"MDA-MB-468 Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞是1977年由CailleauR等從一位患有轉(zhuǎn)移性乳腺癌的51歲黑人女性的胸腔積液中分離得到的。雖然供體組織的G6PD等位基因雜合,但此細(xì)胞株始終表現(xiàn)為G6PDA表型。P53基因273位密碼子存在G→A突變,從而導(dǎo)致Arg→His替代。每個(gè)細(xì)胞上存在1×106個(gè)EGF受體。 JB6 [Mouse]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細(xì)胞、CL1-5細(xì)胞、ST-2細(xì)胞 SUSM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞、MKN45細(xì)胞 SuDHL 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSKMC細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞 CCRF-CEM/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc05.04細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞、MLOY4細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 MDA-MB-468 Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長(zhǎng)之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級(jí)和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級(jí),必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20°C不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時(shí),細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代;2-3天換液1次 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 OVCA432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 19-19細(xì)胞、REC-1細(xì)胞、H-838細(xì)胞 MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞 CW2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-2細(xì)胞、MJ細(xì)胞、HS 683T細(xì)胞 SHI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAG細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞 NB9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM451細(xì)胞、A-9細(xì)胞、MPC11細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) MDA-MB-468 Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 SW-982細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LADMAC細(xì)胞、C4I細(xì)胞、YD-38細(xì)胞 Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2087細(xì)胞、DHBE細(xì)胞、H520細(xì)胞 SN12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H727細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞、TJ905細(xì)胞 HSC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMC細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞、SK-N-BE細(xì)胞 Hs839T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG ATCC細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞 MDA-kb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-699細(xì)胞、ketr 3細(xì)胞、P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞 SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞 MDA-MB-468 Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 LA-4 [Mouse lung adenoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2347細(xì)胞、DSL-6A-C1細(xì)胞、RIMEC細(xì)胞 N2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP89細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、SNU16細(xì)胞 HeLa/S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞 KS-SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-668細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞 HT(H9)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat E6-1細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞、CG-4細(xì)胞 NCI-H1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A3細(xì)胞、Strain V細(xì)胞、B16細(xì)胞 Hs695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、COLO320/DM細(xì)胞、SUPM2細(xì)胞 MFHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal fibroblast-10細(xì)胞、KLN205細(xì)胞、H-2198細(xì)胞 DMS-53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDEC細(xì)胞、Hs 695.T細(xì)胞、HL-7702細(xì)胞 NALM-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCCJF細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞 HeLa229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-BM-1細(xì)胞、CA-46細(xì)胞、OCI-Ly 7細(xì)胞 293F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1876細(xì)胞、T_T_細(xì)胞、MV4;11細(xì)胞 OCI Ly10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-1細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞、A2780-CP細(xì)胞 A9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1688細(xì)胞、H-1573細(xì)胞、A-10細(xì)胞 NW-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag1.2.3細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞、Mevo細(xì)胞 RS4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1688細(xì)胞、H-292細(xì)胞、C-643細(xì)胞 C8-D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN9D細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞 CAL-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-Bladder-V細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞 CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞 NCI-H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGIIIA細(xì)胞、HuH28細(xì)胞、TK.10細(xì)胞 OCM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-173細(xì)胞、GM03320D細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞 SW 1116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM239A細(xì)胞、PF382細(xì)胞、MCF-12A細(xì)胞 HGF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAN 02細(xì)胞、SNU-869細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞 MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞 U266BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HP615細(xì)胞、RMG1細(xì)胞、NOZ細(xì)胞 P3X63Ag8653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A704細(xì)胞、CHO cell clone K1細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞 MV 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB361細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞 SKNBE(1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WERI-Rb 1細(xì)胞、HCC-1588細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞 Saos2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHK21細(xì)胞、CL MC/9細(xì)胞、RH-30細(xì)胞 SU-DHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KTA7細(xì)胞、KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、Rainbow Trout Embryo細(xì)胞 SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞 MNNG/HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2195細(xì)胞、Hs-852-T細(xì)胞、OCI-LY-3細(xì)胞 A-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAD 2細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞、ETCC-007細(xì)胞 Hs 742.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High5細(xì)胞、H-1435細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞 639V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695T細(xì)胞、OPM2細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞 EOL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2126細(xì)胞、NCI-SNU-475細(xì)胞、CMT.64細(xì)胞 SU-DHL-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CII細(xì)胞、HMrSV5細(xì)胞、MCA38細(xì)胞 RBL.2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞、GM346細(xì)胞 SU-DHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT78細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞 Tb1.Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA47細(xì)胞、H-1869細(xì)胞、L363細(xì)胞 HTR8svn細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9204細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞、HT-144細(xì)胞 CRFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCC-PAN2細(xì)胞、JVM3細(xì)胞、NCI.H522細(xì)胞 OCILY3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞 MDA-MB-468 Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞 BEP2D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT102細(xì)胞、HFL-I細(xì)胞、LS-1034細(xì)胞 H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞 H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細(xì)胞、OEC19細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞 P-815細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞 NIH 3T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CP70細(xì)胞、H1373細(xì)胞、SKNBE(2c)細(xì)胞 TF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1-RGB細(xì)胞、SHEP1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞 Chang Cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z138細(xì)胞、G-361細(xì)胞、KYSE450細(xì)胞 639V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695T細(xì)胞、OPM2細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞 H-889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞 QBC939細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA-19細(xì)胞、TE9細(xì)胞、C518細(xì)胞 Hs-578-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2196細(xì)胞、SNU-398細(xì)胞、Walker-256細(xì)胞 "
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