??????DEAE-Dextran細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒(DEAE-Dextran Transfection Kit)是一種適合于把DNA轉(zhuǎn)染到培養(yǎng)的真核細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染試劑盒。
??????關(guān)于DEAE-dextran的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法早在1968年就有相關(guān)論文發(fā)表。DEAE-dextran可以促使DNA結(jié)合到細(xì)胞膜上，然后通過(guò)內(nèi)吞作用(endocytosis)進(jìn)入細(xì)胞?；贒EAE-dextran的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法適用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染(transient tranfection)，但不適用于篩選穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株。DEAE-dextran在較高濃度作用較長(zhǎng)時(shí)間會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生一定毒性。
??????目前基于DEAE-dextran的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法有兩種，一種方法為把DNA和DEAE-dextran混合后加入到細(xì)胞中，另一種方法為先用DEAE-dextran預(yù)處理細(xì)胞，然后再加入DNA。后一種方法是在前一種方法的基礎(chǔ)上經(jīng)過(guò)改進(jìn)而產(chǎn)生的，對(duì)于一些細(xì)胞包括Hela、COS、NIH3T3和KB細(xì)胞等，后一種方法可以增加細(xì)胞對(duì)DNA的攝入量，顯著改善轉(zhuǎn)染效果。氯喹的加入可以抑制溶酶體對(duì)外源DNA的降解，從而提高轉(zhuǎn)染效率。但對(duì)于具體的細(xì)胞、具體的培養(yǎng)條件，如需獲得更加理想的轉(zhuǎn)染效率，必須自行摸索上述各種轉(zhuǎn)染方法，找出優(yōu)化的轉(zhuǎn)染方法。
??????基于DEAE-dextran的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法不僅可以轉(zhuǎn)染貼壁細(xì)胞，也可以轉(zhuǎn)染懸浮細(xì)胞。
??????轉(zhuǎn)染效率可以通過(guò)轉(zhuǎn)染表達(dá)EGFP或其它熒光蛋白的質(zhì)粒進(jìn)行快速鑒定。
??????關(guān)于不同的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑的主要特點(diǎn)和差異方面的比較，以及如何選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞轉(zhuǎn)染試劑，可參考碧云天的相關(guān)網(wǎng)頁(yè)：http://www.beyotime.com/transfection.htm。
??????對(duì)于六孔板而言，一個(gè)包裝的本轉(zhuǎn)染試劑如使用常規(guī)方法可以轉(zhuǎn)染2500個(gè)孔，如使用預(yù)處理方法可以轉(zhuǎn)染200個(gè)孔。
包裝清單：

保存條件：
??????4℃保存，一年有效。
注意事項(xiàng)：
??????使用高純度的DNA或RNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。對(duì)于質(zhì)粒，可以使用碧云天生產(chǎn)的質(zhì)粒大量抽提試劑盒(D0026)進(jìn)行抽提，以保證獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。
??????轉(zhuǎn)染前細(xì)胞必須處于良好的生長(zhǎng)狀態(tài)。
??????試劑盒中各試劑均經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理，可以直接使用。在細(xì)胞轉(zhuǎn)染過(guò)程中要嚴(yán)格注意無(wú)菌操作。
??????需自備用于洗滌的PBS或HBSS，以及用于稀釋10XPBS的無(wú)菌水。
??????稀釋或配制DEAE-Dextran溶液或DNA的1XPBS可以用試劑盒中提供的10XPBS稀釋。
??????氯喹溶液對(duì)人體有害，請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
? ? ? 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
??????為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。?