"H4 Cell:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：H４細胞系建系于１９７３年。它衍生于一個患神經(jīng)膠質(zhì)瘤的３７歲病人的腦組織。該細胞的致瘤特性己經(jīng)被屏蔽，細胞接種動物一般不產(chǎn)生腫瘤結(jié)節(jié)。該細胞具有修復MNNG損傷５型腺病毒的能力。
NCI-HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞
B16 F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL33細胞、H-1703細胞、LC-MS細胞
ECV 304細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL24細胞、NCI-H596細胞、THLE-2細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
H4 Cell:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖毎坏┟撀淙霊乙豪锬愫茈y再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３傳代,每周換液２-３次。
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
LS1034細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK-52E細胞、NCL-H548細胞、SK-N-F1細胞
HMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
NCIH292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS 683T細胞、Beta-TC-6細胞、BRL細胞
LLC PK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20S細胞、LTEP-s細胞、JTC-28細胞
HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
細胞生長特性：貼壁生長
H4 Cell:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
細胞形態(tài)特性：上皮樣
H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
HEK-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞
Dakiki細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
AAV293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞
OCI-Ly 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE8細胞、RGCs細胞、A549 ATCC細胞
PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DC 2.4細胞、Hs-274-T細胞、TK 10細胞
MGH-U3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-K8細胞、AR4-2J細胞、PANC1005細胞
H4 Cell:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
hTERT-RPE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞
A2780-CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578.T細胞、NG10815細胞、KM-H2細胞
HCC-1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D324 Med細胞、RBL 2H3細胞、HCS2/8細胞
M3 Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
AU 565細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
MDA-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUVEC細胞、Mouse INsulinoma 6細胞、C22 (Clara)細胞
MFHL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal fibroblast-10細胞、KLN205細胞、H-2198細胞
SNU638細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
Mouse Colon 38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC1細胞、SNU-484細胞、MDA-231細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞
JVM-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞
Hi5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JC細胞、SKCO1細胞、CEMx721.174.T2細胞
Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 12細胞、NCI-H810細胞、Hs 578.T細胞
Huh7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs819.T細胞、L-WRN細胞、Mono Mac6細胞
Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
U-2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT 112細胞、OLN93細胞、NS653細胞
Madin Darby Canine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M20 [Human melanoma]細胞、SK-MEL5細胞、TM-4細胞
BV-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞
HT115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-5細胞、SNU5細胞、SKMEL3細胞
HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞
N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
tdott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0813細胞、PC-3M-2B4細胞、U-2932細胞
SAOS 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細胞、SU.86細胞、Toledo細胞
DMS 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SH-SY5Y Parental細胞、Cates-1B細胞、HN6細胞
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
2V6.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
CHO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2細胞、EVSAT細胞、HECCL-1細胞
LM TK negative細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1088細胞、P3J細胞、HR1K細胞
NCIH1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2.35細胞、NCI-H345細胞、NCI-H-295細胞
M2-10B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
NCI-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞
PSN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞
SK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞
EFO-27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-802細胞、NCIH1092細胞、PNT1A細胞
C-32細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞
RPMI 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞
HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
Line 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞
H4 Cell:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
JHH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE354.T細胞、GM03190細胞、WERI-Rb-1細胞
BC-022細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EL-4細胞、COLO 206F細胞、RPMI-7666細胞
MM1S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-1210細胞、FAT細胞、B5537SKIN細胞
RC-4B/C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細胞、BA/F3細胞、SK Mel28細胞
LS180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞
IPEC-J2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NT2細胞、Det. 562細胞、ACC-M細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
HC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞
NCI/ADRRES細胞系相關(guān)產(chǎn)品：118 MG細胞、WiDr/S細胞、ACCM細胞
KM-H2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
ARH77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-9細胞、SNU407細胞、P19細胞
TF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chang liver細胞、TE 354.T細胞、P3X63Ag8細胞
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