化學(xué)名

N-[4-[4-(4-methylpiperazin-1-yl)-6-[(5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino]pyrimidin-2-yl]sulfanylphenyl]cyclopropanecarboxamide

簡稱

VX-680

別名

Tozasertib, MK-0457, VE 465, VE-465, VX-680, VX680

中文名

陶扎色替

化學(xué)式

C₂₃H₂₈N₈OS

分子量

464.59

CAS號

639089-54-6

純度

98%

溶劑/溶解度

Water<1mg/ml; DMSO93mg/ml; Ethanol<1mg/ml

溶液配制

5mg加入1.08ml DMSO，或者每4.65mg加入1ml DMSO，配制成10mM溶液。SC6551-10mM用DMSO配制。

產(chǎn)品描述

VX-680 (Tozasertib, MK-0457)是一種pan-Aurora抑制劑，對Aurora A作用最強，無細(xì)胞試驗中Kiapp為0.6nM，而對Aurora B/Aurora C的作用較弱，對Aurora A選擇性比其他55種激酶高100倍。Phase 2。

信號通路

Cell Cycle; Epigenetics

靶點

Aurora A

Aurora C

Aurora B

FLT3

Bcr-Abl

IC50

0.6nM(Ki app)

4.6nM(Ki app)

18nM(Ki app)

30nM(Ki)

30nM(Ki)

體外研究

雖然VX-680具有多激酶特性，VX-680卻誘導(dǎo)相似的細(xì)胞毒性，IC50約為300nM，在G2/M期、核內(nèi)復(fù)制期及轉(zhuǎn)染ABL或FLT-3激酶的BaF3細(xì)胞凋亡時，顯示一個Aurora B類似的抑制表現(xiàn)型。VX-680抑制CAL-62細(xì)胞增殖，這種作用存在時間依賴性。用VX-680處理14天，明顯降低群體的數(shù)量和大小，處理8305C下降達(dá)到70%，處理CAL-62、8505C和BHT-101下降達(dá)到90%。用VX-680處理不同ATC細(xì)胞，抑制細(xì)胞增殖，IC50為25到150nM，這種作用存在時間和劑量依賴性。在軟瓊脂中，VX-680明顯削弱不同細(xì)胞系形成群落的能力。caspase-3的活性分析顯示VX-680誘導(dǎo)不同細(xì)胞凋亡。VX-680處理CAL-62細(xì)胞12小時，形成DNA含量≥4N細(xì)胞累積物。微速攝影分析顯示VX-680處理的CAL-62細(xì)胞離開細(xì)胞中期。VX-680可以抑制組蛋白H3的磷酸化作用。VX-680作用于攜帶T315I突變的BCR-Abl的病人樣本，具有明顯抑制活性。

體內(nèi)研究

VX-680作用于人類Aml(HL-60)移植瘤模型明顯降低腫瘤尺寸。VX-680按75mg/kg劑量給藥實驗鼠，每天腹腔注射兩次，持續(xù)13天，與對照組相比，平均腫瘤體積下降達(dá)98%。腫瘤體積比實驗之前初始體積小很多。按12.5mg/kg劑量每天給藥兩次，腫瘤生長也明顯降低，這種作用存在劑量依賴性。VX-680耐受性很好，只有在使用高劑量時可以觀察到實驗動物體重稍微降低。通過比較cisplatin，按5.4mg/kg劑量給藥，每四天腹腔注射一次，一共進行三次，抑制腫瘤生長只達(dá)9%。VX-680作用于胰臟和結(jié)腸移植瘤，也引起腫瘤衰退。VX-680靜脈注射給藥攜帶HCT116腫瘤的實驗鼠，顯示很強的抗癌活性。使用高劑量VX-680(每小時2mg/kg)處理，明顯提高效果，比實驗錢的初始腫瘤平均尺寸下降56%。

臨床實驗

N/A

特征

N/A

酶活性檢測實驗

方法

丙酮酸激酶/乳酸脫氫酶催化NADH的氧化，伴隨著ATP的消耗，觀察340nM處吸光值的降低。反應(yīng)包括100mM Tris(pH為8)，10mM MgCl₂，2.2mM ATP，1mM磷酸烯醇丙酮酸，0.6mg/ml NADH，75ml丙酮酸激酶，105ml乳酸脫氫酶和0.5mM基底肽(序列為EAIYAAPFAKKK)。加入足夠的激酶開始反應(yīng)，反應(yīng)的激酶濃度達(dá)到30nM，用微量滴定板分光光度計在30℃進行30分鐘，觀察吸收率的降低。通過加入3.75μl溶于100% DMSO的VX-680或單獨DMSO，獲得抑制常數(shù)。按如下公式計算Ki值，Ki=IC50/(1+[S]/Kd)，[S]=[ATP]=2.2mM，Kd=70μM。假定作用于野生型和H396P Abl激酶域的Kd(ATP)為70μM，計算以上各值。

細(xì)胞實驗

細(xì)胞系

CAL-62細(xì)胞

濃度

5-500nM

處理時間

4天

方法

對照組CAL-62細(xì)胞培養(yǎng)在二甲亞砜和DMSO中，實驗組加入500nM VX-680，處理1到5天。加入不同濃度(5到500nM)Aurora抑制劑處理不同ATC細(xì)胞4天，用來測定VX-680作用于細(xì)胞增殖的劑量依賴性。細(xì)胞在溫育結(jié)束前加30mM BrdU標(biāo)記，脈沖2小時。通過比色免疫分析使用細(xì)胞增殖ELISA試劑盒分析BrdU的合并率。通過比較VX-680處理的細(xì)胞和對照組細(xì)胞得到結(jié)果。

動物實驗

動物模型

右側(cè)腋窩處皮下注射107 HL-60白血病細(xì)胞的雌性無胸腺NCr-nu鼠

配制

50mM含50% PEG300的磷酸buffer

劑量

50mg/kg，75mg/kg

給藥方式

腹腔注射

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝

KL6551-10mM

VX-680 (Aurora Kinase抑制劑)

10mM×0.2ml

KL6551-5mg

VX-680 (Aurora Kinase抑制劑)

5mg

KL6551-25mg

VX-680 (Aurora Kinase抑制劑)

25mg

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說明書

1份