"KYSE-450 Cell:人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
GBC-SD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Alexander細(xì)胞、Hx-147細(xì)胞、PL5細(xì)胞
Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：8305C_1細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞、MC116細(xì)胞
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
MDA231-LM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H716細(xì)胞、MA-782細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
KYSE-450 Cell:人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié)：其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了，說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi)）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái)，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過(guò)２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個(gè)細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤(rùn)洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開(kāi)；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
mRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-14細(xì)胞、MES13細(xì)胞、LL2細(xì)胞
BE(2)M-17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 AG8-653細(xì)胞、GM00637B細(xì)胞、50.B1細(xì)胞
A2058細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-480細(xì)胞、AMC-HN8細(xì)胞、A7r5細(xì)胞
253J-Bladder-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA 4細(xì)胞、KMST-6細(xì)胞、PAI細(xì)胞
COLO 738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 98 G細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞、P560細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
KYSE-450 Cell:人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
MDAPC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細(xì)胞、H2106細(xì)胞、SF539細(xì)胞
MFE 296細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK UT 1細(xì)胞、RPMI-7666細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞
BIU87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2591細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞
BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVHUC細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞、H-1573細(xì)胞
U-87MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341Med細(xì)胞、B16/BL6細(xì)胞、TT細(xì)胞
NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞
SW-480細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H78細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞
KYSE-450 Cell:人食管癌細(xì)胞系
Bovine Turbinate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MARC-145細(xì)胞、TCC-PAN2細(xì)胞、RPMI-1846細(xì)胞
LK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MZ-CRC-1細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞、J774 A1細(xì)胞
Reuber H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：STO細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞、PL 5細(xì)胞
FL62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-SG231細(xì)胞、SNU-601細(xì)胞、SNU-668細(xì)胞
SRA 01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN4細(xì)胞、CEM-0細(xì)胞、MC38細(xì)胞
Swiss 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JROECL 19細(xì)胞、624細(xì)胞、HNE2細(xì)胞
DMS273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CF PAC-1細(xì)胞、CC-LP-I細(xì)胞、P-815細(xì)胞
AR4-IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：S3 HeLa細(xì)胞、Scott and White No. 13細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞
C-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST81細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞
C-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EST81細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞
A-875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-433細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞
CMT64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN382細(xì)胞、Ramos(RA1)細(xì)胞、LMH細(xì)胞
MDAMB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-V細(xì)胞、H-596細(xì)胞、no-11細(xì)胞
CCD-33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細(xì)胞、SKNEP-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞
C81-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB 6細(xì)胞、Hs 445細(xì)胞、Panc8.13細(xì)胞
J82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y1細(xì)胞、SW-480細(xì)胞、CAKI 1細(xì)胞
MMVECs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE 280細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞
SK Mel 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞、GH3細(xì)胞
SKML-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.CL25細(xì)胞、TE32細(xì)胞、PG13細(xì)胞
SF-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSMC細(xì)胞、SUM-149PT細(xì)胞、Ly8細(xì)胞
COLO 684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-620細(xì)胞、AtT-20細(xì)胞、SKMEL2細(xì)胞
C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞
NCI-H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC-5細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞、KPL4細(xì)胞
LNT-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1435細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞、C-33A細(xì)胞
Ball 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM-H2細(xì)胞、HMEC1細(xì)胞、GM03569B細(xì)胞
NCIH1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞
UCLA-SO-M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞
BC-3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H766T細(xì)胞、BALB/3T3 (clone A31)細(xì)胞、MCA 205細(xì)胞
F-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC細(xì)胞、WM266細(xì)胞、X63細(xì)胞
HA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS/MNNG細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞
HEC1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK 2細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞、OE-21細(xì)胞
Fao細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI #8226細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞
OE19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-10.05細(xì)胞、BT 20細(xì)胞、DH82細(xì)胞
MUVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-25細(xì)胞、MOLT-3細(xì)胞、SNB19細(xì)胞
MRC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞
LC-2/ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-85 clone 5細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞、AG 9細(xì)胞
TE10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79-4細(xì)胞、GM12878細(xì)胞、MPC5細(xì)胞
LC-1Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2172細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞
RPMI8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-33 A細(xì)胞、MDCC MSB1細(xì)胞、Rat 1細(xì)胞
NCI H929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 159細(xì)胞、J82COT細(xì)胞、CCRF-CEM細(xì)胞
NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac6細(xì)胞、WERI細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞
VeroC1008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、CEMO-1細(xì)胞、EST81細(xì)胞
A-427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D407細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、SL-1細(xì)胞
KYSE-450 Cell:人食管癌細(xì)胞系
Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-28細(xì)胞、Pa18C細(xì)胞、Molm14細(xì)胞
UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞
Colon26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ABE­8.1/2細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞、BCECs細(xì)胞
Tn5 B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL51細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞、B-3細(xì)胞
CWR22-Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、Hs822T細(xì)胞、Panc203細(xì)胞
MV-4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞
H-1417細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFPAC1細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞
FRhK-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC-18細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞
NPC-TW 039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞、CAL51細(xì)胞
SupB15W細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU387細(xì)胞、EOMA細(xì)胞、COLO-16細(xì)胞
C4-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-024細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞
XWLC-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1770細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞
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