大腸桿菌JM109感受態(tài)細胞

產(chǎn)品及特點本產(chǎn)品是采用大腸桿菌 JM109 菌株經(jīng)特殊工藝處理得到的感受態(tài)細胞，可用于 DNA 的化學(xué)轉(zhuǎn)化。本試劑盒具有下列特點：

1. 使用 pUC19 質(zhì)粒檢測，轉(zhuǎn)化效率可達 108，-80℃保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。

2. recA1 和 endA1 突變阻止對克隆 DNA 的修飾或?qū)λ拗骶旧?DNA 的重組，提高純化 質(zhì)粒的產(chǎn)量和質(zhì)量。

3. JM109 菌株基因型：endA1 recA1 gyrA96 thi hsdR17(rk-mk+)relA1 supE44 D(lac-proAB) [F’ traD36 proAB laqlqZ Δ M15 ]
規(guī)格及成分 成分 包裝
本產(chǎn)品 0.1mL×10
使用手冊 1 份

運輸及保存 干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。 

使用方法

1. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為 50-100μl，可以根據(jù) 實際情況分裝使用。 以下實驗以 50 μl 感受態(tài)細胞為例。

2. 待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的 DNA（根據(jù)實際情況加入適量 的 DNA，通常 100 μl 感受態(tài)細胞能夠被 1 ng 超螺旋質(zhì)粒 DNA 所飽和），用移液器 輕輕吹打混勻，冰浴 30 分鐘。

3. 42℃熱擊 90 秒，迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中，冰上靜置 2-3 分鐘。

4. 每個離心管中加入 450 μl 無菌的 SOC 或 LB 培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于 37℃ 搖床，150 rpm 振蕩培養(yǎng) 45 分鐘使菌體復(fù)蘇。

5. 根據(jù)實驗需求，取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞，加到含相應(yīng)抗生素的 SOC 或 LB 固體 瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于 37℃直至液體被吸收， 倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng) 12-16 小時。

注意：

1 涂布用量可根據(jù)具體實驗調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較多，可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板； 若轉(zhuǎn)化的 DNA 總量較少，可取 200-300 μl 轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計的克隆數(shù)較少， 可通過離心（4,000 rpm ，2 分鐘）后吸除部分培養(yǎng)液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。

2 新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干，可將平板正置于 37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。

4. 本產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，使用方便，質(zhì)優(yōu)價廉。