貼壁細(xì)胞培養(yǎng)

細(xì)胞名稱：小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞；RAW 264.7

形態(tài)特性：不規(guī)則圓形

生長特性：貼壁生長

培養(yǎng)條件： 高糖DMEM?，10%FBS

傳代方法： 1:3~1:6傳代

凍存條件：細(xì)胞凍存液

特征特性：此細(xì)胞株源自BALB/c小鼠由Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)的腫瘤?？僧a(chǎn)生溶菌酶；sIg-, Ia-，Thy-1.2-。為檢測到病毒顆粒的分泌，XC斑點(diǎn)形成試驗(yàn)陰性。該細(xì)胞可以胞飲中性紅并吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖；可以經(jīng)抗體依賴分裂綿羊紅細(xì)胞與腫瘤靶細(xì)胞；LPS或PPD處理2天可誘導(dǎo)分裂紅細(xì)胞，但對腫瘤靶細(xì)胞無作用。

細(xì)胞處理方法：

1.???????? 細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至狀態(tài)良好后灌滿培養(yǎng)基運(yùn)輸，獲得細(xì)胞后用酒精棉球擦拭瓶口消毒，然后在超凈臺中操作。

2.???????? 如細(xì)胞生長至70%-80%，將瓶中的培養(yǎng)基移入無菌瓶中留作培養(yǎng)使用，保留5-8mL培養(yǎng)基在37℃、5%的CO2的溫箱中繼續(xù)培養(yǎng)。細(xì)胞培養(yǎng)至90%-100%后，按要求消化傳代。

3.???????? 棄去培養(yǎng)基，用無菌PBS或者其他緩沖液清洗細(xì)胞2次，加入適量胰蛋白酶消化（EDTA胰酶），待細(xì)胞完全脫壁后加培養(yǎng)基吹打混勻，分瓶培養(yǎng)。

注意：

我們使用自產(chǎn)培養(yǎng)基及進(jìn)口血清培養(yǎng)細(xì)胞，在您拿回細(xì)胞后，如想更換其它品牌培養(yǎng)基，請依照逐次替換的原則，先保留培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，多日多次代逐步更換，以減輕對細(xì)胞的刺激。

特別注意：（如使用公共實(shí)驗(yàn)室或初次接觸細(xì)胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)）

1. 收到細(xì)胞后請盡快更換為含10% FBS的新鮮培養(yǎng)基。

2. 如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時(shí)拍照并聯(lián)系售后。

3. 細(xì)胞任何售后問題，均需拍照存檔并在2周之內(nèi)及時(shí)聯(lián)系客服。

相關(guān)產(chǎn)品及貨號：

RPMI 1640?(31800)

細(xì)胞凍存液（24800）

1×PBS緩沖液(pH7.2- 7.4)（P1020）

0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液（T1300）