"U266B1 Cell:人外周淋巴細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEG-3細胞、SW 839細胞、MCF-7ADR細胞
Nthy ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞
SW 962細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly07細胞、MMAc.SF細胞、SNU-119細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
U266B1 Cell:人外周淋巴細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3傳代,2-3天傳一代
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
GM04679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
HEK293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63Ag8.653細胞、SKG3A細胞、B4G12細胞
細胞生長特性:懸浮生長
U266B1 Cell:人外周淋巴細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞樣
SU-DHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTA7細胞、KOSC-2 cl3-43細胞、Rainbow Trout Embryo細胞
HCC-1187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High 5細胞、Wistar Institute-38細胞、OCI-Ly8細胞
Hs 840.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUIT-2細胞、HCC-2279細胞、Human Liver-7702細胞
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
SUPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887A細胞、JAR細胞、Tu177細胞
Hs 940.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CoC1細胞、TE10細胞、MEF (CF-1)細胞
U266B1 Cell:人外周淋巴細胞系
Hs934T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225-K6細胞、hRPTC細胞、HEK293F細胞
PLB985細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-5WgaRI3C細胞、P30-OHKUBO細胞、Panc-05.04細胞
H2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV504細胞、HEK-AD 293細胞、CCD18Co細胞
NCIH838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞
PANC1005細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2198細胞、N-87細胞、MOLM-16細胞
KM932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-24細胞、Caco-2細胞、HRC-99細胞
C4-2 Bone metastatic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-82細胞、SW-527細胞、NBL-7細胞
IPEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
RBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
RBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRTEC細胞、Hs 729細胞、Ramos(RA1)細胞
GC9811-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
SUIT 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞
Hs895T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、SK-N-AS細胞、MOLP2細胞
VP267細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
RK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
MDA436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR106細胞、HCE-T細胞、Anip 973細胞
GA-10(Clone 4)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERTHME1細胞、UCH1細胞、MKN-45細胞
SW-626細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme-3 M細胞、TALL 1細胞、SK-N-BE(2)細胞
NCIH2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞
H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
WERI Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY細胞、SW1116細胞、U-343 MG細胞
WERI Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY細胞、SW1116細胞、U-343 MG細胞
SUM-190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞
CHP-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
MES 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA38細胞、HLEB-3細胞、SUM 149PT細胞
Human Epidermoid carcinoma #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1569細胞、NBL-4細胞、NS20Y細胞
DoTc2 4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
LS-174細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細胞、NCI-H1703細胞、HCC-2279細胞
HTori:3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-7/Hap8細胞、H4-II-E細胞、SCC7細胞
WEHI-279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞
RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL細胞、LTEP a2細胞、SK-MES細胞
ChaGo-K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
Jurkat clone A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL/2 (LLC1)細胞、RTMC細胞、RIN m5F細胞
UMNSAH-DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC10細胞、BE(2)-M17細胞、CAL-12T細胞
Michigan Cancer Foundation-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細胞、HRCEC細胞、WM-2664細胞
C8-D1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細胞、CCRF CEM細胞、CSQT-2細胞
NCIH660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
SK-N-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP-1細胞、NCI N87細胞、CCRF細胞
OCI/AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞
BEL 7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SVneo細胞、SW403細胞、NT-2細胞
RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞
U266B1 Cell:人外周淋巴細胞系
HOS-143B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞
MC57細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
JB6Cl30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
Panc_03_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞
SU-86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA 7細胞、NCIH820細胞、OVCA8細胞
Panc3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG13細胞、Hs 746.T細胞、SVG p12細胞
OVCAR5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞
MCA205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6細胞、COLO 320DM細胞、293c18細胞
DU_145細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ETCC-007細胞、FT-293細胞、RCC 7860細胞
FC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞
Malme-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞
SJ-Rh 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC PK1細胞、MES13細胞、RC-2細胞
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