"Clone M-3 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
細胞背景資料:黑色素瘤;雄性;DBA
細胞形態(tài):上皮細胞樣
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
A-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD 2細胞、IOSE 29細胞、ETCC-007細胞
FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞
GM03320D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞
細胞生長:貼壁
Clone M-3 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
P-815細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細胞、Human fetal lung fibroblast 1細胞、Panc-327細胞
MSTO-211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-748細胞、Bx-PC3細胞、ECGI10細胞
H-1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
B16-F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Clone M-3 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
細胞生長特性:貼壁
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
P3X63 AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C33細胞、P-2003細胞、PANC-10-05細胞
NCI-SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細胞、CCRF-CEM C7細胞、COR L279細胞
TE-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-79細胞、MCF/Adr細胞、ECC10細胞
Mahlavu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/0-Ag14細胞、MB468細胞、HO-1-N-1細胞
H-1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞
BT 325細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞
Y3-Ag 1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞
HCT-FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
MA 104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHHA-1細胞、NCIH1876細胞、NCI-H1568細胞
NRK 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
Clone M-3 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
CATH-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M210B4細胞、HCFB(HCF)細胞、Hs-688A-T細胞
MNNGHOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC1細胞、V 79細胞、H28細胞
MCF-7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-Ca.256細胞、KASUMI1細胞、EJ 138細胞
Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞
TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞
HFSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:526-mel細胞、C4-I細胞、TE15細胞
Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
Murine Carcinoma-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-739細胞、95-D細胞、87MG細胞
NCI-H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-SH細胞、OCILY-3細胞、BC-027細胞
SUM-159細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1341細胞、HS5細胞、JurkatE6-1細胞
WEHI 164 TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞
Merwin Plasma Cell tumor-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAI細胞、SUM 190細胞、MCF12A細胞
HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
COLO-741細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF2細胞、Swiss/3T3細胞、MDA-435細胞
H-378細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞
U-251 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-EOL-1細胞、AMO1細胞、PC615.3細胞
NOR 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan1細胞、CTX TNA2細胞、Hut292細胞
LNCaP-Clone-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1954細胞、3T6 Swiss Albino細胞、Tj-905細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
SKES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞
OVCA432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 19-19細胞、REC-1細胞、H-838細胞
UPCI-SCC-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML4細胞、SU-DHL-10細胞、HCCC-9810細胞
Hs 294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 clone D1細胞、OVCAR.5細胞、CHL細胞
Huh 7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞
OVCAR8/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4 Ig-24細胞、RBL-2H3細胞、LN229細胞
Rat Lung-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-07e細胞、OCI Ly3細胞、Mv.1.Lu細胞
GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
HPAFII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-1細胞、SKG-3a細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞
T98G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
H-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
HR-8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV(4;11)細胞、NCI-H441細胞、PLC/PRF5細胞
NCI-SNU-475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-02-03細胞、Madison細胞、BHP-10細胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞
U-138-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-2細胞、HNSC細胞、RIN-m5F細胞
A-204細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 205細胞、P31/FUJ細胞、NCI H345細胞
OCI AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 839細胞、MOLP-8細胞、OVISE細胞
M1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VM-CUB-1細胞、COLO-320細胞、MDA-MB-435S細胞
KYSE-150細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJA-B細胞、74Int細胞、Ly1細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細胞、T-HEECs細胞、SV40-MES13細胞
HRCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu3細胞、McArdle RH-7777細胞、OCI-Ly 10細胞
P31/FUJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNUC2A細胞、NFS-60細胞、MIA-Pa-Ca-2細胞
EAhy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞
NCI-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
HCC-1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159PT細胞、NIH:OVCAR-4細胞、Karpas-299細胞
SK HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-H細胞、HTR8細胞、HTori 3細胞
293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMC-1細胞、HEK (AD293)細胞、MSB-1細胞
L-WRN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞
143BTK-細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9細胞、NCIH1770細胞、HCEC細胞
G361-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM-5細胞、TK-1細胞、REC 1細胞
CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUTU80細胞、HEL-92-1-7細胞、NCI-N87細胞
Clone M-3 epithelioid cells小鼠黑色素瘤細胞系
HSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB435S細胞、AC29細胞、D407 RPE細胞
Tu 177細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-4細胞、H-295細胞、HRCEC細胞
U-266細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA.hy 926細胞、FM88細胞、HEL-92.1.7細胞
TE-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-79細胞、LIPF155C細胞、UCH-1細胞
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