損傷減少到最小。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中，再次懸浮分離細(xì)胞，確定有活力細(xì)胞數(shù)。以大約２００g離心５分鐘沉淀細(xì)胞。使用移液管移去上清到最小體積，不要攪亂細(xì)胞。以５×１０(６)到１×１０(６)細(xì)胞/ml密度，在凍存液中懸浮細(xì)胞。分裝進(jìn)凍存管，將凍存管置于濕的冰上或放入４℃冰箱中，５分鐘內(nèi)開(kāi)始冷凍步驟。細(xì)胞以１℃/分鐘進(jìn)行冷凍，可以通過(guò)可編程序的冷凍器進(jìn)行或者把隔離盒中的凍存管放到-７０℃到-９０℃的冰箱中，然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
LA-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-62細(xì)胞、B16F10細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞
OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞
NCI-H2228細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEM細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞
Hs832T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA I細(xì)胞、SCL I細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞
L-M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0細(xì)胞、SKGT2細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
GP2-293 epithelioid cells人胚腎上皮包裝細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮樣
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過(guò)２０%，因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足，過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換；３)購(gòu)買(mǎi)的復(fù)蘇細(xì)胞，為何會(huì)有脫落？因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩，收到后可以離心收集；４)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購(gòu)買(mǎi)的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng)，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí)，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
686LN-M4e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-2細(xì)胞、Dx5細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞
H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB1細(xì)胞、RERF-LC-MS細(xì)胞、NU-GC-2細(xì)胞
HepG2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞、LS411細(xì)胞
NRK clone 52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBL細(xì)胞、ARO81細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞
HMEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-sm 1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞
NCI-HUT-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J HR-1細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞、MF2059細(xì)胞
H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC109細(xì)胞、NCI H82細(xì)胞、PLC PRF 5細(xì)胞
DoHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞
HOS TE 85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293AD細(xì)胞、LI7細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞
G 292 Clone A 141B1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-HEECs細(xì)胞、COV504細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞
GP2-293 epithelioid cells人胚腎上皮包裝細(xì)胞系
BNCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞、U-251_MG細(xì)胞
RL95-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Clone 166細(xì)胞、GM03570細(xì)胞、Molm 13細(xì)胞
UCLA SO M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-220細(xì)胞、CEF細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞
LAPC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EVSAT細(xì)胞、SNU886細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞
NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞
PC 61.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞
PC 61.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞
SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞
MRMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOEC細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞、CORL88細(xì)胞
OCI-Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m 14B細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞
C-Lu65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-2細(xì)胞、RCC10細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞
LAN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H82sclc細(xì)胞、207細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞
Tu686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-RO 81細(xì)胞、SUM102細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞
RM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH208細(xì)胞、RAMSCs細(xì)胞、CFPAC-1細(xì)胞
H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細(xì)胞、UO-31細(xì)胞、H-9細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
LuCL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD 18細(xì)胞、BC-025細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞
OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞
SK-MEL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV173細(xì)胞、ACC-M細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞
Ha Fe細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1008細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞
Mia PACA 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞
LNCaP-ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA 144細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞
A101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-C2B細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞
3T3NIH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞
TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-4細(xì)胞、102PT細(xì)胞、GalK 1細(xì)胞
FOX-NY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-875細(xì)胞、C8161細(xì)胞、MLO-Y4細(xì)胞
NRK clone 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H322T細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞、OE21細(xì)胞
BALB/3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞、T9細(xì)胞
KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞
H-2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S-16細(xì)胞、hOMF細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞
HBZY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VeroE6細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞
MGC803細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞、CEM細(xì)胞
Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA 205細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞、Capan-1細(xì)胞
SK Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞、GH3細(xì)胞
3T3NIH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LX-2細(xì)胞、HCC1395細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞
BLO 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞、MKN28細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
CA46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-69細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞、Kasumi-6細(xì)胞
Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH441細(xì)胞、T24(ECV304)細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞
NCIH2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-422細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、OCILY7細(xì)胞
LLC-PK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細(xì)胞、INS-1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞
KOSC-2 cl3-43細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu6細(xì)胞、MDCC-MSB1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞
RCCJF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-1細(xì)胞、UMUC1細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞
UWB1.289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：118MG細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞
SJRH 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞
MDAMB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH647細(xì)胞、PTK1細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞
CCD 1112SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-432細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞、H-1650細(xì)胞
G-402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FU-MMT-1細(xì)胞、NCI-H2141細(xì)胞、MGH-U1 (EJ)細(xì)胞
Ramos (RA 1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細(xì)胞、K7M2 wt細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞
MKN-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY-5Y細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞
GP2-293 epithelioid cells人胚腎上皮包裝細(xì)胞系
H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-449細(xì)胞、COLO679細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞
H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細(xì)胞、CAL-62細(xì)胞、HLE B-3細(xì)胞
Hs 934.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4-11細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞、NCIH2052細(xì)胞
Hep-G2/C3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1-6細(xì)胞、SNU-16細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞
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