"HO-8910PM epithelioid cells人卵巢癌細胞系 細胞背景資料:高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 MOPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞 MS 751細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞 RBE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B95-8細胞、MCF-12F細胞、NCIH522細胞 細胞生長:貼壁 HO-8910PM epithelioid cells人卵巢癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰仨氂兴煌瑫r,務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應(yīng)后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務(wù)必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 MPP-89細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞 D324 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL細胞、FHCRC-11細胞、PANC0504細胞 Caco-2BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞 LN382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞 H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 HO-8910PM epithelioid cells人卵巢癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮樣 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞 MIO-M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞 Panc 5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞 Hs940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞 CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞 CAL120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR90細胞、OCILY-19細胞、RK-13細胞 NS20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞 HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞 DoTc2-4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS-751細胞、RPMI no. 8226細胞、SG231細胞 MJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN細胞、NCI-SNU-119細胞、Jurkat-FHCRC細胞 HO-8910PM epithelioid cells人卵巢癌細胞系 MFE-280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞 RWPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細胞、EFM192A細胞、TE3細胞 Det. 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞 Wistar Institute-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK(15)細胞、WM115細胞、PC 61-5-3細胞 MKN 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRPTC細胞、SK-MEL-2-LUC細胞、T2細胞 alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞 alphaTC1 Clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF.CEM細胞、HBE135-E6E7細胞、ZR-75-1細胞 HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞 FHs74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341細胞、KP-N-RT-BM細胞、CAL85-1細胞 BMSC/hBMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞 Detroit-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98細胞、H-35 Reuber細胞、QGP-1細胞 COLO357細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H810細胞、WM-239-A細胞、Anip-973細胞 Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞 PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY5Y細胞、QBI-293A細胞、NCIH1623細胞 FaDu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞 H2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-1細胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、H1618細胞 MLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞 U138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN-6細胞、ST-2細胞、BIU87細胞 LS 123細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS1034細胞、GRSL細胞、YTMLC-90細胞 HNTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞 DHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞 MB468細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K2細胞、BT325細胞、HEK-293A細胞 H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞 KTC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞 Hi-five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞 CMT167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1/1-Ag4.1細胞、LIM-1215細胞、MC/CAR細胞 MDCK Type II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞 Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞 MDA-MB-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞 SW 780細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞 NBL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-039細胞、Farage Original Line細胞、EFM192B細胞 N-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL16細胞、B16-BL6細胞、NCI.H226細胞 GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞 rUCMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK.EBNA細胞、SB細胞、ME16C細胞 Human Foreskin Fibroblast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞 SW 579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞 NRCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fu97細胞、8505C細胞、COLO320HSR細胞 NCIH2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCECs細胞、L23/P細胞、ECC1細胞 H-1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA330細胞、LLC-PK-1細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞 Ishikawa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞 MDA435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞 PC-9/S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86-86細胞、H-498細胞、D407細胞 NTERA-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK1細胞、FD-LSC-1細胞、NCI-H378細胞 LS1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞 PTK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical Research Council cell strain-9細胞、SKRC-42細胞、SHI-1細胞 SW-982細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞 COLO 394細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRPEpiC細胞、NPC-TW-039細胞、MHCC 97-L細胞 SKLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BTI-Tn-5B1-4細胞、H2085細胞、CNE2細胞 RL-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞 Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞 HPAF-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Reh細胞、DMS114細胞、A375-SM細胞 HO-8910PM epithelioid cells人卵巢癌細胞系 C 643細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞 U2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd3細胞、AR4IP細胞、D341 Med細胞 H69C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H522細胞、IOSE-Van細胞、H510細胞 Panc 5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WBF344細胞、Hs-675-T細胞、IM9細胞 "
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