"NCI-H2286細胞：人肺癌細胞系
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：４傳代；每周換液２次。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
細胞生長特性：貼壁生長
【細胞培養(yǎng)中細菌、霉菌的污染情況總結(jié)】細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。仔細檢查一下器皿的滅菌情況，是否在高壓滅菌時放氣時間足夠，壓力足夠！尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品，連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染，一定要注意！下次使用前檢查一下培養(yǎng)液是否存在渾濁的現(xiàn)象！可在培養(yǎng)液中加相應(yīng)的抗生素處理；霉菌：培養(yǎng)液是清亮的，倒置顯微鏡下無雜質(zhì)，３７度孵箱培養(yǎng)２-３天，仍清亮，但出現(xiàn)絮狀雜質(zhì)，鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物，可看到明顯的菌絲，細胞仍可生長，但時間長之后，細胞的活力狀態(tài)變差，用酸銅溶液擦拭CO２孵箱內(nèi)，再把水盤里也加上飽和量的酸銅?；蛘咴谂囵B(yǎng)箱的托盤加入飽和的消毒二鈉高鹽液體,可以防止霉菌污染。CO２孵箱被霉菌污染后，可把所有細胞暫時轉(zhuǎn)移，采用擦洗孵箱(包括隔板，箱壁)。并把放置在孵箱內(nèi)一個小時，使其蒸汽彌漫。待的氣味消散后，再移入細胞。孵箱應(yīng)定期清潔(２月左右)，尤其在多雨的季節(jié)。其它培養(yǎng)箱清洗方法是：用８４液擦洗－清水擦洗－７５%酒精擦洗－紫外燈照。預(yù)防霉菌污染，可在培養(yǎng)基里加３u/ml的兩性霉素或制霉菌素或D或雙抗；但細胞一旦污染，很難挽救，制霉菌素或D或雙抗都于事無補，建議舍棄該污染細胞，將環(huán)境徹底消毒，如果所有細胞都污染，可能是系統(tǒng)污染，檢查一下培養(yǎng)基和器材，如果只是個別污染，可能是操作問題，就要注意操作。
細胞培養(yǎng)過程中，總是會出現(xiàn)各種意想不到的問題，一不留神就會全盤皆輸。所謂細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀。下面是貼壁細胞的保藏方法，希望對細胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細胞狀態(tài)：貼壁細胞密度達到85-90%，即可以細胞凍存形式進行保藏，拍照，記錄細胞狀態(tài)；2)細胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細胞剛開始脫落時，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細胞狀態(tài)，至細胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細胞離心：將終止消化后的細胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細胞凍存：離心后去除細胞上清液，按照凍存細胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進行凍存；6)細胞保藏：凍存管做好標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過夜，將過夜后的凍存細胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。
很多朋友討論細胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗總結(jié)，這里說一些我個人的經(jīng)驗，因為一些比較特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細胞，常用于做實驗的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細胞。這里挑細胞消化開始做我的篇專題，并不是因為細胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個話題，我就拋磚引玉，下面幾點拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗有點出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對細胞消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實消化并不是細胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細胞遇到各種各樣的問題，很多時候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因為人們往往注意自己的操作，總覺得自己沒有經(jīng)驗，而忽視試劑，溶液尤其是細胞的質(zhì)量，后者其實才是許多細胞培養(yǎng)實驗室常見的問題。
HSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
PC 61.5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha TC1 clone 6細胞、SK-MEL-MeWo細胞、U-251-MG細胞
AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-T細胞、MV4:11細胞、ID8/MOSEC細胞
HPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JVM-3細胞、H2198細胞、YES2細胞
PC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞
LNT-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細胞、MAVER-1細胞、C-33A細胞
SKUT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
Panc 05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
HCC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRMT-1細胞、Swiss 3T3細胞、OCI-Ly1細胞
CAL 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞
T HEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N1E-115細胞、NALM 6細胞、SHG-44細胞
H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞
MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
YT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞
YT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞
MyLa2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL-24細胞、PC 61 5.3細胞、NCI-H1781細胞
KU-812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEM細胞、Mevo細胞、OCIAML2細胞
KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
H920細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HG2855細胞、SPCA-1細胞、MA-c細胞
H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ADR-RES細胞、U 138 MG細胞、H-1819細胞
EAC-E2G8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
U266B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞
526mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1(C4)細胞、RPMI7951細胞、HD11細胞
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CNE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT15細胞、RMC-1細胞、MDA-330細胞
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H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞
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QGY7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343細胞、CX1細胞、AM細胞
B16BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞
LNCaP-ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLA 144細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞、P3HRI細胞
BE(2)C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞
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Vero E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
NCIH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT55細胞、NTera 2細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞
870細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650細胞、BTI-Tn5B14細胞、EFO 27細胞
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HC11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM6細胞、HEC-251細胞、NUGC4細胞
SW1116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE0520細胞、HT-1197細胞、NCI-H719細胞
PLA801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P388-D1細胞、LU-65M細胞、LTEP-a-2細胞
KYSE0030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
Farage細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 52E細胞、NTera2/D1細胞、H-1522細胞
HBL-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞
NB1RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞
Swiss/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Fetal Thymocyte-8810細胞、LL/2 (LLC1)細胞、NCI-H2085細胞
OEC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細胞、HPF細胞、Wien133細胞
XuanWei Lung Cancer-05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 2132細胞、MFE 280細胞、R D細胞
OUMS-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞
P-2003細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC 15細胞、TYK-nu細胞、HSAS4細胞
RFL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
COV504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H341細胞、Rh30細胞、Hs 27細胞
BMDC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KGN細胞、AHH-1細胞、MDA MB 231細胞
OCI-Ly3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166細胞、WERI-Rb-1細胞、PLA801D細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
HEK-293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LK-2細胞、Reh細胞、SHG 44細胞
Scott and White No. 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H735細胞、MCF-7ADR細胞、NCIH740細胞
624-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、aNK細胞、NUGC-2細胞
MDA-MB-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
HT 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞
NT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞
NCI-N87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK細胞、NCI-H2196細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞
MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
SW756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M14細胞、7860細胞、CAL120細胞
RD-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 675.T細胞、MDA453細胞、MES-13細胞
WM266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
WM266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
HCoEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P36細胞、HSF細胞、PZ-HPV-7細胞
HuPT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-38細胞、CEM-0細胞、Panc 04.03細胞
AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-T細胞、B16/BL6細胞、COLO 829細胞
P3J.HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、H-2066細胞、NTera-2D1細胞
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