"A-498 Cell:人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞、TE-1細(xì)胞
NTera2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK13細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞、HEK293A細(xì)胞
SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞
MT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B6Tert-1細(xì)胞、XWLC-05細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
A-498 Cell:人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存:目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細(xì)胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BSC-40細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/9細(xì)胞、WiDrTC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞
Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
RGM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1R細(xì)胞、HT-29細(xì)胞、SKMel-28細(xì)胞
10T1/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC-823細(xì)胞、MT2細(xì)胞、NTERA2細(xì)胞
HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
A-498 Cell:人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
ACC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH226細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞
HCC-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-2細(xì)胞、BLO11細(xì)胞、TH1細(xì)胞
H322T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H676B細(xì)胞、MV-522細(xì)胞、U138MG細(xì)胞
Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABE8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞
H-345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79細(xì)胞、X63.Ag8.653細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞
UCH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY1細(xì)胞、H-650細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞
LLC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-7細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞
A-498 Cell:人腎癌細(xì)胞系
RCK-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、WC00079細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞
Mouse podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 813細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞
U373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞
KBM-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-50細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞、SK-N-MC細(xì)胞
KMY1022細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-19細(xì)胞、CT26.CL25細(xì)胞、HCC0095細(xì)胞
Strain KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-T CEM細(xì)胞、RPMI 8226細(xì)胞、H-1792細(xì)胞
UCH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY1細(xì)胞、H-650細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞
H-1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:5637細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、OCI-Ly3細(xì)胞
OCI/AML-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGR.OV1細(xì)胞、PTK 2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞
MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞
THLE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:7860細(xì)胞、SCC90細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞
CHG5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-M17細(xì)胞、OCI-Ly1細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞
MM-1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C12細(xì)胞、Human Embryonic Skin細(xì)胞、G 292 Clone A 141B1細(xì)胞
GM03320D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK.10細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞、RH35細(xì)胞
HCC94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2218細(xì)胞、AN-3細(xì)胞、H2227細(xì)胞
P3J HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219C細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞、MDA-MB-231-luc細(xì)胞
NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞
KRC/Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM5細(xì)胞、GT1-1細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞
SRA01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-149PT細(xì)胞、MAEC細(xì)胞、Colo-201細(xì)胞
HTSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM-1215細(xì)胞、Ej138細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs600T細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞
HPAF-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L Wnt-3A細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞、HMC3細(xì)胞
Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞
Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞
LNCaP C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480E細(xì)胞、DI TNC-1細(xì)胞、NK92細(xì)胞
HT55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159PT細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞、ML-2細(xì)胞
NCI-SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞、PMVEC細(xì)胞
HEK293-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNMC細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞、U87MG細(xì)胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs729T細(xì)胞、BMU-S1細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞
Kit225/K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J111細(xì)胞、GM00215細(xì)胞、OCI-AML4細(xì)胞
HK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 10細(xì)胞、2E8細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞
HCC70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1819細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞、MCF-10 Attached細(xì)胞
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞
LAN5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1463細(xì)胞、293GP細(xì)胞、H295細(xì)胞
HN4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA4細(xì)胞、MDA361細(xì)胞、H-1618細(xì)胞
EOC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-10細(xì)胞、KYSE-30細(xì)胞、MTC-TT細(xì)胞
ECC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞
Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LO2細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞
SW260細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-10細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞
NU-GC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-1細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞、BERH-2細(xì)胞
HCS-2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 c18細(xì)胞、PVEC細(xì)胞、GM03570細(xì)胞
A-498 Cell:人腎癌細(xì)胞系
MDA-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJ-RH30細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞
RCC10 RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞
DHL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLMA細(xì)胞、H719細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞
Mc Ardle 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-PRF-5細(xì)胞、MBMEC細(xì)胞、SUDHL-6細(xì)胞
Hs 766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRVEC細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞
K-562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GFP-Olig2細(xì)胞、Colo205細(xì)胞、H3255細(xì)胞
alpha-TC1.6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 522細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞、Leydig細(xì)胞
OUMS-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE270細(xì)胞、H774細(xì)胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
Panc2_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細(xì)胞、D 407細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO-81細(xì)胞、A2058細(xì)胞、AdHek細(xì)胞
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP62細(xì)胞、HL-1細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞
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關(guān)鍵字: A-498 Cell:人腎癌細(xì)胞系
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