"Melan-a Cell:小鼠黑色素細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：黑色素細(xì)胞；自發(fā)永生；C５７BL/６
PaTu8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs863T細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞
H1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346細(xì)胞、T98細(xì)胞、MT2細(xì)胞
H2052_MM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-368細(xì)胞、GBCSD細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞
3 LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1954細(xì)胞、GM03671細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
Melan-a Cell:小鼠黑色素細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問(wèn)題：可以這樣說(shuō)，對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過(guò)這個(gè)問(wèn)題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開(kāi)始的幾代長(zhǎng)的還挺好的，可是穿過(guò)幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來(lái)越差勁了。對(duì)于這個(gè)問(wèn)題，可以非?？隙ǖ卣f(shuō)，你的消化環(huán)節(jié)出問(wèn)題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長(zhǎng)越差。在消化的過(guò)程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個(gè)問(wèn)題就是，細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的，每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒(méi)有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來(lái)對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來(lái)。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過(guò)的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰(shuí)長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開(kāi)始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對(duì)比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來(lái)的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨(dú)立開(kāi)來(lái)的時(shí)候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實(shí)際情況你自己把握）。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步，對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒(méi)辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒(méi)必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來(lái)做比較，去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開(kāi)展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外，還有一個(gè)更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，原因比較復(fù)雜，常見(jiàn)原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過(guò)程錯(cuò)誤；冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心；懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤；細(xì)胞置于-８０℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái)，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞，其離心速率一般為３００×g(約１O(jiān)OOrpm),５-１０分鐘，轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=１.１１９×１０５×r×(rpm)２，其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離；rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù)；RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力，以重力加速度g(９８０.６６cm/s２)的倍數(shù)來(lái)表示單位。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞
U-138MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-20Y細(xì)胞、PC-9S1細(xì)胞、HFTF細(xì)胞
NCI-H1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1sq細(xì)胞、NH-6細(xì)胞、OVCAR3細(xì)胞
TO 175.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW264.7細(xì)胞、HCC70細(xì)胞、SCL2細(xì)胞
OLN 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co320細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
Melan-a Cell:小鼠黑色素細(xì)胞系
細(xì)胞株(系)的使用，為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的，長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞，不僅消耗大量的人力和物力，而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化，因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性，有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷，種子丟失。因此，在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞，以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍，細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶，從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高，pH值改變，部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性，引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂，溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶，使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞，線粒體腫脹，功能丟失，并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變，使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多，隨冷凍溫度的降低，冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷，而致細(xì)胞死亡。因此，細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)分子量小，溶解度大，易穿透細(xì)胞，可以使冰點(diǎn)下降，提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性，且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì)，從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
CNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞
NCM460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant 522細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞、NCI-H774細(xì)胞
P3 NS1 Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 706.T細(xì)胞、National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、RCC-10細(xì)胞
Psi-2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFT 8810細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞
OV-2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPAM-WT細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞、R1610細(xì)胞
Bac 1.2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：130-T細(xì)胞、K422細(xì)胞、NTERA-2cl.D1細(xì)胞
EU-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-11細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞
Melan-a Cell:小鼠黑色素細(xì)胞系
RPMI6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM-C7細(xì)胞、MPP89細(xì)胞、DH 82細(xì)胞
SU-86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCA 7細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞
OCI-LY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞
TOG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Epidermoid carcinoma #2細(xì)胞、H441細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞
HCT FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞
KM12SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV90細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞、SW 948細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
Hs832T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA I細(xì)胞、SCL I細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞
MDA 1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC2/Ad細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞
MDA 1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC2/Ad細(xì)胞、Huh-7.5.1細(xì)胞、HCC2185細(xì)胞
SKMEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞
Tb 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF.10A細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞、NHRF細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
CHO cell clone K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-95細(xì)胞、SKNSH細(xì)胞、HCC9724細(xì)胞
Hep 3B2_1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC 7721細(xì)胞、QGP 1細(xì)胞、HEH2細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
NCI-H1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 1細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞
CL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7404細(xì)胞、HEL-92細(xì)胞、MiaPaCa-2細(xì)胞
P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2008細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞、SMMC-7721細(xì)胞
MM134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H526細(xì)胞、SKOV-433細(xì)胞、KFB細(xì)胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞、MB 157細(xì)胞
Ishikawa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細(xì)胞、CCD19Lu細(xì)胞、SUM-102PT細(xì)胞
Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞
Co 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs1.Tes細(xì)胞、KNS81細(xì)胞、KYSE 270細(xì)胞
SN12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H727細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞、TJ905細(xì)胞
SUM159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS153細(xì)胞、KMH2細(xì)胞、BJA-B-1細(xì)胞
SW 527細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC-3細(xì)胞、H1435細(xì)胞、A375-S2細(xì)胞
NB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IHC-ST1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞
MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞
Panc8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04680細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞
HRA-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H441細(xì)胞、aTC1-6細(xì)胞、HL 60細(xì)胞
HNTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞、MCM細(xì)胞
343MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fox/NY細(xì)胞、ECC-12細(xì)胞、BCP-1細(xì)胞
T47D:A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-45細(xì)胞、FLC7細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞
130-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G361-mel細(xì)胞、Pt-K2細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞
NTERA-2 clone D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H226細(xì)胞、H-226細(xì)胞、C81-61細(xì)胞
PFSK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞、TK 10細(xì)胞
TSCCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1-289細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞、OCI-LY-8細(xì)胞
H-1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2342細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞
SNK-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞、HL1細(xì)胞
SNK-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Turbot Embryonic Cell line細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞、HL1細(xì)胞
EoL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEG-01細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞、C-Li-7細(xì)胞
PL-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-29細(xì)胞、NCIH508細(xì)胞、NPC-039細(xì)胞
Melan-a Cell:小鼠黑色素細(xì)胞系
HIT-T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細(xì)胞、H747細(xì)胞、SNU886細(xì)胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87 MG細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
OCI/AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ACC3細(xì)胞、Panc 8.13細(xì)胞、B16 F10細(xì)胞
H2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-6(OAN)細(xì)胞、MC/CAR細(xì)胞、IGR-OV1細(xì)胞
MADISON LUNG TA-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK136細(xì)胞、MIA PaCa-2細(xì)胞、C666-1細(xì)胞
Kit225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、CAL-27細(xì)胞、NCIH2107細(xì)胞
MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞、SW 839細(xì)胞
HCC 94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：624mel細(xì)胞、SK-MEL 28細(xì)胞、hTERT RPE-1細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
GP5d細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKES-1細(xì)胞、OCI-AML2細(xì)胞、Vero細(xì)胞
HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細(xì)胞
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關(guān)鍵字： Melan-a Cell:小鼠黑色素細(xì)胞系
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