RosettaBlue系列菌株衍生于NovaBlue系列感受態(tài)細(xì)胞,該菌株既具有很高的轉(zhuǎn)化效率,又具有recA endA lacIq 基因突變。對(duì)于包含有稀有密碼子的真核蛋白,是加強(qiáng)型的蛋白表達(dá)菌株。
RosettaBlue(DE3)感受態(tài)細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞內(nèi)一個(gè)兼容的具有氯霉素抗性的質(zhì)粒,補(bǔ)充提供了AGG, AGA, AUA, CUA, CCC 和GGA這些大腸桿菌中真核細(xì)胞的稀有密碼子的tRNA。這對(duì)于表達(dá)含有稀有密碼子的真核細(xì)胞蛋白具有很大的促進(jìn)作用。
DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5啟動(dòng)子下攜帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于pET系列載體,及其他T7啟動(dòng)子系列載體。
RosettaBlue(DE3)感受態(tài)細(xì)胞無(wú)法使用藍(lán)白斑篩選,因?yàn)樵诩?xì)胞中的DE3溶源噬菌體DNA序列上上含有LacZ的α肽段編碼序列。
在RosettaBlue(DE3)pLacI細(xì)胞內(nèi),稀有的tRNA基因和Lac抑制子基因存在于細(xì)胞內(nèi)的同一個(gè)質(zhì)粒上。
pLacI基因型表明該菌株含有pACYC184粒,該質(zhì)粒含有Lac抑制子基因。
菌株是recA-, endA-, lacIq , 具有很高的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化效率。