名稱 PAS染色液(糖原染色液)/ PAS Staining Solution 規(guī)格 4×50mL | 4×100mL 試劑組分 Compositions 200mL 400mL Storage 試劑(A)過碘酸溶液 50mL 100mL 4 ℃ 避光 試劑(B)Schiff Reagent 50mL 100mL 4 ℃ 避光 試劑(C)蘇木素染色液 50mL 100mL RT 避光 試劑(D)酸性乙醇分化液 50mL 100mL RT Manual 1份 1份 / 【注】有效期12個月 自備材料 1、 10%福爾馬林固定液 2、蒸餾水 3、乙醇 產品簡介 糖原染色是病理學中常規(guī)的染色方法之一,McManus 在 1946 年最先使用高碘酸-雪夫技術顯示黏蛋白,該 法常用來顯示糖原和其他多糖,該染色液不僅能夠顯示糖原,還能顯示中性黏液性物質和某些酸性物質,以及 軟骨、垂體、霉菌、真菌、色素、淀粉樣物質、基底膜等。 過碘酸(又稱高碘酸)是一種強氧化劑,它能氧化糖類及有關物質中的 1,2-乙二醇基,使之變?yōu)槎?醛與 Schiff 試劑能結合成一種品紅化合物,產生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細胞內其他物質,使用時應注意 選擇好高碘酸濃度和氧化時間,使氧化控制在即能把乙二醇基氧化成醛基,又不至于過氧化,這是很關鍵的步 驟。 本糖原 PAS 染色液的特點: 采用 Phygene 特有配方技術,大大增強了染色效果;性能穩(wěn)定,特異性強;操 作簡捷,僅需 1h 左右。 使用參考 操作步驟(僅供參考): 1、常規(guī)固定,常采用 10%的福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。 2、石蠟切片脫蠟入蒸餾水;冰凍切片直接入蒸餾水。 3、自來水沖洗 2~3min,再用蒸餾水浸洗 2 次。 4、置于過碘酸溶液中,室溫放置 5~8min,一般不宜超過 10min。 5、自來水沖洗 1 次,再用蒸餾水浸洗 2 次。 6、樣本放入 Schiff Reagent,置于室溫陰暗處,浸染 10~20min。 7、自來水沖洗 10min。 8、樣本置于蘇木素染色液中,染細胞核 1~2min。 9、酸性乙醇分化液分化 2~5s。 10、自來水沖洗 10~15min 后,更換雙蒸水清洗,使其返藍。 11、逐級常規(guī)乙醇脫水。 二甲苯透明,中性樹膠封固。 使用結果 PAS 反應陽性物質>>紅色或紫紅色 細胞核>>藍色 細胞質>>深淺不一的紅色 備注:顏色深淺很大程度上取決于樣品在過碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用時間的長短。 陰性對照(可選): 1、對照切片可以用唾液,取唾液片(過濾后用)處理 30~60min 后,與其他切片共同入過碘酸溶液。 結果應 為陰性。 2、對照片可以淀粉酶,取淀粉酶 1g 于雙蒸水或 PBS(pH5.3) 100ml,處理 30~60min 后,與其他切片共同入過 碘酸溶液。結果應為陰性。 3、如果對照片采用其自身樣本,對照片不經過碘酸溶液這一步,直接入 Schiff Reagent。染色結果:對照片呈 陰性反應,無紫紅色顆粒。 注意事項 1、 切片脫蠟應盡量干凈,否則影響染色效果。 2、 過碘酸氧化時間不宜過久,氧化時的溫度以 18~22℃。 3、 過碘酸溶液和 Schiff Reagent 應置于 4℃密閉保存,使用時避免接觸過多的陽光和空氣。使用前, 提前 30min 取出恢復到在室溫后,避光暗處使用。 4、 酸性乙醇分化液應經常更換新液,其分化時間應該依據切片厚薄、組織的類別和酸性乙醇分化液的新舊而 定,另外分化后自來水沖洗時間應該足夠。 5、 在過碘酸溶液和 Schiff Reagent 中作用時間非常重要,該依據切片厚薄、組織的類別等決定。 6、 本染色液常用于常規(guī)組織切片染色,對于真菌、細胞、極其薄的切片,建議采購糖原 PAS 染色試劑盒(細 胞真菌專用), 因為其過碘酸溶液和蘇木素溶液濃度更低,不宜過染。 7、 冷凍切片染色時間盡量要短。 8、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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