"FU-OV-1 Cell:人卵巢癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
H-2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞
Panc 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA317細胞、TE5細胞、OCI-Ly01細胞
BCAP37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞
Clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1Lu細胞、HET1A細胞、N1E-115細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
FU-OV-1 Cell:人卵巢癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責(zé)免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復(fù)蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Hep-G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞
AE 1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
HIBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL1339細胞、DOK細胞、NG-108-15細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
GOS-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細胞、8305C_1細胞、OV-90細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
FU-OV-1 Cell:人卵巢癌細胞系
細胞復(fù)蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
U 937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAHY-926細胞、N1S1細胞、HBdSMC細胞
CCD-966SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8653細胞、H-1836細胞、PJ34細胞
Ramos-RA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-740細胞、H2052_MM細胞、870細胞
DoHH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
LTEP-a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞
SKNSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 432細胞、Pfeiffer細胞、AR41P細胞
A-204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞
FU-OV-1 Cell:人卵巢癌細胞系
NCIH548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細胞、HGC27細胞、NCI-H838細胞
OCI-Ly 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞
SK-N-BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAntle cell VERona-1細胞、Mono-Mac-1細胞、J111細胞
Hs 611.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、P3/X63-Ag8細胞、HPAF/CD18細胞
H-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 190細胞、HT1197細胞、CEM C7細胞
Vero E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
A 2058細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞
SC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU145細胞、HT 115細胞、H87細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細胞、HCC 38細胞、C4-1細胞
OV3121細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞
CT26.CL25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-435細胞、H-64細胞、H2122細胞
Ku812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞
CAL-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-Bladder-V細胞、T-47-D細胞、COLO680N細胞
HeLa S 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD-38細胞、C2BBe 1細胞、L-363細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
TGW-nu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep2細胞、SW 626細胞、SF-539 BT細胞
IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
MES-SA-Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-39細胞、3T3細胞、38C13細胞
PLA-801C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL124細胞、BTT739細胞、PC-3細胞
Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
RCK8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
JS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-O RCC細胞、GM07404A細胞、CHP-126細胞
Panc4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞
PCI:SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
PFSK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H548細胞、RAW264細胞、SUSM-1細胞
BCAP37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSCT6細胞、HSC-3細胞、GM00637細胞
SW-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞
BC-3H-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞
HFL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tregs細胞、HT1376細胞、H-295細胞
H157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C1細胞、NCIH1048細胞、NCIH841細胞
Hepatoma 22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞
B16-F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞
SiHa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 620細胞、HCT8細胞、A.704細胞
LLCPK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞
X63.Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH211細胞、GC9811-P細胞、NCI-BL1339細胞
MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
LTEPa2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-484細胞、PTK-1細胞、MADB106細胞
NCI-H1734細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-6細胞、SKO-007細胞、RPE1細胞
LOU-NH-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/AdrR細胞、SUP-M2細胞、C-33-A細胞
Roswell Park Memorial Institute 1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM3細胞、SGC7901/DDP細胞、C3H10T1/2細胞
FU-OV-1 Cell:人卵巢癌細胞系
A375mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS-1細胞、SGC-7901細胞、JHH2細胞
HET-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM3190細胞、Caco2-BBE細胞、LX-2細胞
CNE2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LOU-NH-91細胞、COS-1細胞、CNE細胞
MOLT 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細胞、HANK1細胞、NS20-Y細胞
SW480E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-361細胞、NCI-H650細胞、SU-DH-L5細胞
MFD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
NS20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-782細胞、bEnd.3[BEND3]細胞、Mc Coy細胞
NCI-H810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACHN細胞、JB6 Cl 30-7b細胞、H2228細胞
MMVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE 280細胞、MOLT16細胞、JIMT1細胞
UPCI-SCC090細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞
HCC-9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞
624細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細胞、B-95-8細胞、RBL細胞
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