人白細胞介素7酶聯(lián)免疫試劑盒
英文名稱
Human IL-7 ELISA KIT
中文名稱
人白細胞介素7酶聯(lián)免疫試劑盒
別 名
Interleukin-7; Interleukin 7; Interleukin7; IL7; IL 7; IL7_HUMAN; IL7_MOUSE; LP-1; Lymphopoietin 1.
適用樣品基質
cell culture supernates, serum, and plasma.
保存條件
Store at 4°C for 6 months, at -20°C for 12 months. Avoid multiple freeze-thaw cycles (Shipped with wet ice.)
產品介紹
Interleukin 7 (IL7) is a lymphoid cell growth factor that affects pre-B, pro-B, and early T cells. IL7 was previously known as pre-B cell growth factor and lymphopoietin 1. IL7 supports the growth of early B cells from long-term lymphoid bone marrow cultures. It is mitogenic to thymocytes and enhances the response of cells to other stimuli such as polyhydroxyalkanoate (PHA) and concanavalin A (ConA). IL7 stimulates the proliferation of CD4+/CD8+ cells. The proliferative response of thymocytes to IL7 is not affected by antibodies to the T cell growth factors such as IL2, IL4 and IL6, suggesting that IL7 is capable of stimulating T cell proliferation through a pathway independent of the known T cell growth factors. Mature T cells respond to IL7 and Con A, but not to IL7 alone. In myeloid lineage cells, IL7 upregulates the production of pro-inflammatory cytokines and stimulates the tumoricidal activity of monocytes/macrophages. IL7 is expressed by adherent stromal cells from various tissues.
Important Note:
This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
方法：雙抗夾心法
保質期：12個月
測定長度： 1-4.5小時 1-3.5小時
優(yōu)點：
有競爭力的價格。 預稀釋的檢測試劑A和B
高靈敏度。 減少進行測試時的步驟數(shù)
高穩(wěn)定性。 所有試劑均可在4℃下保存
保質期12個月。 與其他品牌相比反應更快
保質期12個月
包裝描述：
測定步驟總結
1.準備所有試劑，樣品和標準品；
2.向每個孔中添加100µL標準液或樣品。在37℃下孵育2小時；
3.吸出并加入100µL準備好的檢測試劑A。在37℃孵育1小時；
4.吸凈并清洗3次；
5.加入100µL制備的檢測試劑B。在37℃孵育1小時；
6.吸氣并清洗5次；
7.添加90µL底物溶液。在37℃下孵育15-25分鐘；
8.添加50µL終止液。立即在450nm處讀取。
需自備的設備及試劑
450±10nm濾光片的酶標儀(建議儀器使用前提前預熱)
單道或多道微量加液器及吸頭
稀釋樣品的EP管
蒸餾水或去離子水
吸水紙
盛放洗液的容器
試劑盒的儲存及有效期
未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標簽上所示保存。請注意，收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。
使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存，開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。
穩(wěn)定性
經測定，試劑盒在有效期內按推薦溫度保存，其活性降低率小于5%。
為減小外部因素對試劑盒破壞前后檢測值的影響，實驗室的環(huán)境條件需盡量保持一致，尤其是實驗室內溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實驗員來進行操作可減少人為誤差。
注意：
試劑盒內酶標條可拆卸，按實驗需求可分多次使用；使用后的剩余試劑盒建議在首次實驗后 1個月內使用完畢。產品過期時間以盒子上的標簽為準，保質期內所有組分都確保是穩(wěn)定的。
ELISA實驗常見問題分析
ELISA實驗因靈敏度高，特異性強在生物科研上得到了廣泛的認可，但對初學者而言，如不注意實驗操作過程中的各個環(huán)節(jié)，可能會對最終的實驗結果產生比較大的影響，比如實驗出現(xiàn)白板，顯色弱靈敏度低，花板無梯度背景高等現(xiàn)象。下面對以上實驗現(xiàn)象進行一一解析。
1.白板現(xiàn)象
在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后，酶標板中所有孔的顏色均為無色，即無信號呈現(xiàn)。
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因：
a.試劑已過保質期，不同批次稀釋液交叉使用。
b.錯加漏加檢測A，檢測B或者底物溶液TMB。
c.洗板或者加樣過程中，酶標記物被污染失活，稀釋液中含有酶抑制劑如疊氮吶等。
d.配置稀釋液的蒸餾水可能被污染。
e.洗滌液是濃縮型的，沒有按比例進行稀釋。
f.酶標記物的活性和效價比較低。
g.溶液的PH值不正確，一般稀釋液的PH值應保持在7.2-7.4。
2.顯色弱靈敏度低
在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后，酶標板中孔的顯色比較淺，即只有微弱的信號呈現(xiàn)。
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因：
a.產品過有效期，試劑沒有按規(guī)定進行適當?shù)谋４妗?/p>
b.試劑，標準品或者樣品在使用前沒有平衡到室溫。
c.少加了試劑的量或者加入試劑的稀釋比例不當。
d.洗板或者加樣過程中，酶標物受污染失活。
e.孵育時間和孵育溫度未達到實驗要求。
f.洗滌液稀釋倍數(shù)不符合要求，洗板次數(shù)過多，洗板沖擊力過大，洗板浸泡時間過長。
g.底物溶液TMB顯色時間太短。
3.花板無梯度背景高
在完成所有實驗步驟進行底物TMB溶液顯色后，酶標板中的孔有顏色但沒有梯度，背景也可能較高.
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因：
a.底物溶液TMB未置于陰涼避光處保存，實驗前溶液已經變藍。
b.孵育溫度過高或者孵育時間過長，發(fā)生了較強的非特異性吸附。
c.沒有按說明書要求洗板，特別是洗板時洗滌液的量少加了。
d.加樣時沒有換槍頭造成交叉污染。
e.花板現(xiàn)象：低濃度或者低活性的包被抗體或者檢測抗體，封閉不足導致的本底不穩(wěn)定，洗板不充分，包被板子的問題。
綜上所述：在ELISA實驗中應注意以下問題：
1.在實驗前應該按相關要求將實驗試劑平衡至室溫。
2.包被抗體和檢測抗體應該是有高活性的且都針對同一抗原。
3.試劑保存：蛋白抗體類試劑保存于-20攝氏度，顯色液洗滌液保存于2-8攝氏度。
4.各試劑在使用前應充分混勻，以保證試劑的均一性和準確性。
5.嚴格控制反應溫度和反應試劑。
6.洗板次數(shù)，洗板液的量，洗板液浸泡時間的長短，洗板的力度都是應該注意的問題。
7.相關濃縮液應按要求稀釋到相應比例方可使用，PH值要保持在7.2-7.4之間。
8.在終止反應時盡量避免微孔中存有氣泡。
9.終止反應完成后應該在2min內完成酶標儀讀數(shù)。
特別提示：本公司的所有產品僅用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
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上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產、銷售、服務于一體的一家生物科技企業(yè)，專營生化試劑、標準品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細胞生物學，分子生物學等高生物產品?？偛课挥谏虾?，并在北京、廣東，江西，吉林等全國30多個省市設有分公司和代理機構。涉及的產品被中國科學院、清華、北大、復旦，上海交大，復旦醫(yī)學院，上海中醫(yī)藥大學，華東師范大學，第二軍醫(yī)大學，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質量和完善的售后服務確。