"A-549 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
RPMI1846細胞系相關產(chǎn)品：KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
PANC-03-27細胞系相關產(chǎn)品：hTERT-HME-1細胞、G 401細胞、HEK.EBNA細胞
GM07404D細胞系相關產(chǎn)品：H1838細胞、NS20Y細胞、KP2細胞
細胞生長：貼壁
A-549 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
最近在培養(yǎng)細胞時，發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好，很容易扎堆生長，用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來，很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的，傳代的第二天，有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢？你好，我養(yǎng)的細胞和你一樣，消化下來也是一團的，但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻，分皿后在鏡下看一看，移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕，避免晃動。細胞生長挺快，那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能：一、細胞消化后吹打不均勻，造成細胞成團生長：二、細胞細化太過，細胞成片脫落，吹打時沒有受力點，細胞聚團生長。解決辦法：根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化，將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng)：一般步驟為：真空泵吸走培養(yǎng)基，１XPBS漂洗兩次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿為例），３７度放置數(shù)分鐘，輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落，加入適量血清，以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊，離心后加入新鮮培養(yǎng)基，按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間，若胰酶處理太久，容易造成細胞貼壁不緊，顯微鏡下觀察立體感不強，嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１幾種癌細胞處理時間可適當放長，一般處理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比較容易脫落，２min足矣，P１９Cl６和２９３細胞貼壁不緊，可在PBS漂洗后，直接換新鮮培養(yǎng)基打散。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
Lu-65細胞系相關產(chǎn)品：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
H-2227細胞系相關產(chǎn)品：HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞
NRK clone 49F細胞系相關產(chǎn)品：H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
PC.3細胞系相關產(chǎn)品：SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞
MZCRC1細胞系相關產(chǎn)品：PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A-549 epithelioid cells人肺癌細胞系
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
AZ-521細胞系相關產(chǎn)品：MADISON LUNG TA-109細胞、MOLT.4細胞、T98-G細胞
L6565細胞系相關產(chǎn)品：GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞
DMS 153細胞系相關產(chǎn)品：Hs852T細胞、CHO細胞、T/G HA VSMC細胞
DV90細胞系相關產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細胞、RenCa細胞、373 MG細胞
H-1618細胞系相關產(chǎn)品：PCI:SG-231細胞、JROECL 33細胞、BC-019細胞
H-292細胞系相關產(chǎn)品：WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞
Tca-8113細胞系相關產(chǎn)品：KM12細胞、Hca-F細胞、NP-69細胞
Henrietta Lacks cells細胞系相關產(chǎn)品：IM 9細胞、OVHM細胞、MOLT16細胞
K562細胞系相關產(chǎn)品：SUM52細胞、LWnt-3A細胞、EO771細胞
C1498細胞系相關產(chǎn)品：EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
A-549 epithelioid cells人肺癌細胞系
J-111細胞系相關產(chǎn)品：Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞
CD18/HPAF細胞系相關產(chǎn)品：NB-9細胞、RL95-2細胞、Chinese Hamster Lung細胞
IGROV 1細胞系相關產(chǎn)品：HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
2780CP細胞系相關產(chǎn)品：KOPN8細胞、TFH細胞、CHP-100細胞
GC9811-P細胞系相關產(chǎn)品：Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
RKO細胞系相關產(chǎn)品：WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC（Human Schwann）細胞
RKO細胞系相關產(chǎn)品：WM451Lu細胞、SKML-28細胞、HSC（Human Schwann）細胞
NCIH1650細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ1細胞、Anip973細胞、32Dc3細胞
STO細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞
SF17細胞系相關產(chǎn)品：HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞
rRTEC細胞系相關產(chǎn)品：H596細胞、NCI-H1105細胞、MCF7ADR細胞
YT細胞系相關產(chǎn)品：LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞
CCD-19Lu細胞系相關產(chǎn)品：HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞
MDCK.2細胞系相關產(chǎn)品：Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞
NU-GC-4細胞系相關產(chǎn)品：TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞
LI7細胞系相關產(chǎn)品：BxPC-3細胞、3T3 J2細胞、T173細胞
H-1930細胞系相關產(chǎn)品：PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
HEK293F細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-2細胞、P3 NS1 Ag4/1細胞、SupT1細胞
Epstein-Barr-1細胞系相關產(chǎn)品：HIT T-15細胞、HCC1359細胞、MDCC-MSB-1細胞
LC-MS細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1963細胞、SNU601細胞、NCI-H2170細胞
HCEC細胞系相關產(chǎn)品：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
RH8994細胞系相關產(chǎn)品：SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞
OCM1A細胞系相關產(chǎn)品：686LN-M4e細胞、C-Lu-65細胞、HUT 226細胞
Hs 578T細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
NUGC3細胞系相關產(chǎn)品：VMRC-RCZ細胞、SU-DHL6細胞、16-HBEo細胞
NCI-841細胞系相關產(chǎn)品：AML-2細胞、Rat1細胞、LS180細胞
OCI-AML-3細胞系相關產(chǎn)品：HS-294T細胞、MHCC-97細胞、UMUC3細胞
H-1581細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞
GM00346細胞系相關產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
MXI細胞系相關產(chǎn)品：Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞
LCMS細胞系相關產(chǎn)品：KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞
HCT116/L細胞系相關產(chǎn)品：PANC 1005細胞、LAC細胞、U-2-OS細胞
H647細胞系相關產(chǎn)品：DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞
AM38細胞系相關產(chǎn)品：RPMI8226/S細胞、VMRCLCD細胞、Co 205細胞
COLO678細胞系相關產(chǎn)品：P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞
HLEB-3細胞系相關產(chǎn)品：MM1細胞、Ramos-2G6-4C10細胞、U266B1細胞
Reuber-H-35 hepatoma細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1588細胞、MPC5細胞、SW-527細胞
H1385細胞系相關產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
M14-MEL細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB 361細胞、SW982細胞、CCD-966SK細胞
Michigan Cancer Foundation-7細胞系相關產(chǎn)品：WM-239細胞、Hs 888Lu細胞、SW-13細胞
Super Tube細胞系相關產(chǎn)品：SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞
SCC 15細胞系相關產(chǎn)品：VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
WEHI-279細胞系相關產(chǎn)品：P31FUJ細胞、LICCF細胞、PC14細胞
Nb2細胞系相關產(chǎn)品：C-4I細胞、C32-mel細胞、U-251MG細胞
FAO-1細胞系相關產(chǎn)品：LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞
PANC3.27細胞系相關產(chǎn)品：BT-B細胞、AU 565細胞、SNGM細胞
F36P細胞系相關產(chǎn)品：MiaPaCa-2細胞、WM-266-4細胞、373MG細胞
NCIH2052細胞系相關產(chǎn)品：G361mel細胞、A10細胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞
RD-2細胞系相關產(chǎn)品：Hs 675.T細胞、MDA453細胞、MES-13細胞
DMS 53細胞系相關產(chǎn)品：CCRF-CEM C7細胞、VB細胞、Eca 109細胞
HSKMC細胞系相關產(chǎn)品：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
A-549 epithelioid cells人肺癌細胞系
G422細胞系相關產(chǎn)品：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
639 V細胞系相關產(chǎn)品：CD18細胞、OSRC2細胞、MLM細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關產(chǎn)品：NFHIOSE-29細胞、LICR-HN-6細胞、OCILY3細胞
DMS 153細胞系相關產(chǎn)品：Hs852T細胞、3T3-Swiss細胞、GA-10 clone 4細胞
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