"ST2 Cell:小鼠骨髓基質(zhì)細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:基質(zhì);BALB/c
MLE 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA144細胞、MDA MB 453細胞、GM03569細胞
CFPAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞
SN12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H727細胞、D283-MED細胞、TJ905細胞
COLO680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HSF-1細胞、SNU182細胞、LS411N細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
ST2 Cell:小鼠骨髓基質(zhì)細胞系
細胞凍存基本方法:1.細胞:選對數(shù)生長期細胞,收集細胞24小時前換液一次。2.計數(shù):按常規(guī)方法把細胞制成細胞懸液,計數(shù),令細胞密度達5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細胞懸液。5.封口:用塑料安剖時擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細檢查,定要封嚴,必要時可浸入藍色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復(fù)蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HONE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞
SRA01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
E.G7-OVA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC20細胞、CAKI 1細胞、AD-293細胞
REC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL21細胞、SUD6細胞、C4-2B細胞
HT144-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞
細胞生長特性:貼壁
ST2 Cell:小鼠骨髓基質(zhì)細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
VMRCRCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hFOB細胞、NCI-H2171細胞、CP70細胞
Hs675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞
J 82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK-13細胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞、REC細胞
CCD-841-CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
Sup T-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞
YTMLC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS76細胞、CEM.C1細胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞
ST2 Cell:小鼠骨髓基質(zhì)細胞系
TN5B14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞
H295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T173細胞、CMK細胞、KRCY細胞
IGROV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞
Ha Fe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞
NCI-H1373細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLMVEC細胞、Colon 38細胞、RIN Cl-5F細胞
M-07e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-2細胞、TGW-nu-1細胞、NCI-H2108細胞
HFF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-L細胞、McARH7777細胞、HCC827細胞
MDAMB330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sarcoma OSteogenic-2細胞、OsA-CL細胞、MADISON LUNG TA-109細胞
HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
HBMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP clone FGC細胞、U-266 AR1細胞、LS-174T細胞
BE(2)-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞
OCI-Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
OSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞
OCM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細胞、GM03320D細胞、Mv1.Lu細胞
C2-C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AQ-Mel細胞、WEHI3細胞、KYSE-450細胞
NIH-3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細胞、B4G12細胞、RM1細胞
V79-GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞
BCECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC403細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、MDA-MB 468細胞
Lewis lung carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞
GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞
SR786細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞
H-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC1細胞、NCIH1581細胞、KOSC-2 cl3-43細胞
A101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2B細胞、NCI-A549細胞、B6Tert-1細胞
NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞
C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
IPECJ2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細胞、CAL-12T細胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞
T173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
UACC893細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-841細胞、HEK-293FT細胞、CCRF-CEM/S細胞
CHL-IU細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞
RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
LAN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞
PC-3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GBC-SD細胞、HUT125細胞、Jurkat77細胞
EFM192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞
18G3.cl 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-216細胞、NCI H157細胞、SKGIIIA細胞
UPCISCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、2PK-3細胞、3T3F442A細胞
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
L 428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU475細胞、HCC-1833細胞、QGP1細胞
L cells (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
ST2 Cell:小鼠骨髓基質(zhì)細胞系
HS940細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞
Opossum Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞、NHA細胞
CHL-CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AE1201細胞、H-2228細胞、H125細胞
Chinese Hamster Ovary細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞
HeLa 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
NCI-H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-6細胞、SKO-007細胞、RPE1細胞
CT26.WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞
LK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAEC細胞、COLO 829細胞、A1847細胞
HEK-293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:32Dcl3細胞、Bac 1.2F5細胞、BALB/3T3 clone A31細胞
LIPF178C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1048細胞、SUM149-PT細胞、CAL 33細胞
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