2XLAMP MagicMix(無色）
產(chǎn)品及特點 本產(chǎn)品是 2×LAMP MagicMix（無色），可以用于 LAMP 等溫擴增，LAMP 即Loop-Mediated Isothermal Amplification（環(huán)介導(dǎo)等溫擴增），是 2000 年才出現(xiàn)的一種新穎的等溫核酸擴增方法。它利用 4 條模板專一的特異引物和具有鏈置換能力的 DNA 聚合酶，在等溫條件下(63℃左右) 30－60 分鐘完成擴增。該技術(shù)在靈敏度、特異性和檢測范圍等指標上能媲美甚至優(yōu)于 PCR 技術(shù)，同時還不需要模板的熱變性、溫度循環(huán)、等過程。目前已成功應(yīng)用于人類及動植物、細菌、病毒、寄生蟲、真菌等病原體的快速檢測。本試劑盒具有下列特點：
1. 即開即用的 2×LAMP MagicMix，無色。
2. 高特異性，由于同時使用 4-6 條特異引物，所以特異性比 PCR 更高。
3. 高擴增效率，擴增效率可達到 10E9-10E10，比PCR 靈敏一個數(shù)量級，可檢測到單拷貝的 DNA 分子
4. 65℃左右等溫擴增，可以不需要貴重的熱循環(huán)儀。
5. 即開即用，包含了除引物和模板 DNA 外的所有成份，十分方便。
6. 本試劑盒足夠 50 次 20uL 體系的 LAMP 擴增。
7. 提供擴增對照，便于在遇到困難時分析原因。
8. 本產(chǎn)品只能用于科研，不能用于臨床。
2XLAMP MagicMix(無色）
規(guī)格及成分 成 份 編 號 熱封袋包裝
2×LAMP MagicMix（無色） 190601a 500 uL（綠色蓋）
LAMP 陽性對照模板-引物混合物 130923a 45 uL（黃色蓋）
使用手冊 190601sc 1 份
2XLAMP MagicMix(無色）運輸及保存 低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。
自備試劑 LAMP 模板、LAMP 引物、自備可見光染料
使用方法 1. 制備模板DNA：選用合適的方法制備模板DNA。
2. 配制自備的5×LAMP引物混合液。先加超純水或自備TE緩沖液將自備的下列6種（或4種）引物干粉稀釋到母液濃度，然后在一新的離心管中按表中所列體積加入各種引物母液和超純水，最后得到1mL的5×LAMP引物混合液，此混合液足夠250次20uL體系的LAMP擴增。如果需要配制的5×LAMP引物混合液體積異于1mL，則各成分的用量請按比例調(diào)整。引物混合液可以在-20℃放置2年。引物名稱 母液濃度 加母液量
在 5×LAMP 引物
混合液中的濃度
FIP 引物 100 uM 80 uL 8 uM
BIP 引物 100 uM 80 uL 8 uM
F3 引物 100 uM 10 uL 1 uM
B3 引物 100 uM 10 uL 1 uM
Loop F 100 uM 20 uL 2 uM
Loop B 100 uM 20 uL 2 uM
超純水 780 uL
如果沒有 Loop 引
物，則用水替代
終體積 1 mL
3. 在冰上融化2×LAMP MagicMix，混勻，稍離心。如果有N個樣品，則在
N+2個反應(yīng)管中加入以下組份：
成份 樣品管 LAMP
陽性對照
LAMP
陰性對照
2×LAMP MagicMix（無色） 10 uL 10 uL 10 uL
自備 5×LAMP 引物混合液 4 uL 不加 4 uL
自備模板 DNA 1-100ng 不加 不加
LAMP 陽性對照模板-引物混合物 不加 4 uL 不加
補自備超純水到 20 uL 20 uL 20 uL
注意：此步可加入自備的各種LAMP可視化染料，這樣反應(yīng)結(jié)束后可以根據(jù)反應(yīng)液的顏色變化或?qū)崟r熒光強度變化來判斷是否有擴增，不需要開蓋，避免污染。如果加入了熒光染料，則需要在熒光定量PCR儀上進行反應(yīng)和實時檢測。
4. 混勻，置于63℃保溫60分鐘。如果是在PCR儀中保溫，必須加熱蓋。如果用金屬浴或水浴保溫，沒有熱蓋，必須覆蓋50uL的石蠟油，否則保溫期間反應(yīng)體系的水分會蒸發(fā)，影響反應(yīng)效率。
5. 產(chǎn)物取擴增產(chǎn)物5 uL上樣，進行2-3%的瓊脂糖凝膠電泳，可見LAMP特征性電泳圖譜。
6. 結(jié)果分析：如果本試劑盒提供的陽性對照-引物混合物能夠擴增而陰性對照不能擴出，則實驗有效。如果陽性對照-引物混合物沒有擴增出條帶，則試劑盒的問題，請跟廠家聯(lián)系。如果陰性對照（水作為模板）有擴增出條帶，則說明LAMP樣品或試劑有過去的擴增產(chǎn)物的污染，需要注意操作的規(guī)范性，如果不能解決，可以重新設(shè)計引物擴增新的靶片段。也可以使用不需要開蓋的2×可視化LAMP MagicMix。
關(guān)鍵字： 2XLAMP MagicMix(無色）廠家；2XLAMP MagicMix(無色）現(xiàn)貨
上?？道噬锟萍加邢薰臼且患壹邪l(fā)、生產(chǎn)、銷售、服務(wù)于一體的一家生物科技企業(yè)，專營生化試劑、標準品、基因、蛋白、抗體、Elisa試劑盒、細胞生物學，分子生物學等高生物產(chǎn)品?？偛课挥谏虾＃⒃诒本?、廣東，江西，吉林等全國30多個省市設(shè)有分公司和代理機構(gòu)。涉及的產(chǎn)品被中國科學院、清華、北大、復(fù)旦，上海交大，復(fù)旦醫(yī)學院，上海中醫(yī)藥大學，華東師范大學，第二軍醫(yī)大學，曙光醫(yī)院，浦東新區(qū)人民醫(yī)院等知名科研院所廣泛使用，可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和完善的售后服務(wù)確。