"NCI-H2286 Cell:人肺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
Line 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
Panc-1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞
K 562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Walker/LLC-WRC 256細胞、RPMI2650細胞、H-1568細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H2286 Cell:人肺癌細胞系
細胞培養(yǎng)實驗相關(guān)問題總結(jié)：支原體(mycoplasma)污染的細胞，是否能以肉眼觀察出異狀？不能。除極有經(jīng)驗之專家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細胞株，無法以其外觀分辨之；支原體污染會對細胞培養(yǎng)有何影響？支原體污染幾乎可影響所有細胞之生長參數(shù)，代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前，必須確認細胞為mycoplasma-free，實驗結(jié)果之數(shù)據(jù)方有意義；偵測出細胞株有支原體污染時，該如何處理？直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細胞株；CO２培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔？定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之；為何培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，顏色會偏暗紅色，且pH值會越來越偏堿性？培養(yǎng)基保存于４°C冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO２會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red)的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾之CO２，以調(diào)整pH值；購買之細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；購買之細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；收到之冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Nb2-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2444細胞、L-363細胞、MFE 280細胞
Sp2/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1623細胞、LS180細胞、NCIH187細胞
Porcine Kidney-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1048細胞、P3HRI細胞、HPAF II細胞
A375SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PBMC細胞、MKN-7細胞、SLMT1細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NCI-H2286 Cell:人肺癌細胞系
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：橢圓形
NS20-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
PG13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞
MXI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Earles's cells細胞、HET-1A細胞、HepG2-luc細胞
QBC939細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRA-19細胞、TE9細胞、C518細胞
JROECL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-411N細胞、HEK AD293細胞、OCI-AML5細胞
Jiyoye(P-2003)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、ECC1細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞
PC-3M-1E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-4細胞、ARH 77細胞、QBI-293A細胞
NCI-H2286 Cell:人肺癌細胞系
M20 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞
MAD109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas422細胞、S16細胞、Hs-940細胞
Kasumi-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1623細胞、HL-60 Clone 15細胞、NCI-H1155細胞
CORL105細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-29細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、MDA-MB 361細胞
MDA-MB-468-RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞
U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
BT-474細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
MKN-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RMS 1598細胞、IHHA-1細胞、alpha-TC1-6細胞
XuanWei Lung Cancer-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞
Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87細胞、SNU761細胞、3396細胞
WERI-Rb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞
CTSC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFF細胞、Nb2-11細胞、SU-DHL-5細胞
OCIAML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞
FRTL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPASMC細胞、HARA-B細胞、FDCP-1細胞
CAMA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-7702細胞、MX-1細胞、2V6.11細胞
GC-2spd(ts)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞、TMD8細胞、SKNBE-1細胞
WM266mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepatoma-22細胞、HEK-293細胞、CEMC1細胞
NCI-SNU-601細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87 MG細胞、NIH3T3-L1細胞、H2591細胞
GM00346B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
3T3-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞
SW 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18Co細胞、UMUC-14細胞、CAOV4細胞
OE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細胞、BT 20細胞、DH82細胞
NCI-H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA 104細胞、COLO 678細胞、A-375SM細胞
Ishikawa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞
L-1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
BAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS513細胞、293T/17細胞、HSC-4細胞
2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293A細胞、rUCMSCs細胞、NCM460細胞
NCI-HUT-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR-146細胞、ECV 304細胞、H-1869細胞
H2066細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H889細胞、T-84細胞、PLA802細胞
LLC-PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR146細胞、RBE4細胞、A549/ATCC細胞
NCI-H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞
NCI-H1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 320HSR細胞、HHUA細胞、ST486細胞
Panc08.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
H-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI164細胞、PC3M細胞、NCI-H-128細胞
Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB415細胞、MDA.MB.435細胞、Ramos 2G6 4C10細胞
MOVAS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Liver-7702細胞、NCI-H460細胞、WM266細胞
BRL-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-6細胞、Hi5細胞、KM.12細胞
675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞
MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞
NCI-H2286 Cell:人肺癌細胞系
McA-RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1373細胞、SUM-149細胞、SMC-1細胞
LNCaP FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞
Hs 343.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TN5B14細胞、HKC細胞、V79-1細胞
SIRC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
IR 983F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231 #4175細胞、Detroit-562細胞、HCT GEO細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
Evsa-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9S1細胞、C42細胞、NCI-H1703細胞
H-510A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT28細胞、Line 207細胞、McCoy細胞
SCI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞
IEC 18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H865細胞、alpha-TC1-6細胞、CL-40細胞
AR42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L88細胞、HeLa S 3細胞、MDA MB 453細胞
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