"A-549 Cell:人肺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細胞、TSCCa細胞、SNU-620細胞
RPMI-7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞
VP267細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細胞、COV-434細胞、H2029細胞
Caco2-BBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A-549 Cell:人肺癌細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應(yīng)，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H-1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞
TE-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞
ECV-304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：National Medical Center-Glioma 1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞、SDBMSC細胞
MCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細胞、C3H 10T1/2細胞、MFE280細胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞、201T細胞、Hs695T細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
A-549 Cell:人肺癌細胞系
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當(dāng)會事。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞
Leukemic 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
Ca761細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
MDAMB453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-436細胞、H-1651細胞、SK-ML2細胞
16HBE140細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞
NCI-H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞
CNE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6Cl30細胞、SP-2細胞、MC26細胞
A-549 Cell:人肺癌細胞系
NCI-A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞
RC-4B/C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細胞、BA/F3細胞、SK Mel28細胞
IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
PLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
COV 504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細胞、NCI-H520細胞、L-132細胞
TE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞
NCIH1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
NCIH1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-451Lu細胞、HUT-125細胞、OVCAR 433細胞
BC-027細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS細胞、SW 620細胞、CT-26 WT細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
L M (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT-7細胞、FRTL-5細胞、58F細胞
CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞
WM 451-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細胞、H-716細胞、MKN 45細胞
HT-115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.3細胞、HSMC細胞、A-172 MG細胞
mREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2c)細胞、16-HBE14o細胞、LLC-PK-1細胞
MDAMB134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
HLEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細胞、AAV293細胞、DHL5細胞
HS-695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞
M 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞
COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
Hs606T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL-83B細胞、H322細胞、HCC2935細胞
BIU-87/Adr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 432細胞、PF-382細胞、KYSE50細胞
MRCV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H524細胞、BEP2D細胞、D-283細胞
LS123細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-68細胞、A-172 MG細胞、HSMC細胞
COLO 738細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 98 G細胞、Hs 688(A).T細胞、P560細胞
AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞
ARO81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細胞、Y3-Ag1,2,3細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞
WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
Daudi細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞
SLMT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 428細胞、SK-N-F1細胞、HEC-1-B細胞
NCI-A549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細胞、AdHek細胞、U266 Bl細胞
RMG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-280細胞、NCI-H2110細胞、H82sclc細胞
SUM 159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
786O細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細胞、NCI/ADR-RES細胞、NCI-H441-4細胞
RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞
H7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 18細胞、NCIH2073細胞、PY8119細胞
BCPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞
CCK-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H6c7細胞、MA-c細胞、Mouse Colon 38細胞
Centre Antoine Lacassagne-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細胞、HIT-T15細胞、C17.2細胞
U118-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞、GH 3細胞
A-549 Cell:人肺癌細胞系
SIRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
COLO829細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-695T細胞、L-02細胞、H341細胞
SCC 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞
MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
MDAMB435S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/BBe 1細胞、TOV21細胞、NCI-SNU-520細胞
H1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFSF細胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、HBE細胞
Mono Mac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞
MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞
HIT T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
C57 Mouse Tumor 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞
H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細胞、MSB-1細胞、PCI-4M細胞
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關(guān)鍵字： A-549 Cell:人肺癌細胞系
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