"HaCaT Cell:人永生化表皮細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：該細胞源自一位６２歲患有黑色素瘤男性的病灶外圍正常皮膚，角蛋白、角化細胞交聯(lián)外膜蛋白、中間絲相關蛋白陽性。
JF305細胞系相關產(chǎn)品：HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞
MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞系相關產(chǎn)品：Ketr-3細胞、HAPI細胞、C-6細胞
L23/P細胞系相關產(chǎn)品：ETCC007細胞、Mink細胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞
NUGC-2細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HaCaT Cell:人永生化表皮細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。１.不同的細胞，喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同，還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。２.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入３ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培養(yǎng)基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞我們只吹打，不消化的）；其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。１０分鐘觀察一次，２０分鐘，３０分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入３ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意，結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。３.關于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。（可能也是競爭很大，有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。）對于生長速度快的細胞，易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。４.關于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞，在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài)，比玻璃瓶會好，對于生長速度慢的細胞，玻璃瓶則會更好。同樣，對于同一種細胞，在其生長速度慢的時候，會好一點，比如剛剛復蘇的時候，或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候，玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：３—１：６傳代，每周換液２—３次
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MLA-144細胞系相關產(chǎn)品：H-1963細胞、WEHI 231細胞、P3X63Ag8653細胞
TALL-104細胞系相關產(chǎn)品：Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
MDA-MB-330細胞系相關產(chǎn)品：U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞
L929細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1792細胞、HuCC-T1細胞、293 EBNA細胞
686LN-M4e細胞系相關產(chǎn)品：HSC-2細胞、Dx5細胞、786-O RCC細胞
細胞生長特性：貼壁生長
HaCaT Cell:人永生化表皮細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
K7M2細胞系相關產(chǎn)品：GM03569D細胞、Pro-Lec1.3C細胞、NCI-H1092細胞
MCAEC細胞系相關產(chǎn)品：GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
SCCVII細胞系相關產(chǎn)品：U-373MG ATCC細胞、Vx-2細胞、SiHa細胞
LC-1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1836細胞、JB6 clone 30, subclone 7b細胞、CO115細胞
CMT64細胞系相關產(chǎn)品：LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
HPMC細胞系相關產(chǎn)品：FF-WT-BJ細胞、HEL-92_1_7細胞、RFL6細胞
HCC78細胞系相關產(chǎn)品：SK-N-SH細胞、SK-MEL2細胞、SW-837細胞
HaCaT Cell:人永生化表皮細胞系
OUMS27細胞系相關產(chǎn)品：Tu-177細胞、SK-GT-2細胞、Panc_02_03細胞
SHP-77細胞系相關產(chǎn)品：NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞
HCT-15細胞系相關產(chǎn)品：HEK293E細胞、J-82細胞、U373 MG細胞
BrCL18細胞系相關產(chǎn)品：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞
COLO 320HSR細胞系相關產(chǎn)品：A 72細胞、OV90細胞、HHL-5細胞
HPAF-2細胞系相關產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
P3/NS1/1-Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品：H2444細胞、IR 983F細胞、LC1細胞
KU812-F細胞系相關產(chǎn)品：639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞
X63Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
X63Ag8-653細胞系相關產(chǎn)品：HCMEC(BL12-H)細胞、HCCLM3細胞、GNM細胞
HN6細胞系相關產(chǎn)品：HPB-ALL細胞、NOZ細胞、MOPC細胞
H-35 Reuber細胞系相關產(chǎn)品：COLO 394細胞、SHSY5Y細胞、HCC1569細胞
CC-LP-1細胞系相關產(chǎn)品：HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞
SUDHL-4細胞系相關產(chǎn)品：NCI H345細胞、NW-MEL-38細胞、H-676B細胞
DU-4475細胞系相關產(chǎn)品：HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞
T-T細胞系相關產(chǎn)品：CWR22-Rv1細胞、32D clone3細胞、SBC-5細胞
NCIH1563細胞系相關產(chǎn)品：GM03570E細胞、COLO-738細胞、TOV112D細胞
DHL4細胞系相關產(chǎn)品：IALM細胞、CALU 1細胞、GDM1細胞
IGR-OV1細胞系相關產(chǎn)品：H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
ETCC-007細胞系相關產(chǎn)品：HEL-92-1-7細胞、UT-7細胞、HCC1187細胞
NCI-H1688細胞系相關產(chǎn)品：MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞
NCIH1092細胞系相關產(chǎn)品：RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞
NCI-H1666細胞系相關產(chǎn)品：Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞
Ra No. 1細胞系相關產(chǎn)品：Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞
RSC-96細胞系相關產(chǎn)品：SKRC-52細胞、769-P細胞、SUM 52PE細胞
H-146細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1359細胞、H64細胞、KALS1細胞
Sp2/0-Ag14細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL5細胞、OCI-Ly 8細胞、CEMO-1細胞
SNU-878細胞系相關產(chǎn)品：HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
SW48細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
Clone 15 HL-60細胞系相關產(chǎn)品：Hs-578Bst細胞、CW-2細胞、KU-19-19細胞
SN-12C細胞系相關產(chǎn)品：BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞
MN 60細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H719細胞、639-V細胞、MZCRC1細胞
NB.4細胞系相關產(chǎn)品：FHL 124細胞、OV-90細胞、FDCP1細胞
HPBALL細胞系相關產(chǎn)品：HBL100細胞、FDCP1細胞、3T3-F442A細胞
GA-10-Clone-4細胞系相關產(chǎn)品：MGH-U3細胞、NCIH2135細胞、SKLMS-1細胞
TYK-nu細胞系相關產(chǎn)品：SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
HOP 92細胞系相關產(chǎn)品：WiDr/S細胞、624mel細胞、DI-TNC1細胞
HL7702細胞系相關產(chǎn)品：HPAFII細胞、MCAEC細胞、H-1373細胞
SNU-119細胞系相關產(chǎn)品：HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞
Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關產(chǎn)品：293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞
NCIH2172細胞系相關產(chǎn)品：MCA-205細胞、KY-50細胞、HBMEC細胞
H82sclc細胞系相關產(chǎn)品：Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
MC26細胞系相關產(chǎn)品：Hs-274-T細胞、TW 01細胞、HC-11細胞
HaCaT Cell:人永生化表皮細胞系
SW-900細胞系相關產(chǎn)品：HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞
HEK-AD293細胞系相關產(chǎn)品：KASUMI1細胞、ROS1728細胞、LA-N-5細胞
HONE1細胞系相關產(chǎn)品：T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞
MKN-1細胞系相關產(chǎn)品：SNB-19細胞、SUM-159-PT細胞、HDLM-2細胞
OCI/AML-4細胞系相關產(chǎn)品：IGR.OV1細胞、PTK 2細胞、COLO 16細胞
EOL1細胞系相關產(chǎn)品：H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞
SF-126細胞系相關產(chǎn)品：HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞系相關產(chǎn)品：QSG7701細胞、HOP62細胞、THPI細胞
B16 melanoma F10細胞系相關產(chǎn)品：NCIH69細胞、OKT3細胞、EFO-27細胞
CLONE M3細胞系相關產(chǎn)品：P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞
MFM-223細胞系相關產(chǎn)品：SKLU-1細胞、KM12-SM細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞
bEnd3細胞系相關產(chǎn)品：OCI-LY-7細胞、H1792細胞、Hs729細胞
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