"NCI-H292 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 KASUMI6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1435細(xì)胞、OCI/AML-3細(xì)胞、RMG1細(xì)胞 NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞 HT-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D.3細(xì)胞、HSMC細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞 TCCPAN2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC細(xì)胞、QGP-1細(xì)胞、OP9細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 NCI-H292 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂;細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活;培養(yǎng)細(xì)胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:3-1:8傳代;2-3天換液1次。 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87 MG細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞 SW 837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2122細(xì)胞、NCM-460細(xì)胞、Kasumi-1細(xì)胞 EVSA/T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細(xì)胞、NCI-H196細(xì)胞、A9細(xì)胞 TO175T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT167細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞 H-1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 Secreting細(xì)胞、H125細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 NCI-H292 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱唵?,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個事情,因?yàn)檫@個東西流程長。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話,這個細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞 Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1623細(xì)胞、H-719細(xì)胞、OVSAHO細(xì)胞 RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞 AtT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1436細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞、A-253細(xì)胞 MDA-MB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞 TE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞、DLM8細(xì)胞 Huh-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCM細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞、MDAMB435S細(xì)胞 NCI-H292 Cell:人肺腺癌細(xì)胞系 KCL22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC9811-P細(xì)胞、EC-GI細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞 766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EnCa1細(xì)胞、ABC-1細(xì)胞、RS4-11細(xì)胞 OCI-LY-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞 OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞 NIH-3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細(xì)胞、B4G12細(xì)胞、RM1細(xì)胞 HuH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel526細(xì)胞、LC1細(xì)胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細(xì)胞 SK-ChA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL細(xì)胞、PC-3細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞 SK-RC-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細(xì)胞、BT.549細(xì)胞、COR-L51細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-39細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞 RPMI no. 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHT-101細(xì)胞、G292細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞 SKRC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VA-ES-BJ細(xì)胞、Ly19細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞 K562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞 Renal Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP subline C4-2細(xì)胞、H9c2細(xì)胞、Hs 888.T細(xì)胞 Astrocyte type I clone細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1細(xì)胞、H2.35細(xì)胞、SHI1細(xì)胞 A-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞 EBC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 04.03細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞、KNS-62細(xì)胞 IPLB-SF 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HITT15細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞 VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞 38C-13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MAVER細(xì)胞、HT-3細(xì)胞、U343細(xì)胞 NCI-H1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-1034細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞、TGHAVSMC細(xì)胞 Hs739T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細(xì)胞、B-cell with DC Morphology細(xì)胞、H-2171細(xì)胞 MGHU1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM2664細(xì)胞、MDA-MB-415細(xì)胞、RC-K8細(xì)胞 HCC0095細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc327細(xì)胞、BC3 H1細(xì)胞、C4-2 B細(xì)胞 H-1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H841細(xì)胞、HLE細(xì)胞、YH細(xì)胞 P3J.HR1K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-510A細(xì)胞、B16BL6細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞 3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞 MDA134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL 1細(xì)胞、H-1993細(xì)胞、MDCK細(xì)胞 JB6Cl30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLO-Y4細(xì)胞、H661細(xì)胞、DHL4細(xì)胞 T2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-38細(xì)胞、Mel-624細(xì)胞、Hs-695-T細(xì)胞 COLO206細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NALM-6-M1細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞、SU-DHL-16細(xì)胞 HuT-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-PK1細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、LS-513細(xì)胞 HEI-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNSC細(xì)胞、NIH:OVCAR-5細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞 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