C58C1 Electroporation-Competent Cell 產(chǎn)品說明書
產(chǎn)品規(guī)格 (CAT#: LM1110)
C58C1 Electro: 50μl/支
pCAMBIA2301(control vector,10ng/μl ): 10μl
保存條件(保質(zhì)期): -80℃(12個(gè)月)
C58C1 Electro感受態(tài)細(xì)胞基因型
Agrobacterium rhizogenes (strR,lifR ) pRiA4b (agropine type)
C58C1 Electro感受態(tài)細(xì)胞產(chǎn)品說明
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細(xì)菌,它能夠感染大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個(gè)別裸子植物。C58C1發(fā)根農(nóng)桿菌菌株含有pRiA4b農(nóng)桿堿型Ri質(zhì)粒,具有廣泛的宿主范圍(薔薇科,夾竹桃科,豆科,茄科,黃芩,煙草等),同時(shí)具有鏈霉素,利福平抗性。唯地生物開發(fā)的C58C1電轉(zhuǎn)感受態(tài)特別適用于大質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化,感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pCAMBIA2301質(zhì)粒(卡那霉素抗性)檢測(cè),轉(zhuǎn)化效率>>105 cfu/μg DNA;經(jīng)pCAMBIA2301-ZH質(zhì)粒(size:40 kd)檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率可達(dá)5×103 cfu/μg DNA。
C58C1 Electro感受態(tài)細(xì)胞常規(guī)操作方法
1. 0.1 cm電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上5分鐘,待其瀝干水分,正置5分鐘,使乙醇充分揮發(fā),待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中,壓實(shí)冰面,電極杯頂離冰面0.5 cm以方便蓋上杯蓋,冰中靜置5分鐘充分降溫。
2. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中5分鐘,待其融化,加入0.01-1 μg質(zhì)粒DNA(體積不大于6ul,用試劑盒抽提,雙蒸水溶解;轉(zhuǎn)化效率較高,次使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)確定所加質(zhì)粒的量),用手撥打管底混勻,立即插入冰中,用200 μl槍頭將感受態(tài)-質(zhì)粒混合物快速移到電擊杯中,蓋上杯蓋,空管保留待用。
3. 啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀,設(shè)置參數(shù):C=25 μF,PC=200 ohm,V=2400 V(此參數(shù)為Biorad 推薦,使用者也可按所用電轉(zhuǎn)儀推薦的protocol操作),將電擊杯從冰中拿出,吸水紙吸干外表面水份,快速放入電轉(zhuǎn)槽中,啟動(dòng)電擊,電擊完成快速插入冰中,加入1 ml無抗生素的TY,并轉(zhuǎn)移到感受態(tài)空管中,28℃振蕩培養(yǎng)2~3小時(shí)。
4. 6000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的TY平板上,倒置放于28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天
關(guān)鍵字: C58C1_ELECTRO感受態(tài)細(xì)胞_基因_
上海聯(lián)邁生物工程有限公司(LMAI Bio)是一家經(jīng)營生物、儀器、試劑、耗材等科研產(chǎn)品的高新技術(shù)生命科學(xué)公司,在廣大用戶的幫助和支持下,經(jīng)過不懈的努力, 已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的一家供應(yīng)商,代理許多國際先進(jìn)水平的高科技產(chǎn)品,包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診 斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。 公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國,在同行獲得一致好評(píng)。 特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類齊全、價(jià)格實(shí)惠,美國原裝進(jìn)口原代細(xì)胞,專業(yè)培養(yǎng)基,常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基,細(xì)胞培養(yǎng)用的相關(guān)試劑,氨基酸,抗生素,維他命類產(chǎn)品品種齊全,試劑耗材種類繁多。 公司的規(guī)模和產(chǎn)品種類日益擴(kuò)大和更新,我們一直秉承著代理優(yōu)質(zhì)品牌的產(chǎn)品,服務(wù)好每一位顧客,將