"HCA7 Cell:人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：結(jié)腸腺癌；女性
RCC23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 929細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞
IALM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS273細(xì)胞、COS7細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞
T-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC 39細(xì)胞、HCC1500細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞
H676B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM T4細(xì)胞、AN3細(xì)胞、ROS1728細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCA7 Cell:人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細(xì)胞，每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細(xì)胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的，他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細(xì)胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細(xì)胞間隙明顯，細(xì)胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低，保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了，如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇；３)將分裝上述細(xì)胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCIH1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jijoye細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞
NS-I/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3J2細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞
16-HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞
Kato-III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 1細(xì)胞、Mel-RM細(xì)胞、ME180細(xì)胞
Swiss 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 19細(xì)胞、624細(xì)胞、HNE2細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
HCA7 Cell:人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞，并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細(xì)胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中，細(xì)胞培增３～６次。細(xì)胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度，即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/１００個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細(xì)胞可達(dá)３～５％；細(xì)胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進(jìn)行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞，如果細(xì)胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細(xì)胞懸液。３.將細(xì)胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細(xì)胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
BAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C28/I2細(xì)胞、H295細(xì)胞、LK2細(xì)胞
NCIH1755細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FET細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞
MDA PCa 2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO357細(xì)胞、NCI-H78細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞
MFM-223細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKLU-1細(xì)胞、KM12-SM細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞
KM-H2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC-1細(xì)胞、CaSki細(xì)胞、KP-2細(xì)胞
ATDC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L23/P細(xì)胞、RGC-6細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞
HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-446細(xì)胞、RL細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞
HCA7 Cell:人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
KLN-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCS細(xì)胞、H1437細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞
TALL-104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mino細(xì)胞、LTEP-sm 1細(xì)胞、HEK-293-EBNA細(xì)胞
PK (15)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM07404D細(xì)胞、Hs-578T細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
NCI-H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2286細(xì)胞、HC11細(xì)胞、FAT細(xì)胞
HS0578T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cells (TK-)細(xì)胞、TK 10細(xì)胞、MGc80-3細(xì)胞
MKN-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM12 SM細(xì)胞、108CC15細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞
ROS1728細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T_T_細(xì)胞、SW962細(xì)胞、SW 954細(xì)胞
Rat 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4IP細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞
Rat 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4IP細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞
YH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞
NCTC clone 1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM 239細(xì)胞
NCI-H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT3細(xì)胞、P 3 HR 1細(xì)胞、CCD 1112SK細(xì)胞
IALM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS273細(xì)胞、COS7細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞
Madison細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RF/6A細(xì)胞、SF 126細(xì)胞、CBRH7919細(xì)胞
OCI-AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JURKAT E-6.1細(xì)胞、HCe-8693細(xì)胞、GM07404A細(xì)胞
OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞
RKO-AS45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞
MRMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOEC細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞、CORL88細(xì)胞
UACC 893細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M2-10B4細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞、293S細(xì)胞
AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞
SK-GT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-10B細(xì)胞、H1963細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞
SK-N-BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB468細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞、OVCAR-432細(xì)胞
OCILY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞
A-2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2細(xì)胞、SCL-2細(xì)胞、BALL1細(xì)胞
BE(2)M17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mhh-Call 2細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞
Hce8693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細(xì)胞、ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞
NCI-H2171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3細(xì)胞、Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、RCK8細(xì)胞
T47D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR-42J細(xì)胞、Hs895T細(xì)胞、Hs888T細(xì)胞
HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：F98細(xì)胞、H-1734細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞
RK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCLP1細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞、H-2444細(xì)胞
McA-RH 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H157細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞
Saos2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK21細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞、RH-30細(xì)胞
PANC0203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞
CCD-841CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fao細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞、UPCI-SCC-090細(xì)胞
DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞
Sf-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KAT5細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞、PC10細(xì)胞
KY70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞、SNU398細(xì)胞、Malme-3M細(xì)胞
PTK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞
HEI-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNSC細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞
AU 565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det 562細(xì)胞、OCM1細(xì)胞、WC00097細(xì)胞
Tn-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97H細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞、16-HBE細(xì)胞
P388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞
HCA7 Cell:人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
THLE-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞、NPC-TW039細(xì)胞
IAR20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1222細(xì)胞、WIL2-S細(xì)胞、NCIH1573細(xì)胞
H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD-4細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞
GB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DLD-1細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞
NS-1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H661細(xì)胞、Tb1Lu細(xì)胞、OUMS27細(xì)胞
H-524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細(xì)胞、FC33細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞
16-HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MN60細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞
LAPC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA Dx5細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞、B95.8細(xì)胞
C 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-L1細(xì)胞、NT2D1細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞
UM-UC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細(xì)胞、A704細(xì)胞、AN3CA細(xì)胞
NCI-HUT-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞
Ramos細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL51細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞、NCI-SNU-182細(xì)胞
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