DNA末端平滑試劑盒
DNA末端平滑試劑盒(DNA Blunting Kit)是利用T4 DNA聚合酶(T4 DNA Polymerase)的5'→3'DNA聚合酶活性和3'→5'的DNA外切酶活性,用于將酶切或PCR等反應(yīng)后產(chǎn)生的粘末端轉(zhuǎn)變?yōu)槠侥┒说脑噭┖?。?jīng)過本試劑盒處理產(chǎn)生的平末端DNA片段可以用于常規(guī)的平端連接反應(yīng)。 粘末端有兩種,一種為5'端突出末端,另外一種為3'端突出末端。本試劑盒可以將5'端突出末端補(bǔ)平,也可以將3'端突出末端削平(也稱打平)。 當(dāng)末端為5'端突出末端時(shí),T4 DNA Polymerase可以利用其5'→3'DNA聚合酶活性將末端補(bǔ)平;當(dāng)末端為3'端突出末端時(shí),T4 DNA Polymerase可以利用其3'→5'DNA外切酶活性將末端削平。 Reaction Buffer(5X):335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃),33mM MgCl2,5mM DTT, 84mM(NH4)2SO4。 本試劑盒可以進(jìn)行20個(gè)常規(guī)的末端平滑化反應(yīng)。 包裝清單:
保存條件: -20℃保存。 注意事項(xiàng): 使用時(shí)宜存放在冰盒內(nèi)或冰浴上,使用完畢后宜立即放置于-20℃保存。 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi)。 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用說明: 1. 參考如下表格設(shè)置反應(yīng)體系:
2. 按上述體系配好之后,輕輕混勻(可以用移液器吹打混勻或用Vortex在最低速度輕輕混勻),隨后離心沉淀液體。 3. 11℃孵育20分鐘,或室溫(20-25℃)孵育5分鐘。 4. 70℃孵育10分鐘終止反應(yīng)。隨后可直接用于連接反應(yīng)或純化后用于連接反應(yīng)。如果不直接用于后續(xù)反應(yīng),可以在-20℃保存
上海康朗生物科技有限公司
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