"Calu-6 Cell:人肺退行性癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
GM04671細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細胞、Karpas-299細胞、H735細胞
3-LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 966 SK細胞、SRS-82細胞、SW-954細胞
NCI-H358細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞
CAL851細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Calu-6 Cell:人肺退行性癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：消化２０分鐘。１：２。５-６天長滿。
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HSKMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
COS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OACP4C細胞、H-2172細胞、CL-34細胞
H-650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LCLC103H細胞、ARO 81-1細胞、AtT 20細胞
CCK-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H6c7細胞、MA-c細胞、Mouse Colon 38細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
細胞生長特性：貼壁生長
Calu-6 Cell:人肺退行性癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
Fao細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #8226細胞、Keio University-19-19細胞、BEL 7402細胞
WTRL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AAV-293細胞、H-920細胞、DanG細胞
CCRF-CEM/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc05.04細胞、PANC0403細胞、MLOY4細胞
P3X63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞、HHL-5細胞、MDA231-LM2-4175細胞
H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞
CAL 148細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC-1細胞、SNK-1細胞、HRA-19細胞
Calu-6 Cell:人肺退行性癌細胞系
BNCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H647細胞、IGR.OV1細胞、U-251_MG細胞
HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
Normal Rat Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞
H-524細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
H-1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
MX1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BXPC3細胞、ASH-3細胞、Lu-65細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
HIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
NCIH2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03190細胞、RCF細胞、MN 60細胞
AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞
CHP 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC3.27細胞、RWPE-1細胞、Hs-611-T細胞
DLM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TFH細胞、U-343細胞、CC-LP-1細胞
Nthy ori 3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV-3細胞、CAMA1細胞、RDES細胞
H-1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
HIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
MV4-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBTr (NBL-4)細胞、AC16 [Human hybrid]細胞、SKLU01細胞
UACC 812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞
Hs 821.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-35細胞、SK Mel 24細胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞
MA-782細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKT細胞、AR41P細胞、UCLA SO M14細胞
NW38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1648細胞、MDA MB 361細胞、NTERA2-D1細胞
HEK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0366細胞、SUM-102細胞、Namalva細胞
J774.A1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞
LN-382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：W256細胞、SVGp12細胞、U-266細胞
KRC/Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞
HOS (TE85, Clone F5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JurkatE6-1細胞、HGE細胞、OCI-Ly03細胞
HCC2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuCC-T1細胞、NCIH446細胞、LIM-1215細胞
RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞
SW 579細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
Walker256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞
Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCLY8細胞、HCC-15細胞、HPAF細胞
HSC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMC細胞、COLO 679細胞、SK-N-BE細胞
MFE-296細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞
TCCSUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DiFi細胞、FOX-NY細胞、KYSE-70細胞
ABE8.1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bovine ENDometrial cells細胞、RC-K8細胞、FL 62891細胞
NIH:OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca9-22細胞、HCT-GEO細胞、Hs870T細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC366細胞、CG4細胞、COLO-680N細胞
NR8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAPI細胞、WM 451-Lu細胞、HEK293細胞
HTori 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3.653細胞、MEC1細胞、PGLH7細胞
NCI-H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞
Baby Hamster Kidney 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞
U373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞
Calu-6 Cell:人肺退行性癌細胞系
H-2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-12細胞、NIH/3T3細胞、MDA-MB-453細胞
BHP-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel 2細胞、FCCH1018細胞、OE33細胞
NCIH2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R細胞、CD-18細胞、Hs 822.T細胞
GDM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-FHCRC細胞、WPMY-1細胞、MKN-1細胞
GM346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
Transformed C3H Mouse Kidney-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1088細胞、NK92-MI細胞、HAEC細胞
Hs832.Tc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76細胞、MDAMB231細胞、NCI-A549細胞
R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
C4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞
BALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2細胞、SACC-LM細胞、LCLC-103H細胞
HConEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞
HOEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT(H9)細胞、CHL1細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞
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