"U-CH1 Cell:人脊索瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：骶骨脊索瘤；男性
CMT64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
NTera 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E115細胞、NK62a細胞、NCI-H295細胞
P3 (Jiyoye)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hMSC-BM細胞、CCD-1095Sk細胞、B-95-8細胞
Kit 225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
U-CH1 Cell:人脊索瘤細胞系
細胞的凍存：目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MeT5A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML5細胞、H2066細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞
293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
BCECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC403細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、MDA-MB 468細胞
CHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
HBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
細胞生長特性：貼壁
U-CH1 Cell:人脊索瘤細胞系
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
HUCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO細胞、SUD-4細胞、HT-29/CX-1細胞
SK-MES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NEC細胞、SU-86-86細胞、Simpson細胞
GT1-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LY-R細胞、BCaP 37細胞、2B4細胞
H-1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞
CEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FCCH1024細胞、U266S細胞、H-2342細胞
U-CH1 Cell:人脊索瘤細胞系
JM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG-HU-3細胞、MOLT 4細胞、S3-HeLa細胞
P3X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞
KE-37細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE39細胞、6-T CEM細胞、HM1900細胞
LICR-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞
NTERA2-cloneD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞
Hs832.Tc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞
LWnt3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2195細胞、NCI-H2330細胞、SGC-7901細胞
KLN-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞
PG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 5細胞、786-O細胞、Karpas299細胞
PNT1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPE-1細胞、HCCLM6細胞、HLEC-SRA 01/04細胞
CD 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU1919細胞、Earle's L cells細胞、HR-8348細胞
OCI Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-3255細胞、M-20細胞、HCC70細胞
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
RGCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MES-1細胞、C81-61細胞、3T6 Swiss Albino細胞
Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
NCIN87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1876細胞、NCIH841細胞、NCI-H2405細胞
RPPVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H209細胞、HCT FET細胞、UACC893細胞
M14-MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87 MG細胞、LAN-1細胞、MeT 5A細胞
MKN-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
SKGT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 895 T細胞、SK LU 1細胞、TE 32細胞
KMBC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞
UO.31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-134 VI細胞、GB-1細胞、NBL-1細胞
H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞
PE/CA-PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT-T15細胞、NS20-Y細胞、Hce8693細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
SW626細胞系相關(guān)產(chǎn)品：XWLC-05細胞、VMRC-LCD細胞、HCV29細胞
HuT-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK1細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞、LS-513細胞
HCT 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COV 434細胞、NCIH2170細胞、MSTO211H細胞
NCI H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112D細胞、Earles's cells細胞、PATU-S細胞
NCI-H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2141細胞、HUC-1細胞、Keio University-19-19細胞
BOWES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 24細胞、MDA 435細胞、3T3-A31細胞
MKN-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
MDA-MB-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
L23/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞
HCET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H295R細胞、FM88細胞、EA.hy 926細胞
P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
T24(ECV304)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Porcine Kidney-15細胞、Panc 3.27細胞、DI TNC-1細胞
WM-451Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞、H-1666細胞、LN-18細胞
SCH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP T1細胞、Metastatic Variant 522細胞、DoHH-2細胞
JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞
U-CH1 Cell:人脊索瘤細胞系
SKG3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞
CMT-167細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞
TFK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
870細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
MOLT16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774A1細胞、NCIH292細胞、NeHepLxHT細胞
Hs 343.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細胞、HKC細胞、V79-1細胞
HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
COLO201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 4475細胞、BC-PAP細胞、Karpas422細胞
Simpson細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RERFLCMS細胞、TE-9細胞、UMRC-2細胞
COLO-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1105細胞、COV 434細胞、NMCG-1細胞
Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞
C17.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U 138 MG細胞、NIE-115細胞、UMC11細胞
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