"HOS Cell:人骨肉瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
RCK8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1954BL細胞、NCI H929細胞、C3H 10T1/2細胞
PC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lec1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、H2141細胞
RFL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
Roswell Park Memorial Institute 6666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-019細胞、UM2細胞、LU-65M細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HOS Cell:人骨肉瘤細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
COLO 741細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H820細胞、hs 68細胞、LA-795細胞
Medical Research Council cell strain-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH441細胞、T24(ECV304)細胞、H4-II-E-C3細胞
Ect1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH-3T3-L1細胞、H-676B細胞、End1/E6E7細胞
D283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細胞、L 428細胞、BC3H1細胞
A-172 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-827細胞、COLO-824細胞、MEC1細胞
細胞生長特性:貼壁生長
HOS Cell:人骨肉瘤細胞系
細胞復蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:成纖維細胞和上皮細胞的混合樣
A 2780 CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-620細胞、SKNBE-1細胞、NCI-H1838細胞
HeLa229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM-1細胞、CA-46細胞、OCI-Ly 7細胞
PaTu-8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305-C細胞、EBC-1/original細胞、SCC154細胞
CAKI 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI Ly10細胞、MILE SVEN1細胞、RC-4B/C細胞
MA104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ONS-76細胞、MOLM16細胞、HSC1細胞
NCTC 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02.03細胞、HPMEC細胞、S3 HeLa細胞
NUGC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 1細胞、GM05887A細胞、P3/X63/Ag8.653細胞
HOS Cell:人骨肉瘤細胞系
OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
HT144mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435細胞、HPAF細胞、CHL1細胞
HCC1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
Hs746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞
UMNSAH/DF#1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 149細胞、HELF細胞、IEC-18細胞
Cattle chondrocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178YR細胞、S37細胞、P3JHR1細胞
HSKMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞
L6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO 1細胞、DU4475細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞
TYKnu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1915細胞、OVSAHO細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞
Jurkat Clone E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2Z細胞、D-324MED細胞、RIN-m細胞
SCC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1092細胞、NCI-H1694細胞、Colo699細胞
NCI-H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞
PLC/PRF/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞
DMS273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF PAC-1細胞、CC-LP-I細胞、P-815細胞
EFO 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TU 686細胞、Kit-225細胞、JB6 [Mouse]細胞
BA/F3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A-C1細胞、HEP-3B2細胞、MDA-MB468細胞
H-740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UACC 812細胞、H-1436細胞、HNE-2細胞
NCI-841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-2細胞、Rat1細胞、LS180細胞
Centre Antoine Lacassagne-148細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO-81細胞、A2058細胞、AdHek細胞
TYKnu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1915細胞、OVSAHO細胞、Fortner's melanotic melanoma #3細胞
3T3L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATHa細胞、RKOAS451細胞、HCC-2185細胞
H1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP 126細胞、SW579細胞、D-324MED細胞
SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞
769P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AHH1細胞、AU-565細胞、H-1770細胞
LC-1 sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM/C1細胞、NCI-H1618細胞、Bac1 2F5細胞
MNNG-HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞
B16-F10--RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞
SU86-86細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細胞、S3 HeLa細胞、UPCI:SCC090細胞
V-79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-5細胞、H9細胞、SKM1細胞
HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞
Nb-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C666-1細胞、SK MEL 5細胞、CL40細胞
KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞
MB 157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC090細胞、Z-138細胞、Hepatoma 22細胞
H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞
293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
A 253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-212細胞、Caco2BBe細胞、MDA330細胞
AMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Th17細胞、SSP-25細胞、VP303細胞
HNEpC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞
Leukemia 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞
LMH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SAOS 2細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞、NCI-H920細胞
SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞
Hs 294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞
HOS Cell:人骨肉瘤細胞系
PTK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC154細胞、CHP 100細胞、GLRK 13細胞
MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞
LA-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
HN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
RTE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細胞、UACC 893細胞、H-250細胞
NCIH524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
ChaGo-K-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細胞、LS123細胞、CAKI1細胞
P3HR1-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細胞、MCA-205細胞、SK-ES-1細胞
H.Ep. #2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細胞、Hs 739.T細胞、COV-362細胞
TJ905細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HEL-1細胞、SNU-407細胞、Pa017C細胞
HEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞
KYSE0520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-1細胞、HEL-1細胞、Hs281T細胞
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