"SMMC-7721：人肝癌傳代細(xì)胞
細(xì)胞背景資料：用Northernblot方法，未能檢測(cè)到細(xì)胞中１.３kbLFIRE-１/HFREP-１mRNA的表達(dá)。
SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞
PC 61 5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NE1-E6E7細(xì)胞、ST2細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
很多朋友討論細(xì)胞培養(yǎng)問題，見到很多很好的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，這里說一些我個(gè)人的經(jīng)驗(yàn)，因?yàn)橐恍┍容^特殊的原因，我自己培養(yǎng)接觸過近３００種細(xì)胞，常用于做實(shí)驗(yàn)的，累積有百余種，可以說遇到過許多各式各樣古怪的細(xì)胞。這里挑細(xì)胞消化開始做我的篇專題，并不是因?yàn)榧?xì)胞消化最重要，而是近期看到大家頻繁討論這個(gè)話題，我就拋磚引玉，下面幾點(diǎn)拙見，可能與其它朋友總結(jié)的一些經(jīng)驗(yàn)有點(diǎn)出入，僅供大家參考。許多同學(xué)對(duì)細(xì)胞消化做了許多研究，得出了很多有價(jià)值的經(jīng)驗(yàn)，也見到很多人的困惑。其實(shí)細(xì)胞培養(yǎng)，尤其是細(xì)胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗(yàn)，就能把細(xì)胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細(xì)節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識(shí)，如果不對(duì)之處，歡迎指正，總結(jié)下來，細(xì)胞培養(yǎng)中消化很重要，但其實(shí)消化并不是細(xì)胞培養(yǎng)的關(guān)鍵所在(雖然很重要)，關(guān)鍵所在是細(xì)胞來源，血清質(zhì)量和水源(自己配制溶液的話)。我看到版上許多人養(yǎng)細(xì)胞遇到各種各樣的問題，很多時(shí)候bottleneck沒有找到，雖然通過其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因?yàn)槿藗兺⒁庾约旱牟僮?，總覺得自己沒有經(jīng)驗(yàn)，而忽視試劑，溶液尤其是細(xì)胞的質(zhì)量，后者其實(shí)才是許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室常見的問題。
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SMMC-7721：人肝癌傳代細(xì)胞
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT474細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞、UO.31細(xì)胞
373 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OEC19細(xì)胞、MAVER1細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞
NCTC1469細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SkChA1細(xì)胞、RL952細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞
細(xì)胞傳代方法：１：３傳代，２-３天換液一次
體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)及其操作步驟：【瘤細(xì)胞懸液接種】１)無菌選取生長(zhǎng)良好(有光澤，淡紅色)瘤組織或?qū)?shù)生長(zhǎng)期培養(yǎng)瘤細(xì)胞；２)在PBS中將瘤組織剪碎后用勻漿器研磨，經(jīng)８０～１００目篩網(wǎng)過濾成細(xì)胞懸液；３)培養(yǎng)細(xì)胞應(yīng)用PBS洗兩遍；４)計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度至１０７～１０８／ml；５)常規(guī)消毒后，于接種部位(通常為背部或腋窩腹股溝皮下)用醫(yī)用注射器皮下潛行一段后注入細(xì)胞懸液(０.１ml／部位，＞１０６細(xì)胞)。初次接種成功率低，細(xì)胞數(shù)盡可能多一些；６)次日注意觀察動(dòng)物一般情況。初次接種一般有一段較長(zhǎng)的潛伏期，以后隨著傳代潛伏期逐漸縮短，最后固定為一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的時(shí)間。【腹水瘤的建立與腹水瘤的接種】將實(shí)體瘤細(xì)胞直接種于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤細(xì)胞，將這種腹水反復(fù)傳代，即可成為腹水瘤。初次傳代時(shí)，腹水常呈血性(含大量紅細(xì)胞)，反復(fù)傳代后腹水逐漸變成乳白色。腹水瘤的接種過程如下。１)將凍存或培養(yǎng)的腹水瘤細(xì)胞離心和洗滌，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)；２)消毒動(dòng)物，左下腹穿刺接種１０６腹水瘤細(xì)胞；３)接種腹水瘤細(xì)胞后約７~１２d，待小鼠腹部明顯膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９號(hào)針頭抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水經(jīng)３０００rpm離心１５min，收集上清，分裝凍存?zhèn)溆谩?/span>
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SMMC-7721：人肝癌傳代細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
Panc-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UM-UC3細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞、MARC-145細(xì)胞
MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIPF178C細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞、KPL1細(xì)胞
HBVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-27細(xì)胞、Kelly細(xì)胞、OCI AML4細(xì)胞
H3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)更好經(jīng)驗(yàn)詳解：1)收到細(xì)胞，首先要鏡檢：觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常，對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好，觀察細(xì)胞密度，有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。 由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化，很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣，主要是貼壁牢固問題。比如293T，平時(shí)貼壁就不是很牢，在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面，會(huì)發(fā)生大片的脫落，細(xì)胞聚集在一起，但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的，通過離心收集，加以胰酶的消化，重新打散，又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2)當(dāng)通過上一步的觀察，細(xì)胞初步?jīng)]有問題時(shí)，進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞密達(dá)到80%左右時(shí)，則處理如下：棄除瓶中大部分培養(yǎng)基，僅保留5到10mL培養(yǎng)所需的常規(guī)培養(yǎng)基；或更換新鮮的培養(yǎng)基，置于培養(yǎng)箱中，隨后每天觀察。 細(xì)胞在低于正常生長(zhǎng)溫度情況下，會(huì)調(diào)整為靜止期，或者慢速生長(zhǎng)期，恢復(fù)37度的環(huán)境至少3個(gè)小時(shí)左右，才能重新調(diào)整到接近對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的狀態(tài)，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期進(jìn)行細(xì)胞的傳代會(huì)大大增加傳代的成功率，和細(xì)胞的存活率。3)如果經(jīng)步觀察發(fā)現(xiàn)細(xì)胞密度超過90%，并且細(xì)胞狀態(tài)很好時(shí)，則復(fù)溫后2個(gè)小時(shí)需要立即傳代。傳代的比例應(yīng)依據(jù)不同的細(xì)胞而定。對(duì)于生長(zhǎng)比較快，狀態(tài)穩(wěn)定，不易受外界影響的細(xì)胞可以一次多傳幾瓶；對(duì)于生長(zhǎng)較慢，細(xì)胞比較薄，狀態(tài)容易波動(dòng)的細(xì)胞類型，一次少傳些，每瓶細(xì)胞密度大些，便于穩(wěn)定生長(zhǎng)。至于一些比較陌生的細(xì)胞，次處理也可以依照第二種情況。
FF-WT-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-HPNE細(xì)胞、R 2 C細(xì)胞、H-4細(xì)胞
PBMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、526-mel細(xì)胞
Hs822T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BL6細(xì)胞、HR-1細(xì)胞、HLE細(xì)胞
M07e細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BS-C-1細(xì)胞、SW 1271細(xì)胞、LTEPsm細(xì)胞
Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞
MHHCALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-24細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、WM35細(xì)胞
GNM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞
NCI-H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H820細(xì)胞、RA細(xì)胞
Cates-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK 21細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞、DC 2.4細(xì)胞
HRA19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMNSAH-DF1細(xì)胞、SW-1463細(xì)胞、IGROV1細(xì)胞
AN3CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MB 157細(xì)胞、C6661細(xì)胞、Rat podocyte細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
GM3190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS4-11細(xì)胞、C17.2細(xì)胞、Hep 3B2.1-7細(xì)胞
MDA-MB-435-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit225-K6細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞
HPF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2B4-L細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞
MHH-CALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283MED細(xì)胞、W133細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞
MHH-CALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D-283MED細(xì)胞、W133細(xì)胞、BE(2)-C細(xì)胞
ACC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：4T1-LUC細(xì)胞、HRA 19細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞
MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞
RKO-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RetroPack PT67細(xì)胞、HMEL細(xì)胞、SF126細(xì)胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-69細(xì)胞、WI38細(xì)胞、H-292細(xì)胞
H-1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RD-2細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞、HSC4細(xì)胞
5-8F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs852細(xì)胞、TE1細(xì)胞、NCI-H1417細(xì)胞
Sp2/0-Ag-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1404細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞、MCAEC細(xì)胞
HAC-84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc-3_27細(xì)胞、KNS62細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞
Swiss3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6-Swiss albino細(xì)胞、NCI-BL6細(xì)胞、NCIH661細(xì)胞
SMMC-7721：人肝癌傳代細(xì)胞
MCA-205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細(xì)胞、NCI-SNU-1040細(xì)胞、Nb2a細(xì)胞
F9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞、A-1847細(xì)胞
Walker-Ca.256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu 177細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞、KNS42細(xì)胞
SSP-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH 3T3細(xì)胞、MDCK細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞
Panc 4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3細(xì)胞、RTE細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞
NCI-H64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepaRG細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞、McA-RH7777細(xì)胞
MC/CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-2058細(xì)胞、A 72細(xì)胞、WEHI 3B細(xì)胞
MJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RN細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞
SNK6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJA-B1細(xì)胞、H69C細(xì)胞、CCC-HPF-1細(xì)胞
NCIH520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-16細(xì)胞、A 172細(xì)胞、DC2.4細(xì)胞
PJ34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3HRI細(xì)胞、SNU-878細(xì)胞、HOP 62細(xì)胞
PC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR-22rv1細(xì)胞、V79-GalK1細(xì)胞、JJN3細(xì)胞
CATHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMB17細(xì)胞、GM 637細(xì)胞、GM 637細(xì)胞
A2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OsACL細(xì)胞、AU-Mel細(xì)胞、H-35 Reuber細(xì)胞
P3J HR1-K細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-101D細(xì)胞、HCC1008細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞
MIA Paca2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT-28細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞、BL2141細(xì)胞
JVM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE180細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞
RBL2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：b.End3細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞、NCI-SNU-449細(xì)胞
MDA-MB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞、Y-1細(xì)胞
MRC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE-1細(xì)胞、DSL6A/C1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞
G292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nb 2細(xì)胞、HS940細(xì)胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate細(xì)胞
IAR-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞
KAT5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori-3.1細(xì)胞、MHH-CALL2細(xì)胞、H-1404細(xì)胞
BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞
NCIH2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 100細(xì)胞、COLO 206細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞
WM-266-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-966SK細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞、MCF-7/ADR-RES細(xì)胞
CEM/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2106細(xì)胞、DH-82細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞
SUM-159細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1341細(xì)胞、HS5細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞
NU-GC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGC803細(xì)胞、ACCM細(xì)胞、MC 116細(xì)胞
H6c7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-1細(xì)胞、253JB-V細(xì)胞、LL/2細(xì)胞
NCI H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV112D細(xì)胞、Earles's cells細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞
GM00637F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TMD-8細(xì)胞、H766T細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞
U-343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGH-U3 (RN)細(xì)胞、H735細(xì)胞、H1385細(xì)胞
MKN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB-19細(xì)胞、SUM-159-PT細(xì)胞、HDLM-2細(xì)胞
SMMC-7721：人肝癌傳代細(xì)胞
Hs.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-526細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞
NuTu-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUP-B15細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、TE 671細(xì)胞
SK-N-BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB468細(xì)胞、HL60細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞
Hs821T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATC241細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞、HFF1細(xì)胞
CT26WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578-T細(xì)胞、LSC-1細(xì)胞、KP4細(xì)胞
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關(guān)鍵字： SMMC-7721：人肝癌傳代細(xì)胞;
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