"Clone M-3 Cell:小鼠黑色素瘤細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:黑色素瘤;雄性;DBA CEMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1395細胞、MADB 106細胞、NUGC-3細胞 KU-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細胞、2008細胞、NKT細胞 Granta519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細胞、Balb/c 3T3細胞、Ishikawa細胞 NEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U14細胞、H1355細胞、Clone M-3細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 Clone M-3 Cell:小鼠黑色素瘤細胞系 細胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管之爆裂;細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應(yīng),造成細胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活;培養(yǎng)細胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10%CO2;當培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞 RAMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H920細胞、DHL-6細胞、A3細胞 OVCAR8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC4細胞、SKRC-39細胞、Panc4.03細胞 HCC94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞 HEI193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD1細胞、138MG細胞、UMNSAH/DF-1細胞 細胞生長特性:貼壁 Clone M-3 Cell:小鼠黑色素瘤細胞系 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 MKN-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY-5Y細胞、HPB/ALL細胞、MCF-7細胞 CCD 841 CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞 AR4-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、HNEpC細胞、HS0578T細胞 MB39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Ardle 7777細胞、JROECL 19細胞、NIH-3T3-L1細胞 SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞 SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞 H-2444細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細胞、PA-1細胞、NCI-H1341細胞 Clone M-3 Cell:小鼠黑色素瘤細胞系 B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLTC-1細胞、HT 29細胞、OVCAR-3細胞 AML-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 299細胞、H1672細胞、CEF細胞 SKNBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細胞、L-132細胞、H-446細胞 MDA-MB-435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細胞、3T3 L1細胞、HEK 293FT細胞 IBMF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞 Kuramochi細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-4細胞、OP9細胞、SNU-C1細胞 OVCAR-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞 TC-1[JHU-1]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML5細胞、BEL/FU細胞、MLA 144細胞 MCF.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞 MCF.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP1細胞、HCEC細胞、AGS細胞 Walker256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1993細胞、kms 11細胞、624mel細胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞 Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞 MKN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK2細胞、KLN-205細胞、Ly3細胞 SKMEL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細胞、SW1353細胞、GM04679細胞 GM02131細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞 V79-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞 KTCTL140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞 BpRc1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME1細胞、H1048細胞、IM-9細胞 22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞 CCD-841-CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞 McA-RH 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞 MDAMB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞 Tb 1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.10A細胞、BEL 7402細胞、NHRF細胞 SK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞 ECC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞 GC9811-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞 NCI-H78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK LU 1細胞、PK-136細胞、HEL-1細胞 NCIH2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-48細胞、MFE296細胞、KOPN8細胞 UM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1 (NBL-3)細胞、MDA-MB-435S細胞、Molm 14細胞 SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞 NPC-TW01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pfeiffer細胞、H1770細胞、C57/B6-L細胞 NT2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞 HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞 HEK-293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6細胞、FTC-133細胞、COLO 320DM細胞 ATN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR 10細胞、GM-215細胞、H-727細胞 NEC-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞 TM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRCEC細胞、NS653細胞、HSC-1細胞 HDLM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞 NCI-H102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞 RMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-I細胞、LC-1-sq細胞、HuT102細胞 HS-294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HF-91細胞、Hep 2細胞、LIXC002細胞 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC3細胞、CCD 841 CoN細胞、NCI-H841細胞 Clone M-3 Cell:小鼠黑色素瘤細胞系 NCI-H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA433細胞、MES-SA Dx5細胞、OsACL細胞 HS940細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_02_03細胞、Anip-973細胞、A-9細胞 HeLa/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細胞、KATO 3細胞、L-6 myoblast細胞 MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞 C3H 10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA 46細胞、H2126細胞、HCC44細胞 OCILY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞 WEHI3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs294T細胞、RPMI-7951細胞、SGC7901/DDP細胞 NCIH2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞 SMA560細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225 K6細胞、CEM/0細胞、PECAPJ34細胞 LC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAa細胞、EA. hy 926細胞、AN3 CA細胞 COV-434細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1376細胞、PNT-1A細胞、B16BL6細胞 TR 146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1222細胞、OVCA433細胞、SAS細胞 "
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