"OPM-2 Cell:人骨髓瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
HT-1197細胞系相關產(chǎn)品：766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
Leukemia 1210細胞系相關產(chǎn)品：293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞
NCIH2227細胞系相關產(chǎn)品：OK細胞、RCC-JF細胞、HMrSV5細胞
HET1A細胞系相關產(chǎn)品：COR-L279細胞、Mv 1 Lu細胞、HAVSMC細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
OPM-2 Cell:人骨髓瘤細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
DR2R1610細胞系相關產(chǎn)品：253J細胞、50.B1細胞、Tregs細胞
HS578細胞系相關產(chǎn)品：CAMA-1細胞、SCCVII/St細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞
NCI H82細胞系相關產(chǎn)品：SP2/0 Ag-14細胞、SNU668細胞、Clone Y-1細胞
624 MEL細胞系相關產(chǎn)品：SNUC1細胞、CCD-841CoN細胞、COLO-684細胞
HRVEC細胞系相關產(chǎn)品：CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
細胞生長特性：懸浮生長
OPM-2 Cell:人骨髓瘤細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
FHL-124細胞系相關產(chǎn)品：SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞
BJA-B1細胞系相關產(chǎn)品：Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞
UM-UC3細胞系相關產(chǎn)品：HEC1A細胞、H1299細胞、HD-LM-2細胞
IEC 6細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞
T98G細胞系相關產(chǎn)品：RS4:11細胞、130T細胞、NSI/1-Ag4-1細胞
MDAPCa-2b細胞系相關產(chǎn)品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關產(chǎn)品：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞
OPM-2 Cell:人骨髓瘤細胞系
NCI-HUT-520細胞系相關產(chǎn)品：P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞
NCI-H1648細胞系相關產(chǎn)品：CT26-clone 25細胞、UPCI:SCC154細胞、MSTO-211H細胞
NSC34細胞系相關產(chǎn)品：NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞
SGC7901/DDP細胞系相關產(chǎn)品：MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞
SUM159PT細胞系相關產(chǎn)品：DMS153細胞、KMH2細胞、BJA-B-1細胞
RK 13細胞系相關產(chǎn)品：NCIH2405細胞、HNE3細胞、SNU601細胞
KMBC細胞系相關產(chǎn)品：MKN-28細胞、TE 85 ClF-5細胞、Neukoplast細胞
VERO76細胞系相關產(chǎn)品：AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
HIT細胞系相關產(chǎn)品：SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞
DiFi細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL10細胞、MLM細胞、8305C細胞
OPM2細胞系相關產(chǎn)品：KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞
NOR-10細胞系相關產(chǎn)品：ROS-17/2.8細胞、H146細胞、SKNFI細胞
RGC-6細胞系相關產(chǎn)品：RPMI7666細胞、RKO-AS45-1細胞、RCC10 RGB細胞
RAT2細胞系相關產(chǎn)品：Rat 2細胞、Walker256細胞、P31 FUJ細胞
NCIH1105細胞系相關產(chǎn)品：ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
MIHA細胞系相關產(chǎn)品：HCS-2/8細胞、NPC-039細胞、PaTu8988s細胞
TE15細胞系相關產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞系相關產(chǎn)品：FU-97細胞、OCM-1細胞、WM-451Lu細胞
TE11細胞系相關產(chǎn)品：Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞
Raji細胞系相關產(chǎn)品：VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
UACC812細胞系相關產(chǎn)品：SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
R 1610細胞系相關產(chǎn)品：E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞
OCI/AML2細胞系相關產(chǎn)品：BrCL18細胞、CORL26細胞、MDA415細胞
PaCa2細胞系相關產(chǎn)品：NTera-2D1細胞、118MG細胞、OCILY19細胞
NCI-H125細胞系相關產(chǎn)品：J82COT細胞、SKMEL28細胞、HT144-mel細胞
T84細胞系相關產(chǎn)品：A-2780細胞、KU 812細胞、GTL16細胞
CAL-62細胞系相關產(chǎn)品：mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞
Hs 839.T細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H661細胞、HEK 293細胞、HEK293-A細胞
H2126細胞系相關產(chǎn)品：AMC-HN-8細胞、NCI-HUT-520細胞、K562/ADP細胞
Neuro 2a細胞系相關產(chǎn)品：A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞
HCC-44細胞系相關產(chǎn)品：NU-GC-2細胞、BLO11細胞、TH1細胞
MES23.5細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞
HT-144細胞系相關產(chǎn)品：RMC-1細胞、SU-DH-L5細胞、Line 522細胞
MRAEC細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP C4-2B細胞、LS-123細胞、RAMSCs細胞
HKBML細胞系相關產(chǎn)品：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
NT2細胞系相關產(chǎn)品：T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞
MOPC細胞系相關產(chǎn)品：HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
Med 283細胞系相關產(chǎn)品：MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞
CCRF CEM細胞系相關產(chǎn)品：ARO81-1細胞、MKN 7細胞、2PK-3細胞
MC3T3-E細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC-42細胞、LNCaP細胞、FLC7細胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關產(chǎn)品：H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞
Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞系相關產(chǎn)品：U251細胞、SNU1040細胞、MLFC細胞
NBL-12細胞系相關產(chǎn)品：PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞
OPM-2 Cell:人骨髓瘤細胞系
PNT1/A細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
VP303細胞系相關產(chǎn)品：Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞
AtT20細胞系相關產(chǎn)品：U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞
GM02131細胞系相關產(chǎn)品：NCTC-3960細胞、Rat Fetal Lung-6細胞、LICR-HN6細胞
KRC/Y細胞系相關產(chǎn)品：VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
NG10815細胞系相關產(chǎn)品：P30-OHK細胞、B78細胞、IOSE-80細胞
HGC27細胞系相關產(chǎn)品：SK BR 03細胞、MDA-134細胞、Hep G2細胞
38C13細胞系相關產(chǎn)品：YH細胞、P31-FUJ細胞、Tn5 B1-4細胞
QGY-7703細胞系相關產(chǎn)品：FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞
SKNO1細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-175VII細胞、HCC-1937細胞、CT26細胞
L-5178-Y細胞系相關產(chǎn)品：Clone 929細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、GM03569D細胞
MADB 106細胞系相關產(chǎn)品：HCT FET細胞、RCK-8細胞、A431細胞
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