"G-361:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長：貼壁

凍存和復(fù)蘇的原則：慢凍快融》當細胞冷到零度以下，可以產(chǎn)生以下變化：細胞器脫水，細胞中可溶性物質(zhì)濃度升GAO，并在細胞內(nèi)形成冰晶。如果緩慢冷凍，可使細胞逐步脫水，細胞內(nèi)不致產(chǎn)生大的冰晶；相反，結(jié)晶就大，大結(jié)晶會造成細胞膜、綱胞器的損傷和破裂。復(fù)蘇過程應(yīng)快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重結(jié)晶。慢凍程序》1.標準程序：采用細胞凍存器》當溫度在-25℃以上時，1~2℃/min；當溫度達-25℃以下時，5~10℃/min；當溫度達-100℃時，可迅速放入液氮中。2.簡易程序：將冷凍管（管口要朝上）放入紗布袋內(nèi)，紗布袋系以線繩，通過線繩將紗布袋固定于液氮罐罐口，按每分鐘溫度下降1~2℃的速度，在40min內(nèi)降至液氮表面過夜，次晨投人液氮中。3.傳統(tǒng)程序：冷凍管置于4℃10分鐘→-20℃30分鐘→-80℃16~18小時（或隔夜）→液氮槽長期儲存。細胞凍存方法：1.預(yù)先配制凍存液》（1）8%DMSO+細胞生長液（92%血清）2.取對數(shù)生長期細胞，經(jīng)胰酶消化后，加入適量凍存液，用吸管吹打制成細胞懸液（1×10(6)~5×10(6)細胞/ml）。3.加入1ml細胞于凍存管中，密封后標記冷凍細胞名稱和冷凍日期。液氮長期保存。保存細胞的復(fù)蘇方法：1.快速解凍》凍存細胞從液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，輕輕搖動冷凍管，使其在1分鐘內(nèi)全部融化（不要超過3分鐘）。2.解凍后的細胞可直接接種到含完全生長培養(yǎng)液的細胞培養(yǎng)瓶中直接進行培養(yǎng)，24小時后再用新鮮完全培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液，以去除DMSO。3.如果細胞對冷凍保護劑別敏感解凍后的細胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護劑，然后再接種到含完全生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源

UMUC14細胞類似產(chǎn)品：：Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞

GM05887A細胞類似產(chǎn)品：：MDCK Type II細胞、H2196細胞、CORL51細胞

B16/F1細胞類似產(chǎn)品：：H345細胞、HEK293E細胞、NCIH1648細胞

SK N SH細胞類似產(chǎn)品：：MDCC MSB1細胞、Hopkins-92細胞、H-1341細胞

[細胞產(chǎn)品包裝]鮮活細胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細胞：１ml凍存管(兩支)

細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹

G-361:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞形態(tài)：上皮細胞樣

HPAF2細胞類似產(chǎn)品：：EB-2細胞、NCI-H1373細胞、NCIH358細胞

JB6 Cl 30-7b細胞類似產(chǎn)品：：T-ALL-1細胞、Jurkat-77細胞、NCI-H2030細胞

HCC4006細胞類似產(chǎn)品：：KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞

細胞培養(yǎng)實驗基本操作：①進無菌室前要徹底洗手，按規(guī)定穿隔離衣。開始操作前要用７５%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕，安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應(yīng)在火焰近處并經(jīng)過燒灼進行。但要注意，金屬器械不能在火焰中長時間燒灼，以防退火；燒過的器械要冷卻后才能使用；已吸過培養(yǎng)液的吸管不能再用火焰燒灼，因殘留在吸管內(nèi)的培養(yǎng)液成分如蛋白質(zhì)等燒焦后會產(chǎn)生有害物質(zhì)，吸管再用時會將其帶到培養(yǎng)液中；膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養(yǎng)用品過火焰是也不能時間太長，以免燒焦產(chǎn)生有毒氣體，危害培養(yǎng)細胞，同時塑料細胞培養(yǎng)用品也會產(chǎn)生變形影響使用。③使用培養(yǎng)液前不宜過早開瓶，開瓶后的培養(yǎng)液應(yīng)保持斜位，避免直立，以防止下落細菌的污染。不再使用的培養(yǎng)液應(yīng)立即封閉瓶口，培養(yǎng)的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話，咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養(yǎng)液、細胞懸液時，應(yīng)專管專用，一旦發(fā)現(xiàn)吸管口接觸了手和其他污染物品應(yīng)棄去，以防止污染擴大或造成培養(yǎng)物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應(yīng)整理HAO工作臺面，用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面；防止細胞交叉污染：所有從別處轉(zhuǎn)來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備，一旦懷疑發(fā)生交叉污染，可做細胞遺傳學方面的鑒定，如發(fā)現(xiàn)原有的細胞遺傳物發(fā)生改變，可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應(yīng)由兩人獨立進行；無菌室的徹底消毒①新潔爾滅全面徹底擦洗無菌室。使用前應(yīng)稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比，Zui大的YOU點是便宜，而且可以稀釋５０倍用，而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一種廣譜滅菌劑菌，其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉，熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含３７－４０%的甲醛。

細胞傳代方法：１：２-１：４傳代，２-３天換液１次。

細胞來源說明：來源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細胞庫

G-361:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

細胞生長特性：貼壁生長

貼壁細胞傳代：去掉原T25培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；棄PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化細胞，顯微鏡下觀察，待細胞變圓，細胞間隙明顯，部分細胞剛開始脫離瓶壁，加4 ml左右完全培養(yǎng)液混勻終止消化，將細胞小心吹打下來，1000rpm/min室溫離心5min；棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶補足培養(yǎng)基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。懸浮細胞傳代：一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，將細胞懸液移入離心管中，1000rpm/min 室溫離心5min。棄上清，細胞沉淀用完全培養(yǎng)液重懸，按要求分瓶（視細胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培養(yǎng)液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。有些懸浮細胞趨于成團生長，此時細胞生長狀態(tài)良HAO，當補液時，需避免反復(fù)吹打。

DiFi細胞類似產(chǎn)品：：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞

NK92MI細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞

Lu-165細胞類似產(chǎn)品：：HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞

U-87 MG細胞類似產(chǎn)品：：LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞

P3-X63-Ag8-653細胞類似產(chǎn)品：：H250細胞、JKT1細胞、SJSA細胞

SNU-739細胞類似產(chǎn)品：：A-498細胞、HGBEC細胞、AM-38細胞

PL-12細胞類似產(chǎn)品：：MOLT-3細胞、NCIH747細胞、NIE-115細胞

SNU-668細胞類似產(chǎn)品：：Mac-1細胞、EU-4細胞、NCI-H660細胞

P19細胞類似產(chǎn)品：：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞

L-5178-Y細胞類似產(chǎn)品：：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞

Hs-600-T細胞類似產(chǎn)品：：H-1781細胞、TMK1細胞、FM88細胞

ACC-3細胞類似產(chǎn)品：：4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞

SKG3A細胞類似產(chǎn)品：：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞

NCI-H676B細胞類似產(chǎn)品：：J82細胞、CPAE細胞、A-427細胞

U118MG細胞類似產(chǎn)品：：NCI-H2141細胞、TCCSUP細胞、SNU-878細胞

Colo-678細胞類似產(chǎn)品：：SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞

Colo-678細胞類似產(chǎn)品：：SupB15WT細胞、Hela-mock細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞

A7r5細胞類似產(chǎn)品：：SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞

PLC/PRF5細胞類似產(chǎn)品：：KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞

RCC4細胞類似產(chǎn)品：：KM933細胞、NCI-SNU-423細胞、HEK 293-F細胞

MDA-MB-436細胞類似產(chǎn)品：：CCRF/CEM/0細胞、MRASMC細胞、SCC090細胞

MC-3T3細胞類似產(chǎn)品：：CESS細胞、A-172MG細胞、RFL 6細胞

Mono Mac 6細胞類似產(chǎn)品：：CCD-841CoN細胞、Walker-Ca.256細胞、Hs 578Bst細胞

CHL-IU細胞類似產(chǎn)品：：KU-812-F細胞、SK-BR3細胞、QGY-7703細胞

G-361:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

HS-294-T細胞類似產(chǎn)品：：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞

MC38細胞類似產(chǎn)品：：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞

MC38細胞類似產(chǎn)品：：QG56細胞、H-1238細胞、OCM1A細胞

Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞類似產(chǎn)品：：SHEE細胞、NCI-H660細胞、NS-1-Ag4-1細胞

SNU-878細胞類似產(chǎn)品：：HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞

NCIH1568細胞類似產(chǎn)品：：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞

OV2008細胞類似產(chǎn)品：：NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞

Det. 562細胞類似產(chǎn)品：：H19-7細胞、SNU620細胞、MES 13細胞

SW-962細胞類似產(chǎn)品：：H2126細胞、Jiyoye (P-2003)細胞、CFPAC1細胞

AE1201細胞類似產(chǎn)品：：COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞

UMRC-2細胞類似產(chǎn)品：：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞

PBL細胞類似產(chǎn)品：：H35細胞、RAW 264.7細胞、MA-782細胞

AMC-HN-8細胞類似產(chǎn)品：：BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞

GM06141細胞類似產(chǎn)品：：RBL-I細胞、THP 1細胞、NCI N87細胞

CNLMG-B5537SKIN細胞類似產(chǎn)品：：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞

MC3T3-E1(C4)細胞類似產(chǎn)品：：FHCRC subclone 11細胞、PC 61.5.3細胞、P388D1細胞

MDAMB134細胞類似產(chǎn)品：：HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞

Kit-225細胞類似產(chǎn)品：：PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞

SCCVII/St細胞類似產(chǎn)品：：Panc-327細胞、LNCaP-ATCC細胞、LS 180細胞

B16 F10細胞類似產(chǎn)品：：A-704細胞、253JBV細胞、LNCaP subline C4-2細胞

Hs27F細胞類似產(chǎn)品：：LWnt3A細胞、IPLB-Sf21-AE細胞、HLEpiC細胞

UPCI-SCC090細胞類似產(chǎn)品：：L M (TK-)細胞、Panc 1細胞、NCI.H460細胞

National Medical Center-Glioma 1細胞類似產(chǎn)品：：HBE 135-E6E7細胞、HSCT6細胞、KYSE 410細胞

Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞類似產(chǎn)品：：FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞

NCIH226細胞類似產(chǎn)品：：H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞

UMNSAH/DF#1細胞類似產(chǎn)品：：SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞

C643細胞類似產(chǎn)品：：VCaP細胞、CL1細胞、Hepa1-6細胞

SUM-159-PT細胞類似產(chǎn)品：：Sp2/0-Ag-14細胞、SW1271細胞、OVCAR4細胞

3 LL細胞類似產(chǎn)品：：UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞

GB1細胞類似產(chǎn)品：：COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞

SK-Mel 2細胞類似產(chǎn)品：：GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞

B-16細胞類似產(chǎn)品：：SU-86-86細胞、U-2 OS細胞、H1975細胞

COR-L 105細胞類似產(chǎn)品：：CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞

AML193細胞類似產(chǎn)品：：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞

CL 1-5細胞類似產(chǎn)品：：PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞

T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞類似產(chǎn)品：：Hs 766細胞、WPE-int細胞、CCD966SK細胞

3T3-442A細胞類似產(chǎn)品：：SK-MEL-MeWo細胞、H-4-II-E細胞、MN 60細胞

Lu-165細胞類似產(chǎn)品：：HEY A8細胞、Sp2/mIL-6細胞、CAL 62細胞

KLN205細胞類似產(chǎn)品：：HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞

SW-954細胞類似產(chǎn)品：：HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞

SHEE細胞類似產(chǎn)品：：COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞

RFL6細胞類似產(chǎn)品：：HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞

HCC-1954BL細胞類似產(chǎn)品：：Walker256-TC細胞、WSUDLCL2細胞、MEF細胞

Hs821T細胞類似產(chǎn)品：：ATC241細胞、HCC2279細胞、MZ-CRC-1細胞

NCTC 929細胞類似產(chǎn)品：：Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞

NCI-H1522細胞類似產(chǎn)品：：H441細胞、GM03671細胞、SK-HEP-1細胞

PIEC細胞類似產(chǎn)品：：SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞

T-ALL 1細胞類似產(chǎn)品：：ZR75-30細胞、NUGC-3細胞、OCI-Ly 19細胞

NR 8383細胞類似產(chǎn)品：：RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞

RCSMC細胞類似產(chǎn)品：：OVCAR.8細胞、H-2073細胞、LAN-5細胞

HMrSV5細胞類似產(chǎn)品：：CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞

OCI-LY-3細胞類似產(chǎn)品：：MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞

A-704細胞類似產(chǎn)品：：CEM C7細胞、HCV29細胞、NCI-H676B細胞

SKG3A細胞類似產(chǎn)品：：IOSE29細胞、B-3細胞、SW-48細胞

NUGC-3細胞類似產(chǎn)品：：H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞

H1404細胞類似產(chǎn)品：：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞

COLO 680N細胞類似產(chǎn)品：：SVG(P12)細胞、J45.01細胞、5637細胞

Ej138細胞類似產(chǎn)品：：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞

Ej138細胞類似產(chǎn)品：：Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞

NCI-SNU-601細胞類似產(chǎn)品：：U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞

SACC-83細胞類似產(chǎn)品：：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞

CAL-120細胞類似產(chǎn)品：：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞

MDA134細胞類似產(chǎn)品：：RBL 1細胞、H-1993細胞、MDCK細胞

Rat-2細胞類似產(chǎn)品：：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞

Hs675T細胞類似產(chǎn)品：：A2780/CP70細胞、Tu-177細胞、624 MEL細胞

RA 1細胞類似產(chǎn)品：：NCTC 1469細胞、A549 ATCC細胞、A-704細胞

HCC-202細胞類似產(chǎn)品：：RT4細胞、NB1-RGB細胞、ND7/23細胞

OVCAR3細胞類似產(chǎn)品：：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞

COLO394細胞類似產(chǎn)品：：373 MG細胞、BE2-M17細胞、RGM1細胞

H-2227細胞類似產(chǎn)品：：HT1197細胞、HUT 125細胞、J.E6-1細胞

TK10細胞類似產(chǎn)品：：KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞

Huh-7細胞類似產(chǎn)品：：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞

KNS42細胞類似產(chǎn)品：：MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞

SW-954細胞類似產(chǎn)品：：HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞

Hs604T細胞類似產(chǎn)品：：TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞

LUDLU 1細胞類似產(chǎn)品：：HCC9204細胞、CCD841CoTr細胞、NPC-TW-039細胞

U373-MG細胞類似產(chǎn)品：：Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞

CAMA細胞類似產(chǎn)品：：CAL 51細胞、TSU-Pr1細胞、H929細胞

HepG2/C3A細胞類似產(chǎn)品：：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞

LU65細胞類似產(chǎn)品：：130 T細胞、H2405細胞、SW 1573細胞

U251細胞類似產(chǎn)品：：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞

OVCA 433細胞類似產(chǎn)品：：Japanese Tissue Culture-28細胞、HPAF-II細胞、H-1944細胞

G-361:人黑色素瘤復(fù)蘇細胞(提供STR鑒定圖譜)

KMST-6細胞類似產(chǎn)品：：DF-1細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、NCIH441細胞

EAhy926細胞類似產(chǎn)品：：Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞

MH7A細胞類似產(chǎn)品：：HOK細胞、BHP-10細胞、H1793細胞

NOR-10細胞類似產(chǎn)品：：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞

MILE SVEN 1細胞類似產(chǎn)品：：AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞

H1435細胞類似產(chǎn)品：：Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞

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