"BT-549 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞1978年由W.G.Coutinho和E.Y.Lasfargues建系,源自一位72歲患有乳腺導(dǎo)管癌的白人女性,來(lái)源組織包括乳頭及浸潤(rùn)導(dǎo)管。該細(xì)胞形態(tài)包括上皮樣細(xì)胞及多核巨細(xì)胞,可分泌一種粘性物質(zhì)。 SK-N-MC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-02細(xì)胞、TE354T細(xì)胞、MDA-MB231細(xì)胞 VK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L26細(xì)胞、H2170細(xì)胞、H2171細(xì)胞 Line 207細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1806細(xì)胞、BC-022細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞 U87-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1385細(xì)胞、C3H10T1-2細(xì)胞、C33-A細(xì)胞 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 BT-549 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 細(xì)胞凍存基本方法:1.細(xì)胞:選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次。2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。4.分裝:分裝入無(wú)菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。5.封口:用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見(jiàn),把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時(shí)因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細(xì)胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 U-226AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1417細(xì)胞、U-937細(xì)胞、WML2細(xì)胞 KPL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-940-T細(xì)胞、C2BBe1細(xì)胞、MV 3細(xì)胞 TM-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAC-P4C細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞、CCD966SK細(xì)胞 Hs281T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBdSMC細(xì)胞、T9細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞 293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-34細(xì)胞、LC1sq細(xì)胞、RBL-2H3細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) BT-549 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 SN12-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、108CC15細(xì)胞 CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2405細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞 EFO27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細(xì)胞、H1417細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞 CCD-841-CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF (CF-1)細(xì)胞、LS513細(xì)胞、HCoEpiC細(xì)胞 H1876細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv-1細(xì)胞、Mo7e細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞 hEEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa017C細(xì)胞、A-2780細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞 Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87細(xì)胞、SNU761細(xì)胞、3396細(xì)胞 BT-549 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞 NCI-H292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FC33細(xì)胞、GM04671細(xì)胞、Eca-109細(xì)胞 SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞、TE-1細(xì)胞 NE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:159 PT細(xì)胞、MGC803細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞 RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞 MNNG/HOS Clone F-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJSA1細(xì)胞、DHL-16細(xì)胞、GM02131A細(xì)胞 VM-CUB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-483細(xì)胞、SF-126細(xì)胞、AU565細(xì)胞 Okayama University Medical School-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EHEB細(xì)胞、HT 1080.T細(xì)胞、2008細(xì)胞 U-2 OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞、MMQ細(xì)胞 U-2 OS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細(xì)胞、HSAS3細(xì)胞、MMQ細(xì)胞 U-87MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞 SW-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L51細(xì)胞、CHO/dhFr-細(xì)胞、SW1088細(xì)胞 PANC0203細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-BR3細(xì)胞、SNU423細(xì)胞、HeLa 229細(xì)胞 SG231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2細(xì)胞、32Dc3細(xì)胞、MRMT-1細(xì)胞 CORL88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1819細(xì)胞、Vx2細(xì)胞、MESSA/Dx5細(xì)胞 CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞 Hs839T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87MG ATCC細(xì)胞、PANC0203細(xì)胞、SK-Hep1細(xì)胞 SKMEL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H146細(xì)胞、NCI-ADR-RES細(xì)胞、COV434細(xì)胞 HCC366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-363細(xì)胞、KYSE70細(xì)胞、GM00637H細(xì)胞 LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞 HM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1143細(xì)胞、P388D1細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞 THC-8307細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞 PVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-5178-Y細(xì)胞、MDAMB453細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞 HPMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-mock細(xì)胞、GEO細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞 CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞 H-196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC941122細(xì)胞、NCIH510細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞 LA-N-6(OAN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel RM細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞 H-1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞、293A細(xì)胞 ES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-2細(xì)胞、GMK,BSC-1細(xì)胞、TOV-112細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞 HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACT-1細(xì)胞、GM02219C細(xì)胞、MIHA細(xì)胞 CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞 PANC.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293T/17細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、SCC 9細(xì)胞 AN3 CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV-2細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞、COLO 679細(xì)胞 COLO206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC7細(xì)胞、INS1細(xì)胞、MonoMac6細(xì)胞 MM1-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383細(xì)胞、L-M (TK-)細(xì)胞、UMRC2細(xì)胞 OK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag123細(xì)胞、C-8161細(xì)胞、KU 812細(xì)胞 H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞 SNU-423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、CTLA4 Ig-24細(xì)胞 Human Fetal Thymocyte-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1569細(xì)胞、H-69細(xì)胞、KATO III細(xì)胞 MIN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC090細(xì)胞、DCS細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞 RPMI 2650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT細(xì)胞、HuLEC-5a細(xì)胞、H-735細(xì)胞 OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞 BT-549 Cell:人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞系 EoL-1 cell細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746-T細(xì)胞、NGP細(xì)胞、143BTK-細(xì)胞 CCK-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H6c7細(xì)胞、MA-c細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞 KYSE 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S3細(xì)胞、HM1900細(xì)胞、Huh7.5.1細(xì)胞 ECC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、GM-3573細(xì)胞、DKMG細(xì)胞 Mo7e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2196細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞 1.1B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-18細(xì)胞、GM637A細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞 P3-X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H250細(xì)胞、JKT1細(xì)胞、SJSA細(xì)胞 HMCB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞 JM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H929細(xì)胞、Pro-5WgaRI3C細(xì)胞、GM03190A細(xì)胞 RT4-D6P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞、QSG-7701細(xì)胞 H-345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79細(xì)胞、X63.Ag8.653細(xì)胞、MDA-PCa-2b細(xì)胞 K 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞、Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞、SNU16細(xì)胞 "
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