"G-361 Cell:人黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
He La細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C81-61細胞、EST50細胞、M210B4細胞
RBL2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：b.End3細胞、NCTC 929細胞、NCI-SNU-449細胞
SCC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 201細胞、SMA 560細胞、Pt K2細胞
GLRK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
G-361 Cell:人黑色素瘤細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２-３天換液１次。
為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染；試劑保存不當；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細胞濃度；讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCIH322細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
MDA468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QSG-7701細胞、FHs74Int細胞、HFSF細胞
AN3CA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB 157細胞、C6661細胞、Rat podocyte細胞
MCF-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM6細胞、Human Embryo Kidney-2細胞、MCF7-CTRL細胞
RPE1-hTERT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1993細胞、FRTL 5細胞、A2780S細胞
細胞生長特性：貼壁生長
G-361 Cell:人黑色素瘤細胞系
細胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉毎麅龃婀?、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
Hce8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
SK-MES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：G519細胞、MCF7-CTRL細胞、MB468細胞
Me Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞
Panc05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCPEpiC細胞、SW.620細胞、AtT20細胞
H-446細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U251-MG細胞、Hs 888.T細胞、A9(Hamprecht)細胞
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
mRMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞
G-361 Cell:人黑色素瘤細胞系
HPBALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞
MRC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
SK_N_FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞
NOZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H196細胞、NCI-H-69細胞、THP-1細胞
NCTC1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
SUM-159-PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞
H-2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞
Line 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
CAL-120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
CAL-120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
Calu-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-140細胞、BCAP37細胞、NCI-BL2141細胞
Y3Ag1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLMS1細胞、SNU16細胞、MDA MB 361細胞
NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞
LICR-HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK10a細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、T-ALL 1細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
HT1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH30SJ細胞、RL-65細胞、NK62a細胞
NTera-2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞
GM00215細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-RC-2細胞、NCIH524細胞、OCI AML2細胞
PAa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ML2細胞、HCC2218細胞、C-8161細胞
RBL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS79細胞、NIH-OVCAR-3細胞、HeLa S-3細胞
Colo741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-410細胞、EnCa1細胞、TE671細胞
RDES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT 78細胞、U-373-MG細胞、C-Lu-65細胞
SKNAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
C81-61細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB 6細胞、Hs 445細胞、Panc8.13細胞
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
HT-1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM1細胞、NCI-H716細胞、KBM7細胞
C127細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞
HNTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
H-647細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225/K6細胞、P3X63 AG 8.653細胞、NRK49F細胞
PAN 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞
NCI-H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞
AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞
TKB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞
HKC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-982細胞、PL9細胞、BL1339細胞
HEK 293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT clone T15細胞、NCIH211細胞、SUM-52-PE細胞
Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞
MDAMB175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV-29細胞、CT-26細胞、WM451細胞
RIN Cl-5F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB19細胞、HCC9204細胞、GM15452細胞
OCI-Ly 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C細胞、F81細胞、P-3J細胞
H-2286細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI Rb-1細胞、LSC-1細胞、Hs-578-T細胞
SUNE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D10G41細胞、SCC 15細胞、Hs822T細胞
EFM192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H/10T1/2-clone8細胞、LS411N細胞、H3255_DA細胞
G-361 Cell:人黑色素瘤細胞系
SUSM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2073細胞、Hs604T細胞、MKN45細胞
HFL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3細胞、COLO-684細胞、SKO-007細胞
OCI-AML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO320DM細胞、Panc02.03細胞、HNE1細胞
MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
RPMI-6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
U-138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、NRK49F細胞、CBRH-7919細胞
KYSE50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMVEC細胞、OCI-Ly10細胞、EJ-1細胞
LA795細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細胞、HLF-a細胞、OVCAR-5細胞
NALM 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
MDAMB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTCTL140細胞、CAMA細胞、Hep-3B細胞
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