"TC-1 [Mouse lung] Cell:小鼠肺上皮細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
SNU-449細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2347細胞、PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、TPC1細胞
T173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
OCI-LY-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細胞、NCI-H2591細胞、HOP-62細胞
UT-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TC-1 [Mouse lung] Cell:小鼠肺上皮細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KTCTL-140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C518細胞、COLO 684細胞、H-1954細胞
TOV-112D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECGI10細胞、HEK293-H細胞、Hs68細胞
MC57細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19-RIKEN細胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞、NPA細胞
CCD966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-150細胞、Hs821T細胞、YD38細胞
A-101D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
細胞生長特性:貼壁生長
TC-1 [Mouse lung] Cell:小鼠肺上皮細胞系
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
H-2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
NCIH1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞
OVCAR-8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2 DAP細胞、MDAMB134VI細胞、X63-Ag8-653細胞
624mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO206細胞、K-562細胞、HUT-28細胞
Med 341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
SKCO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M-1E8細胞、NG108-15細胞、RBVEC細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
TC-1 [Mouse lung] Cell:小鼠肺上皮細胞系
Colo699細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2330細胞、H-661細胞、HCT116/L細胞
HCS2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞
HDMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs895.T細胞、GLC-82細胞、Karpas 422細胞
CCC-HIE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293EBNA細胞、293 H細胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細胞
ATDC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
NCIH2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞
GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
HPBALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞
CAL 51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
CAL 51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac 1.2F5細胞、Hs27細胞、L540細胞
HCC1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞
Hopkins-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞
Ramos(RA1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞
B16 BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
GM2219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細胞、HEK 293-EBNA細胞、Loucy細胞
C-28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞
GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
NCI-H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAC1細胞、mREC細胞、HEC151細胞
CPA47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2細胞、U251-MG細胞、AR4IP細胞
CNE-2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
SR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 1788細胞、CaEs17細胞、MALME.3M細胞
H-1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A1847細胞、MDBK (NBL-1)細胞、D-341Med細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
AX-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞
ketr 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTSMC細胞、Granta-519細胞、OVCAR 4細胞
LUDLU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞
NCI-H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
HFT8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞
RBMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞
P1-Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-10RGB細胞、MG-HU-3細胞、OCI-AML-5細胞
ZR75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB-1細胞、SF126細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞
HCV29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞
P36細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGSMC細胞、NCIH2227細胞、NHDF細胞
EB2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細胞、786O細胞、NCIH524細胞
Hs578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞
Hs 695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞
Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
RCK8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
COV 434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/EBNA細胞、SKNBE2C細胞、HT1197細胞
LP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細胞、HCC 94細胞、AML12細胞
NCI-H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812細胞、P30 OHK細胞、SK-NEP-1細胞
TC-1 [Mouse lung] Cell:小鼠肺上皮細胞系
NCIH1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM1細胞、H295R-S1細胞、HCC9204細胞
Mouse podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞
H-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞
CPA 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞
IHHA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞
GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
BHP10-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375-SM細胞、MES23.5細胞、SKGT2細胞
HCT 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細胞、P-388D1細胞、WEHI 231細胞
SW-527細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293E細胞、Capan-1細胞、PASMCS細胞
COLO824細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細胞、G422細胞、H146細胞
CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-296細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、KATO 3細胞
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