"HT22 Cell:小鼠海馬神經(jīng)元細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
HRVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
CAL 120細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV-1.K細胞、D562細胞、MRC9細胞
NCI.H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 (S+L-)細胞、GM03573A細胞、NS1-1 Ag4.1細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HT22 Cell:小鼠海馬神經(jīng)元細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
NCI N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞
Mv 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sf-21細胞、C4-1細胞、RL-65細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
細胞生長特性:貼壁生長
HT22 Cell:小鼠海馬神經(jīng)元細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
H1238細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細胞、PC-3M-IE8細胞、A549-Taxol細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
McARH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞
Panc 3.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774細胞、P3JHR-1細胞、HS852.T細胞
GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞
HT22 Cell:小鼠海馬神經(jīng)元細胞系
SK HEP 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
SK-MEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283MED細胞、MDA-MB231細胞、PaTu 8988s細胞
SKHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat 1細胞、Human Liver-7702細胞、KHYG1細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
SKMES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞
COLO 824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
B16 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:As-PC1細胞、End1/E6E7細胞、H889細胞
HSC/mHSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Kidney 293細胞、Danio rerio Gill細胞、hESC細胞
NCI.H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
NCI.H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE450細胞、751細胞、AG06814-J細胞
MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
CWR22-Rv1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、Hs822T細胞、Panc203細胞
Panc-03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細胞、NKT細胞、B16-BL6細胞
Epstein-Barr-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
C8166細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 84細胞、Pa17C細胞、L-929細胞
H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H748細胞、TE-7細胞、H2342細胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S-3細胞、RPMI-8402細胞、G-Olig2細胞
Bac1 2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞
HCT GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞
SKNSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞
RA.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TT細胞、H-1092細胞、COLO 680N細胞
MV4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
NCI-H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6細胞、AM細胞、Panc_08_13細胞
L 363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞
SK-RC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC細胞、H4IIE細胞、HT 1080.T細胞
HCC0038細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-373MG細胞、Hs688(A)T細胞、J-774細胞
T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
NCI-H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細胞、U-CH1細胞、HFL1細胞
MDA-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 (Clone 4)細胞、SK-RC-20細胞、F-36P細胞
NCIADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞
MiaPaCa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC151細胞、CA 46細胞、KM12SM細胞
NIH 3T6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP70細胞、H1373細胞、SKNBE(2c)細胞
G 292 Clone A 141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞
DI TNC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞
U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞
H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞
Mhh-Call 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2-293細胞、RBVEC細胞、J 774A.1細胞
NCIH358細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO-1細胞、Giant Cell Tumor細胞、COS-1細胞
HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC7721細胞、NCI-HUT-460細胞、LSC-1細胞
H-838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP-1細胞、ACC3細胞、IMR 90細胞
NIE 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-F10-BL6細胞、Bac1 2F5細胞、NCIH1395細胞
HT22 Cell:小鼠海馬神經(jīng)元細胞系
HeLa-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
UM-UC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FM88細胞、YT細胞、C3H/10T1/2細胞
HIT T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
H-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞
NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
Hep 3B2.1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134細胞、LAPC4細胞、BT-325細胞
CHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7細胞、HBE 135-E6E7細胞、TYKnu細胞
P3X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞
IM-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細胞、AMJ2-C8細胞、JB6 Cl 30-7b細胞
HCC-1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、Panc 5.04細胞、HOCF細胞
EA hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637B細胞、NCIH1155細胞、Sp 2817細胞
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