尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG酶）產(chǎn)品介紹尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG、UDG）來源于大腸桿菌重組克隆表達，分子量為25kDa，可催化含尿嘧啶的單鏈和雙鏈DNA釋放游離尿嘧啶。UNG酶對RNA無活性，主要應用于PCR擴增產(chǎn)物的防污染。
其作用原理基于：如果在PCR反應中以dUTP替代dTTP摻入DNA中，形成了含dU堿基的PCR擴增產(chǎn)物，該酶能選擇性斷裂單鏈和雙鏈DNA中U堿基的糖苷鍵，降解該PCR擴增產(chǎn)物。規(guī)格1U/μl儲存緩沖液20mM Tris-HCl，150mM?NaCl，1mM?EDTA，1mMDTT，0.05%?Tween20，50% glycerol，pH8.0。
試劑組成：
1、UNG?1U/μl
2、10×Reaction Buffer：200mM?Tris-HCl(pH8.0，25℃)，100mM NaCl，10mM EDTA，1mg/ml BSA?；钚远x37℃條件下，1小時降解1μg含dU堿基的單鏈DNA的酶量為1單位。保存條件每天或每周使用保存于-20℃。長期儲存可保存于-70℃，但必須嚴格避免-70℃保存時的反復凍融。
質(zhì)量控制：
1、SDS-PAGE電泳純度大于98%；
2、降解活性、批間差異、穩(wěn)定性；
3、1UUNG在37℃處理3分鐘后，103拷貝以下含U模版應完全降解，不能產(chǎn)生擴增產(chǎn)物；
4、無外源核酸酶活性，無外源內(nèi)切、外切核酸酶污染。
1、Incubate?the?product?for?2?min?at?50℃；
2、Inactivate?UNG?by heating?to?95℃ for?5?min.
注意事項：
1、避免多次凍融，切勿暴露在溫度波動較大之處。溫度波動對產(chǎn)品的穩(wěn)定性有極大影響。
2、UNG酶可以在PCR反應前清除不慎污染的含dUTP的PCR產(chǎn)物，從而避免由于污染導致的假陽性結果；
3、由于不同待擴增基因?qū)UTP的利用效率和對UNG酶的敏感度不同，因此，如果采用UNG體系導致檢測靈敏度下降，應對反應體系進行調(diào)整優(yōu)化；
4、擴增前后要使用專用的區(qū)域和移液器，戴手套操作并經(jīng)常更換，PCR反應完成后切勿打開反應管。以限度的減少PCR產(chǎn)物對樣品的污染。
??備注：產(chǎn)品信息可能會有優(yōu)化升級。請以實際標簽信息為準。
關鍵字： 尿嘧啶DNA糖苷酶（UNG酶/UDG酶）;生化試劑
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