"HO-8910 epithelioid cells人卵巢癌細胞系 細胞背景資料:HO-8910細胞株是1994年從一位51歲的中國卵巢癌患者腹水中建立的。 轉移到裸鼠中形成的腫瘤集聚與患者原病灶處的形態(tài)一致。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 HC-11細胞系相關產品:Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞 SW-403細胞系相關產品:TF-1a細胞、HSC5細胞、Lewis-Lung細胞 SW 620細胞系相關產品:H-650細胞、SKMEL2細胞、Hs695細胞 細胞生長:貼壁 HO-8910 epithelioid cells人卵巢癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代的一般方法:開始細胞傳代前,仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細胞(單層細胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細胞吹打管(20ml)(以上用具需經121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細胞,挑選生長狀態(tài)良好,細胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內,加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細胞;先用PBS洗液沖洗細胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細胞瓶內加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細胞培養(yǎng)液重復吹打一次后分裝,然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。 H-2342細胞系相關產品:HCT116/L細胞、LoVo細胞、H1563細胞 DLD1細胞系相關產品:AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞 DHL-4細胞系相關產品:NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞 SW982細胞系相關產品:MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關產品:NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 HO-8910 epithelioid cells人卵巢癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數,傳相應數目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 BrCL12細胞系相關產品:LM2-4175細胞、HM06.A1細胞、EOL1細胞 MDA-MB-175-VII細胞系相關產品:SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞 EU-4細胞系相關產品:FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞 SCC7細胞系相關產品:Douglas Foster-1細胞、ASH3細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞 MAVER1細胞系相關產品:SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞 Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關產品:TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞 CEMO-1細胞系相關產品:HCC-1395細胞、MADB 106細胞、NUGC-3細胞 PLA-802細胞系相關產品:BC-025細胞、H1930細胞、SK-ChA1細胞 LCLC-103H細胞系相關產品:Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞 T-ALL1細胞系相關產品:RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞 HO-8910 epithelioid cells人卵巢癌細胞系 OE33細胞系相關產品:HPMC細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、SK Hep1細胞 H-735細胞系相關產品:P30/Ohkubo細胞、LS 1034細胞、IPAM-WT細胞 CHO cell clone K1細胞系相關產品:HCC-95細胞、SKNSH細胞、HCC9724細胞 Saos2細胞系相關產品:BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞 HT 1376細胞系相關產品:PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞 MC-116細胞系相關產品:SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞 MC-116細胞系相關產品:SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞 OSKM-1細胞系相關產品:CMEC/D3細胞、Hs 839.T細胞、CCD-841-CoTr細胞 NCI-H510細胞系相關產品:NCI-H1755細胞、BE(2)M17細胞、BI-Mel細胞 HOS TE85細胞系相關產品:Clone M-3細胞、MDA-1386細胞、Pro-Lec1.3C細胞 MV4:11細胞系相關產品:P30OHK細胞、K1細胞、BXPC3細胞 QG56細胞系相關產品:EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞 HAPI細胞系相關產品:ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞 NCIH2052細胞系相關產品:G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞 HEp-2細胞系相關產品:Jurkat-E6細胞、HCC38細胞、beta TC6細胞 L5178YR細胞系相關產品:D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞 RC-4B/C細胞系相關產品:SW-948細胞、BA/F3細胞、SK Mel28細胞 NPC-TW039細胞系相關產品:Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞 SVG(P12)細胞系相關產品:BPH1細胞、NCI-SNU-886細胞、COLO320-DM細胞 P 815細胞系相關產品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞 GES1細胞系相關產品:HEK293FT細胞、Hs832.Tc細胞、MG-HU-3細胞 CX1細胞系相關產品:RH7777細胞、SW 1417細胞、H-716細胞 GA-10(Clone 4)細胞系相關產品:hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞 VMRC-LCD細胞系相關產品:M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞 COLO824細胞系相關產品:U87MG細胞、G422細胞、H146細胞 Ocular Choroidal Melanoma-1細胞系相關產品:XuanWei Lung Cancer-05細胞、A375-SM細胞、CHP 212細胞 H-889細胞系相關產品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞 PK 15細胞系相關產品:MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞 HCC0044細胞系相關產品:C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞 H889細胞系相關產品:MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞 HSAS1細胞系相關產品:hEM15A細胞、NSH細胞、rHSC-99細胞 NCIH2135細胞系相關產品:MES-SA-Dx5細胞、OE-21細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞 SKNO1細胞系相關產品:MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞 LICR-HN6細胞系相關產品:NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞 WM239A細胞系相關產品:PC-3M-IE8細胞、OVCAR420細胞、TCMK1細胞 Pt K2 (NBL-5)細胞系相關產品:NP69SV40T細胞、Cor L88細胞、NCIH1650細胞 SUSM1細胞系相關產品:SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞 KNS81細胞系相關產品:3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞 KNS81細胞系相關產品:3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞 MDA-MB-468細胞系相關產品:V79-4細胞、H82細胞、Ra No. 1細胞 IBRS-2細胞系相關產品:Lewis Lung Cancer細胞、OV2008細胞、NCIH1092細胞 KTCTL140細胞系相關產品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞 OV90細胞系相關產品:McG-1細胞、Hs 821.T細胞、PANC-03-27細胞 NCI-H1155細胞系相關產品:H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞 Mono-Mac-1細胞系相關產品:ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞 NCI-SNU-398細胞系相關產品:SCC-9細胞、MDA 231-LM2-4175細胞、SNU423細胞 LSECs細胞系相關產品:NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞 RGB細胞系相關產品:RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞 RPMI-7666細胞系相關產品:T HEECs細胞、NTERA-2/D1細胞、Hs281T細胞 P3X63 AG8-653細胞系相關產品:T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞 C2A細胞系相關產品:HaCaT細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、Hs445細胞 HO-8910 epithelioid cells人卵巢癌細胞系 RS(4;11)細胞系相關產品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞 SaOS細胞系相關產品:EA.Hy926細胞、LM3細胞、Ly18細胞 IPLB-Sf21-AE細胞系相關產品:SNU1細胞、KM12細胞、HGC27細胞 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