"A-498 Cell:人腎癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-44細胞、SK UT 1細胞、TE-1細胞
NTera2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK13細胞、LOUNH91細胞、HEK293A細胞
SW-1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDBK (NBL-1)細胞、IM 9細胞、NR 8383細胞
MT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B6Tert-1細胞、XWLC-05細胞、MRC-5細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A-498 Cell:人腎癌細胞系
細胞的凍存：目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BSC-40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC/9細胞、WiDrTC細胞、ANA1細胞
Malme-3 M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞
RGM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C1R細胞、HT-29細胞、SKMel-28細胞
10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BGC-823細胞、MT2細胞、NTERA2細胞
HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
A-498 Cell:人腎癌細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
ACC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH226細胞、U373 MG細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞
HCC-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞
H322T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H676B細胞、MV-522細胞、U138MG細胞
Colon26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABE8.1/2細胞、TE 85.T細胞、BCECs細胞
H-345細胞系相關(guān)產(chǎn)品：V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞
UCH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
LLC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞
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RCK-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
Mouse podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞
U373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞
KBM-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
KMY1022細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞
Strain KB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-T CEM細胞、RPMI 8226細胞、H-1792細胞
UCH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
H-1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品：5637細胞、SKNDZ細胞、OCI-Ly3細胞
OCI/AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
MDA2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WC00079細胞、LC1/Sq細胞、NCTC clone 1469細胞
THLE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞
CHG5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BE2-M17細胞、OCI-Ly1細胞、UCLA-SO-M20細胞
MM-1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
GM03320D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞
HCC94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
P3J HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞
NCI-H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-H細胞、NCI660細胞、JVM3細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
KRC/Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
SRA01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
HTSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs600T細胞、NCI-SNU-182細胞、NRK clone 52E細胞
HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞
Hs 822.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-MC細胞、CV 1細胞、GCT0404細胞
LNCaP C4-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW480E細胞、DI TNC-1細胞、NK92細胞
HT55細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159PT細胞、UM-UC-14細胞、ML-2細胞
NCI-SNU-423細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞
HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞
Kit225/K6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J111細胞、GM00215細胞、OCI-AML4細胞
HK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞
HCC70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1819細胞、KHYG-1細胞、MCF-10 Attached細胞
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
LAN5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1463細胞、293GP細胞、H295細胞
HN4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
EOC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
ECC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GC-2細胞、J774細胞、3T3 J2細胞
Lu-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LO2細胞、NCIH661細胞、MDAMB175細胞
SW260細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-10細胞、PLMVEC細胞、PG-4(S+L-)細胞
NU-GC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK-1細胞、Ramos G6.C10細胞、BERH-2細胞
HCS-2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞
A-498 Cell:人腎癌細胞系
MDA-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞
RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞
DHL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMA細胞、H719細胞、A549/DDP細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
Hs 766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRVEC細胞、MDA MB 436細胞、WM-266-4細胞
K-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
alpha-TC1.6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Line 522細胞、MV 4;11細胞、Leydig細胞
OUMS-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE270細胞、H774細胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞
HTR-8/SV neo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BDCM細胞、RMa-bm細胞、NCI-H747細胞
Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1836細胞、D 407細胞、UCLA SO M21細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
LUDLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP62細胞、HL-1細胞、BN-CL2細胞
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