"EJ Cell:人膀胱癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 RPMI-1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1693細胞、LK2細胞、SCC-1395細胞 TE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH/DF#1細胞、Rat podocyte細胞、OCI-Ly 1細胞 HCT-GEO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 126細胞、H460細胞、NALM6細胞 COR-L51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C26細胞、MC/9細胞、LM8細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 EJ Cell:人膀胱癌細胞系 細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2傳代 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 BMU-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco 2細胞、NCI-H1781細胞、SW 982細胞 RC-4B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-14B細胞、MDA468細胞、MonoMac1細胞 NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞 McA-RH 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞 H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞 細胞生長特性:貼壁生長 EJ Cell:人膀胱癌細胞系 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 L 132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、MES-13細胞、H1694細胞 SN12C-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-5細胞、SK-N-FI細胞、Strain KB細胞 H-2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細胞、Hs-729-T細胞、WC00079細胞 H841細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 F1細胞、MonoMac1細胞、TE-671細胞 Panc-1-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H460細胞、GM03570E細胞、PLA801-95D細胞 MKN 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCAEC細胞、COR-L279細胞、JEG-3細胞 H295R-S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU565細胞、AN3-CA細胞、HEK-2細胞 EJ Cell:人膀胱癌細胞系 R.K.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞 A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞 UM-UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞 ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞 Tj-905細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞 RCC10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC4細胞、H2108細胞、P116細胞 Roswell Park Memorial Institute 7951細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細胞、SKN-AS細胞、A-375.S2細胞 KMS-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞 PLA-801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞 PLA-801D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP1細胞、PMVEC細胞、NCIH64細胞 MDA-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJ-RH30細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、NCIH820細胞 DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞 Rat Chondrosarcoma Swarm細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL1細胞、HEK-293A細胞、MES 23.5細胞 COLO679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞 TGBC11T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 205細胞、CLONE M3細胞、CMT167細胞 P3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW48細胞、P3-x63-Ag8 653細胞、CHOK1細胞 OCI/AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞 NCI-H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gerner 7666細胞、HS-68細胞、B35細胞 PG-4 (S+L-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SB細胞、MCF7細胞、COC1/CDDP細胞 RCC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549細胞、KPL1細胞、COLO 320 HSR細胞 WM 266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞 Madin-Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2細胞、WM 239-A細胞、U-266 AR1細胞 TALL-104細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞 HuH6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel526細胞、LC1細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞 T_T_細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BN-CL2細胞、NCIH82細胞、LP1細胞 MIN6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1568細胞、10RGB細胞、LS 123細胞 SW 403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞 SKOV-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 3細胞、MADB-106細胞、G-292細胞 MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞 293 F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞 ME180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞 HCAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH522細胞、H.Ep.-2細胞、PLC細胞 QBC-939細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞 Pt-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0070細胞、Kasumi-6細胞、NCI-H1373細胞 GM02132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-620細胞、VMM5A細胞、A549ATCC細胞 HOSEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Toledo細胞、Hs-27細胞、P-36細胞 TF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang liver細胞、Alexander cells細胞、hTERT RPE1細胞 TKB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip[973]細胞、GM05862細胞、NCI-H1694細胞 HS852.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-299細胞、NCIH1915細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞 NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞 OCILY-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEB3細胞、SUM149細胞、CV-1細胞 M20 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞 HSAS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ-34細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞、HUTU80細胞 EJ Cell:人膀胱癌細胞系 HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3M細胞、HPAF2細胞、MLM細胞 JurkatE6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞 Hs746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC1細胞、TE-6細胞、U-87細胞 Nakata-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2172細胞、JVM-2細胞、NCIADRRES細胞 P3-X63-Ag8-6-5-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN-3細胞、CT26細胞、HEK293-EBNA1細胞 Lung cancer-1/squamous細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-3細胞、QBC-939細胞、H220細胞 H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM細胞、C32 [Human melanoma]細胞、NCIH526細胞 SNU-182細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-104細胞、Hep 3B細胞、MDA-MB-175細胞 Rat Fetal Lung-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 [Mouse]細胞、HUV-EC-C細胞、SK-MEL-2細胞 HCC1806細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA420細胞、GM03569細胞、COV-434細胞 Ly18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞 TC-1 [Mouse lung]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274細胞、Panc08.13細胞、DMS 153細胞 "
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